海洋生防酵母菌對水果采后病害的生物防治.pdf

1、病原菌引起的水果腐爛嚴(yán)重制約著我國水果產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。使用化學(xué)殺菌劑是防治果實采后病害常用的方法,但化學(xué)殺菌劑存在污染環(huán)境、不易分解、危害人類健康等缺點。生物殺菌劑對保護(hù)生態(tài)環(huán)境、減少食品中農(nóng)藥的殘留、確保人體健康具有深遠(yuǎn)的意義。近年來,利用微生物進(jìn)行生物防治的研究已經(jīng)取得了突破性進(jìn)展,被認(rèn)為是最有希望替代化學(xué)殺菌劑的方法之一。海洋酵母菌能處于低溫或高濃度NaCl環(huán)境中,具有耐受低溫和高滲透壓脅迫等優(yōu)良特性,在果實采后病害的防治中可能具有獨

2、特的優(yōu)勢。本研究主要從以下幾個方面進(jìn)行:
　　 一、采用離體和活體篩選兩種方式篩選出具有生防效果的海洋酵母菌。應(yīng)用YPD培養(yǎng)基開展的生防實驗,發(fā)現(xiàn)61種菌株中標(biāo)號為DG-1、SA-1、M-1、NH-1、NJB-1、ZZF、HZ-9、PA-1、W-1的9株酵母菌株對灰霉(Botrytis cinerea)的抑制效果明顯。標(biāo)號為DG-1、HZ-2、SA-1、NH-1、ZZF、HF-2、HH-3的7株酵母菌對褐腐病菌(Monilini

3、a fructicola(G.Wint.)Honey)的抑制效果明顯。其中其中標(biāo)號為DG-1、SA-1、ZZF、和NH-1的酵母菌株對灰霉(B.cinerea)和褐腐(M.fructicola)都具有顯著抑菌效果。將上述初篩出來的4株酵母菌,進(jìn)行活體實驗時發(fā)現(xiàn),編號為DG-1的菌株的生防效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于編號為DG-1、SA-1、ZZF和NH-1的酵母菌株,能顯著降低果實發(fā)病率。
　　 二、研究了海洋酵母菌DG-1對病害的防治效果。實

4、驗結(jié)果顯示編號為DG-1的海洋酵母菌菌液濃度與桃果實的腐爛程度成反比,且海洋酵母菌DG-1的菌液濃度與果實的發(fā)病率和病斑直徑存在相關(guān)性。但海洋酵母菌DG-1對灰霉(B.cinerea)孢子萌發(fā)率的影響效果并不明顯,并不能完全抑制孢子的萌發(fā)出芽。此外,研究發(fā)現(xiàn)海洋酵母菌DG-1在PDA培養(yǎng)基上對灰霉(B.cinerea)的抑制效果要比在YPD培養(yǎng)基上強。
　　 三、分別從形態(tài)學(xué)及生理生化特征上對編號為DG-1的海洋酵母菌菌株進(jìn)行了

5、鑒定,實驗結(jié)果顯示此菌株和出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)最為相似。此外,本文還分別對此酵母菌進(jìn)行了18sRNA及ITS親緣關(guān)系鑒定,其鑒定結(jié)果與形態(tài)及生理生化反應(yīng)鑒定的結(jié)果一致,可初步鑒定海洋酵母菌株DG-1為出芽短梗霉(A.pullulans)。
　　 四、通過對出芽短梗霉(A.pullulans)生防機理的初步探究,發(fā)現(xiàn)出芽短梗霉(A.pullulans)的懸液對灰霉(B.cinerea)的抑制

6、效果最顯著,但出芽短梗霉(A.pullulans)的熱處理液和超濾上清液對病菌均無明顯的抑制作用,初步證明出芽短梗霉(A.pullulans)濾液中不存在可以抑制灰霉(B.cinerea)的有效物質(zhì)。本實驗初步認(rèn)為出芽短梗霉(A.pullulans)的生防機制為營養(yǎng)競爭型。
　　 五、對出芽短梗霉(A.pullulans)生長培養(yǎng)條件的研究結(jié)果顯示,發(fā)現(xiàn)出芽短梗霉(A.pullulans)對酸堿度有很強的耐受性,尤其是在堿性條件