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文檔簡介
1、多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)作為一種重要的細(xì)胞壁降解酶,參與植物生長發(fā)育的多個生理過程。大量研究表明PG在果實成熟軟化過程中起重要作用,然而在桃中關(guān)于其家族成員的作用報道較少。本研究對桃中PG家族成員進(jìn)行了鑒定,并分析同一質(zhì)地不同耐貯性桃‘淺間白’(不耐貯)和‘秦王’(極耐貯)以及不同質(zhì)地桃‘沙紅’(硬溶質(zhì))和‘金童五號’(不溶質(zhì))果實成熟軟化過程中PG家族成員的表達(dá)特性。此外,以‘赤月’為材料,利用了V
2、IGS(Virus Induced Gene Silencing)技術(shù)對關(guān)鍵成員PpPG21與PpPG22進(jìn)行功能研究,以期明確PG基因在桃果實成熟軟化和質(zhì)地形成中的作用機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:
1、在桃基因組中鑒定出45個PG成員,命名為PpPG1-45,且都含有至少兩個PG基因的保守結(jié)構(gòu)域;45個PpPG成員被分為6簇,包含4-6外顯子以及3-8個內(nèi)含子,除了E簇外其他簇的基因結(jié)構(gòu)相對保守;45個PpPG成員定位在桃的8條
3、染色體上。
2、45個桃PG家族成員中僅有16個PpPG成員在桃果實中表達(dá)。在桃自然成熟軟化過程中,不耐貯的‘淺間白’表現(xiàn)出8個PpPGs(PpPG1,-10,-12,-13,-15,-23,-21,-22)成員表達(dá)上調(diào)并被外源乙烯誘導(dǎo)和1-MCP抑制;在極耐貯的‘秦王’中僅有3個PpPGs(PpPG15,-21,-22)上調(diào)表達(dá)并被外源乙烯誘導(dǎo)。這表明不同耐貯性桃果實在自然成熟過程中參與軟化的PpPGs成員數(shù)量存在差異。另外
4、,‘秦王’中6個PpPGs(PpPG1,-10,-12,-11,-14,-35)的表達(dá)量較低,但在外源乙烯誘導(dǎo)后迅速增加。這些PpPGs可能通過乙烯誘導(dǎo)表達(dá)促進(jìn)果實軟化。此外,PpPG24,-25,-38表達(dá)量低也沒有被乙烯誘導(dǎo),PpPG6,-39則不表達(dá),所以這些PpPGs可能與桃果實的軟化無關(guān)。
3、在硬溶質(zhì)桃‘沙紅’果實成熟軟化過程中,10個PpPGs(PpPG1,-10,-11,-12,-13,-15,-21,-22,
5、-23,-25)呈上調(diào)表達(dá),可能與其果實軟化有關(guān);PpPG24,-35,-38穩(wěn)定表達(dá),PpPG14下調(diào)表達(dá),PpPG6,-39不表達(dá),這些成員可能不參與沙紅果實的軟化。在不溶質(zhì)桃‘金童五號’果實成熟軟化過程中,5個PpPGs(PpPG1,-10,-12,-23,-25)整體呈上調(diào)表達(dá),可能參與不溶質(zhì)桃果實的軟化;PpPG35,-24,-11,-38,-13(穩(wěn)定表達(dá)),PpPG14(下調(diào)表達(dá)),PpPG6,-15,-21,-22,-3
6、9(表達(dá)極低或不表達(dá)),可能不參與‘金童5號’果實軟化。
4、病毒誘導(dǎo)PpPG21,-22沉默后,在貯藏的中后期PpPG21,-22的表達(dá)量顯著低于對照,同時表現(xiàn)出在貯藏的后期硬度顯著高于對照,而乙烯釋放量則顯著低于對照。在整個貯藏期間PpPG21,-22沉默果實的咀嚼性、黏性和回復(fù)性一直高于對照;而除貯藏第6d外,粘著性一直顯著低于對照。此外,PpPG21,-22沉默果實中水溶性和共價結(jié)合型果膠含量降低,而離子結(jié)合型果膠則增
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