養(yǎng)殖許氏平鲉兩種細菌性病原的分離、鑒定及組織病理學(xué)研究.pdf

1、許氏平鲉是我國北方地區(qū)海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖的重要經(jīng)濟魚類之一,因其生長快、耐低溫、肉質(zhì)鮮美,深受養(yǎng)殖者和消費者的喜愛。然而,隨著養(yǎng)殖規(guī)模的擴大、集約化程度的提高,加之疾病防控技術(shù)水平不高,造成許氏平鲉病害尤其是細菌性疾病時有發(fā)生,給廣大養(yǎng)殖業(yè)者造成了較大的經(jīng)濟損失。
　　2011年8月,青島某養(yǎng)殖場網(wǎng)箱養(yǎng)殖許氏平鲉爆發(fā)皮膚潰瘍病,累積死亡率達到30％,病魚主要癥狀為體表全身性充血、潰爛,解剖可見腹腔有血色積水,肝臟不同程度腫脹、充血,脾、

2、腎腫大,呈糜爛狀;2011年7月,煙臺某養(yǎng)殖場網(wǎng)箱養(yǎng)殖許氏平鲉爆發(fā)魚腸道弧菌病,死亡率達到30%~40%,主要表現(xiàn)為嘴部、鰓蓋及鰭條充血,胸鰭及尾鰭腐爛,解剖發(fā)現(xiàn)腹腔有積液,肝臟大面積充血,腸道有黃綠色膿液流出。從兩例病魚樣品中分別分離得到1株優(yōu)勢菌,其中分離自青島病例的菌株標號為SS-1,分離自煙臺病例的菌株標號為SS-3。本研究對兩株致病菌的形態(tài)學(xué)特征、生理生化特性、16S rRNA基因序列同源性、致病性和藥物敏感性進行了研究,并對

3、病魚的組織病理變化進行了觀察分析。
　　菌株SS-1為革蘭氏陰性菌,弧形短桿狀,兩端鈍圓,極生單鞭毛;生理生化結(jié)果表明該菌與鰻利斯頓氏菌生理生化指標相符;對該菌16S rRNA基因序列分析,結(jié)果顯示該菌與鰻利斯頓氏菌同源性最高,因此,將其鑒定為鰻利斯頓氏菌(Listonella anguillarum)。經(jīng)人工感染實驗證實該菌對健康的許氏平鲉具有較強的致病性,且感染癥狀與自然發(fā)病癥狀相似。該菌對復(fù)達欣、氟羅沙星、萘啶酸、新生霉素等

4、抗生素藥物高度敏感。
　　對感染皮膚潰瘍病的許氏平鲉進行組織病理觀察,結(jié)果顯示病魚鰓絲的鰓小片充血,上皮細胞和粘液細胞增生、壞死、脫落,造成鰓小片變短、變粗、相互粘連;肌纖維斷裂、壞死,結(jié)構(gòu)溶解,肌纖維之間有血細胞浸潤;肝臟組織發(fā)生明顯的脂肪變性,肝細胞壞死、溶解、結(jié)構(gòu)模糊;脾臟組織壞死,結(jié)構(gòu)不整,出現(xiàn)褐色斑塊;腎小管結(jié)構(gòu)模糊,相互融合,管腔消失,紅細胞數(shù)量減少;腸粘膜上皮細胞脫落,固有層壞死,腸壁肌肉層充血、發(fā)炎,明顯的組織增生

5、。
　　菌株SS-3為革蘭氏陰性菌,短桿狀,兩端鈍圓,端生一根鞭毛;通過測定該菌的16S rRNA基因序列,并結(jié)合細菌形態(tài)學(xué)和生理生化實驗結(jié)果,將該菌鑒定為魚腸道弧菌(Vibrio ichthyoenteri)。經(jīng)人工感染實驗證實該菌對健康的許氏平鲉具有較強的致病性,感染癥狀與自然發(fā)病癥狀相似。藥敏實驗結(jié)果表明該菌對青霉素、菌必治、氟羅沙星、克拉霉素、丁胺卡那、美滿霉素等多種藥物高度敏感。
　　感染該菌的許氏平鲉病魚鰓絲充血

6、,鰓小片上皮細胞增生、壞死、脫落,炎性細胞浸潤,鰓小片相互粘連;肌肉組織淤血,血細胞富集,肌纖維細胞變性、壞死,炎性細胞浸潤,形成結(jié)節(jié);肝細胞空泡變性,細胞結(jié)構(gòu)模糊,肝血竇、毛細血管淤血;脾臟充血,細胞壞死,結(jié)構(gòu)模糊,HE染色呈褐色;腎小管萎縮,上皮細胞脫落,管腔消失,腎間質(zhì)充斥大量紅細胞;腸絨毛嚴重萎縮,上皮細胞壞死、脫落,肌肉層出血,炎性細胞浸潤。
　　根據(jù)細菌分離和組織病理學(xué)觀察結(jié)果,兩種致病菌感染許氏平鲉后都能造成魚體多種