自然休眠期油桃花芽碳水化合物變化規(guī)律及相關基因的表達分析.pdf

1、本研究以十年生露天和三年生盆栽‘曙光'油桃（Prunus persica var.Nectarine cv.Shuguang.）花芽為試材，主要研究了桃樹花芽RNA提取、碳水化合物代謝及其相關基因的季節(jié)性表達及低溫處理下相關基因的表達變化；利用抑制差減雜交技術（SSH），以休眠期花芽RNA為Tester，以休眠解除期花芽RNA為Driver，構建花芽休眠相關基因的差減cDNA文庫。主要結論如下：
　　 1、經改良CTAB法提取的

2、油桃花芽RNA，電泳檢測條帶清晰,28S與18S亮度比約為2:1，說明RNA完整性較好；核酸分光光度計檢測A260/A280為2.0左右，說明無蛋白等雜質殘留，能滿足基因表達分析等后續(xù)試驗的要求；而Trizol試劑盒法所提取的RNA，幾乎檢測不到條帶，難以達到進一步試驗的要求。
　　 2、休眠期間可溶性糖（主要是蔗糖）含量尤其是在內休眠后期顯著增加，淀粉含量則呈相反趨勢，在內休眠后期含量降低，預示著內休眠的結束；葡萄糖和果糖含量

3、稍有降低，變化不大；糖代謝相關基因AGPase、HisH3、HK1、SuSy、UGPase表達明顯不同：AGPase無明顯變化；HisH3和HK1在進入內休眠前有明顯上升，SuSy則與之相反；UGPase含量總體上呈上調趨勢，只是在進入內休眠后稍有下調。表明進入內休眠后，依賴HK1的糖信號轉導途徑起重要作用，UGPase在促進蔗糖合成上起著重要作用；4 ℃低溫處理后發(fā)現：與細胞分裂有關的基因HisH3含量急劇升高，而后下降，說明細胞分裂