休眠誘導期油桃花芽蛋白組和呼吸途徑分析.pdf

1、多年生落葉果樹冬天會經歷嚴寒等逆境脅迫，在長期的進化過程中，果樹形成了以芽體休眠的方式適應這種逆境，所以在嚴冬來臨前及時建立起休眠狀態(tài)是芽體發(fā)育中一個重要階段(休眠誘導期)。在花芽休眠誘導進程中，果樹芽體通過表達特異基因來感受逐漸改變的環(huán)境因子(短日照和低溫)而發(fā)育，使細胞內發(fā)生一系列復雜而有序的變化從而建立起與生長期完全不同蛋白質組成。本實驗以十年生的曙光油桃花芽為試材，利用雙向電泳和生物質譜分析技術相結合的方法研究花芽休眠誘導期的三

2、個發(fā)育階段(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期)的差異表達蛋白質組并同時檢測花芽在這三個發(fā)育階段的生理生化變化，獲得了如下研究結果：
　　 1、花芽休眠誘導進程中，我們通過2-DE共發(fā)現(xiàn)了13個穩(wěn)定的差異表達的蛋白點，7個表現(xiàn)出上調趨勢，6個表現(xiàn)出下調趨勢；應用MS技術成功鑒定出其中的11個蛋白點，將它們進行功能分類后，發(fā)現(xiàn)上調的蛋白中6個屬于脅迫和防御響應蛋白類，1個屬于光合作用類；而下調蛋白中的2個屬于糖酵解和能量代謝類，1個屬于細胞內信號轉導和

3、細胞周期調控的蛋白類，1個屬于細胞壁重塑和細胞壁代謝蛋白類。
　　 2、花芽休眠誘導進程中，芽體內自由水含量逐漸降低，尤其在Ⅲ期含量降低更顯著；芽體內H2O2含量先升高后降低，在Ⅱ期出現(xiàn)峰值。
　　 3、花芽休眠誘導進程中，芽體總呼吸速率(Vt)下降，三羧酸循環(huán)(TCA)途徑活性降低；磷酸戊糖途徑(PPP)在Ⅱ期下降，在Ⅲ期增加。
　　 4、花芽休眠誘導進程中，細胞色素途徑活性(p'Vcyt)和其占總呼吸活性比值

4、(p'Vcyt/Vt)均降低，但活性高于交替途徑實際活性(pValt)；交替途徑實際活性(pValt)和其占總呼吸比值(pValt/Vt)均在Ⅱ期下降，在Ⅲ期增加。
　　 綜上所述，可以發(fā)現(xiàn)油桃花芽休眠誘導進程中芽體內發(fā)生了復雜的變化。差異表達蛋白質組實驗結果表明：Ⅱ期是芽體細胞分裂和生長開始停止的階段：Ⅲ期是芽體獲得并增強其抗逆能力的關鍵時期；呼吸代謝途徑的實驗結果表明：三羧酸(TCA)生化呼吸途徑和細胞色素途徑活性(p'Vc