大菱鲆在不同溫度、鹽度及其交互作用下機(jī)體生理生化指標(biāo).pdf

1、以大菱鲆幼魚(yú)為研究對(duì)象,采用生物化學(xué)、分子生物學(xué)等技術(shù)手段,對(duì)溫度以及鹽度脅迫下的肝臟、腎臟、皮膚、肌肉、血液等多種組織,開(kāi)展了如抗氧化酶活性分析、同工酶譜分析以及免疫因子的表達(dá)分析等生理生化指標(biāo)的研究。為今后大菱鲆耐溫耐鹽選育、養(yǎng)殖推廣和疾病防治方面的工作,提供科學(xué)理論依據(jù)。
　　采用兩因素交叉分組的方法,設(shè)計(jì)17℃、20℃、23℃、25℃和28℃五個(gè)溫度梯度,以及5‰、10‰、20‰、正常鹽度(30‰)、40‰五個(gè)鹽度梯度,在

2、此基礎(chǔ)上產(chǎn)生25種溫度和鹽度組合。研究溫度和鹽度共同作用對(duì)大菱鲆幼魚(yú)活性、存活情況以及體表粘液、血液、鰓以及肝臟中抗氧化酶(SOD、CAT、GP-X)活力的影響。結(jié)果表明:在溫度與鹽度組合為17℃、30以及17℃、20中,大菱鲆幼魚(yú)的攝食積極性以及存活率較高,表明水溫和鹽度對(duì)大菱鲆幼魚(yú)攝食、死亡率有著顯著的影響;溫度和鹽度都能夠?qū)Υ罅怫矣佐~(yú) SOD、CAT、GP-X活力有顯著影響(P<0.05),隨著水溫升高,肝臟、鰓、血清以及粘液 S

3、OD、CAT與GP-X活力呈折線變,其活力在20℃和23℃時(shí)波動(dòng)較大;整體而言肝臟、鰓、血清以及粘液 SOD、CAT、GP-X在鹽度30時(shí)活力較低,在鹽度5和40時(shí)活力較高,其活力隨著鹽度由30降低而升高,隨著鹽度由30升高而升高;溫度和鹽度間的交互作用對(duì)肝臟、鰓、血清以及粘液 SOD、CAT、GP-X活力都產(chǎn)生顯著影響(P<0.05)。
　　采用聚丙烯酰胺凝膠電泳方法,對(duì)在常溫(13℃)、20℃、23℃、25℃、28℃以及5‰、

4、10‰、20‰、30‰(對(duì)照組)和40‰中的大菱鲆的肝臟、肌肉、鰓、皮膚這四種組織的超氧化物歧化酶、酯酶、蘋(píng)果酸脫氫酶、谷氨酸脫氫酶的表達(dá)情況進(jìn)行分析。結(jié)果顯示:在溫度和鹽度的脅迫下,各組織的同工酶的表達(dá)都受到了一定的影響,這種影響基本上都表現(xiàn)為酶帶的著色強(qiáng)度的改變。SOD、EST和MDH活性隨著溫度升高而增加,當(dāng)溫度達(dá)到28℃時(shí),活性有所降低;對(duì) GDH的影響則因組織而異;鹽度變化時(shí)各組織 SOD、EST、MDH以及鰓 GDH活性與對(duì)

5、照組相比都表現(xiàn)為增強(qiáng),肝臟、肌肉、皮膚中的GDH活性則表現(xiàn)為減弱。
　　利用RT-PCR方法,檢測(cè)在20℃、23℃、25℃、28℃以及5‰、10‰、20‰、30‰、40‰條件下,肝臟、腎臟、皮膚中 IgM、溶菌酶、抗菌肽、凝集素、熱激蛋白這幾種免疫因子的反應(yīng)變化情況。結(jié)果顯示:3種組織中免疫因子的表達(dá)量隨著溫度的變化有著顯著的差異;肝臟中各免疫因子的表達(dá)量受鹽度變化的影響較小,腎臟中各免疫因子的表達(dá)量在鹽度40中發(fā)生極顯著變化,皮