硫酸二甲酯處理泡桐叢枝病幼苗形態(tài)變化及SSR和AFLP分析.pdf

1、泡桐叢枝病是由植原體引起的一種傳染性病害，不僅給泡桐生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，而且也嚴(yán)重影響人們種植泡桐的積極性。植物總DNA甲基化水平過高或過低，都會導(dǎo)致植物形態(tài)發(fā)生異常。泡桐叢枝病幼苗DNA甲基化水平低于健康幼苗，清除植原體的幼苗DNA甲基化又可升高到較高水平。因此，研究植原體與泡桐DNA變化的相互關(guān)系可能有利于泡桐叢枝病發(fā)生分子機(jī)理的闡明和防治方法的建立。
　　 本研究用不同濃度硫酸二甲酯(Dimethylsulphonat

2、e，DMS)處理豫雜一號泡桐，白花泡桐及毛泡桐病苗，在觀察幼苗形態(tài)變化的同時，利用巢式PCR檢測植原體，并用SSR和AFLP分析DNA堿基序列的變化情況。現(xiàn)將研究結(jié)果歸納如下：
　　 (1)適宜濃度的DMS處理可使病苗在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榻】得纾嘿|(zhì)量濃度為15mg·L-1的DMS處理3h幼芽形成的幼苗仍呈現(xiàn)叢枝病幼苗癥狀，而質(zhì)量濃度等于15mg·L-1，處理5h或大于15mg·L-1處理3h、5h的幼芽形成的幼苗形態(tài)上均呈現(xiàn)健康苗狀態(tài)

3、，經(jīng)巢式PCR檢測，除15mg·L-1DMS處理5h的幼苗內(nèi)仍有植原體存在，其它形態(tài)健康苗均不存在植原體。
　　 (2)泡桐叢枝病幼苗與健康幼苗和DMS處理叢枝病幼苗DNA的SSR擴(kuò)增位點相同。在SSR分子標(biāo)記水平下，45對引物擴(kuò)增電泳結(jié)果說明，經(jīng)DMS處理的3種泡桐叢枝病幼苗與其健康苗的DNA堿基序列沒有發(fā)生變化。
　　 (3)泡桐叢枝病幼苗與健康幼苗和DMS處理叢枝病幼苗的DNA在AFLP水平上未發(fā)現(xiàn)DNA堿基序列的