菌肽蛋白對斷奶仔豬生產(chǎn)性能、腸道粘膜免疫功能和腸道菌群的影響.pdf

1、豆粕是主要的飼用植物蛋白源，但它含有胰蛋白酶抑制因子、大豆抗原蛋白等多種抗?fàn)I養(yǎng)因子，易引起幼齡動物腸道損傷、腹瀉等問題。經(jīng)微生物發(fā)酵后，豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子大幅度降低，大分子蛋白質(zhì)降解為小分子物質(zhì)，從而易被動物消化吸收。因此，發(fā)酵豆粕研究一直是人們關(guān)注的熱點(diǎn)之一。然而，經(jīng)烘干處理后，發(fā)酵豆粕中部分營養(yǎng)物質(zhì)易受破壞、益生菌被殺滅，使其營養(yǎng)價(jià)值降低。
　　本課題以不經(jīng)烘干處理的高濕發(fā)酵豆粕即菌肽蛋白為試驗(yàn)材料，以斷奶仔豬為試驗(yàn)對象，研究了

2、菌肽蛋白對斷奶仔豬生長、腹瀉、養(yǎng)分消化、消化酶活性和腸道形態(tài)的影響，運(yùn)用高通量測序技術(shù)檢測了腸道菌群結(jié)構(gòu)的變化，并通過分析腸道粘膜細(xì)胞因子、TLR樣受體、HSP70、SIgA和MUC2含量的變化，探討了對腸道粘膜免疫及相關(guān)信號通路的影響，旨在探究菌肽蛋白在斷奶仔豬上的應(yīng)用效果及其作用機(jī)理，為其在養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
　　選擇21日齡斷奶、體重6.41kg左右的“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬120頭，隨機(jī)分為4組（每組3個(gè)

3、重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10頭豬）。對照組飼喂玉米豆粕型基礎(chǔ)日糧，其它三組分別飼喂以5％、10％和15％菌肽蛋白替代基礎(chǔ)日糧中部分普通豆粕的日糧，使各組日糧的粗蛋白含量保持一致。試驗(yàn)豬采用群飼，自由采食和飲水，試驗(yàn)期21d。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，分別從每組隨機(jī)選取6頭共12頭進(jìn)行屠宰（每個(gè)重復(fù)2頭，公母各半），采集樣品并檢測相關(guān)指標(biāo)。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1.飼養(yǎng)和消化試驗(yàn):10％和15％菌肽蛋白組平均日增重較對照組分別提高了16.

4、6％(P＜0.05)和23.0％(P＜0.05)。與對照組相比，10％和15％菌肽蛋白組料重比降低了9.7％(P＜0.05)和11.4％(P＜0.05)。5％、10％和15％菌肽蛋白組腹瀉率分別降低了10.9％(P＜0.05)、30.7％(P＜0.05)和36.5％(P＜0.05);10％和15％菌肽蛋白組與5％菌肽蛋白組相比下降了22.1％(P＜0.05)和28.7％(P＜0.05)。與普通豆粕組相比，10％和15％菌肽蛋白組粗蛋白和

5、粗脂肪表觀消化率均明顯提高(P＜0.05)。
　　2.小腸形態(tài):菌肽蛋白組十二指腸絨毛高度明顯提高(P＜0.05)，空腸和回腸隱窩深度明顯降低(P＜0.05)，十二指腸和空腸絨毛高度/隱窩深度顯著升高(P＜0.05)。掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，普通豆粕組空腸絨毛受損較嚴(yán)重，而菌肽蛋白組空腸絨毛排列整齊緊密呈指狀，表面光滑完整。透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，普通豆粕組空腸微絨毛短而稀，生長不整齊，而菌肽蛋白組空腸微絨毛長、密、整齊。腸道通透性相關(guān)指標(biāo)檢

6、測發(fā)現(xiàn)，菌肽蛋白組血清D-乳酸水平、DAO活性和內(nèi)毒素含量大幅度下降(P＜0.05)。
　　3.消化酶活性:菌肽蛋白組與普通豆粕組相比胰臟和十二指腸內(nèi)容物淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性均顯著提高(P＜0.05)。而且，菌肽蛋白組空腸和回腸粘膜蔗糖酶、乳糖酶和麥芽糖酶活性明顯高于普通豆粕組(P＜0.05)。
　　4.腸道菌群及相關(guān)指標(biāo):高通量測序結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腸道優(yōu)勢菌主要有厚壁菌和擬桿菌。與對照組相比，菌肽蛋白組厚壁菌比例顯著提高

7、(P＜0.05)，擬桿菌和變形菌比例顯著降低(P＜0.05)。腸道內(nèi)容物a-半乳糖苷酶、a-葡萄糖苷酶和β-半乳糖苷酶活性明顯升高，β-葡萄糖苷活性顯著下降(P＜0.05)。腸道內(nèi)容物丙酸和丁酸含量顯著升高(P＜0.05);
　　5.腸粘膜免疫相關(guān)指標(biāo):菌肽蛋白顯著降低了腸粘膜促炎細(xì)胞因子IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-a和TLR4受體含量(P＜0.05)，顯著提高了抑炎細(xì)胞因子IL-10和HSP70含量(P＜0.05)。

8、而且，腸粘液SIgA和MUC2含量大幅度升高(P＜0.05)。
　　6.抗氧化和免疫指標(biāo):與普通豆粕組相比，15％菌肽蛋白組血清和肝臟T-AOC含量和GSH-Px、SOD活性均顯著提高(P＜0.05)。菌肽蛋白組MDA含量均顯著下降(P＜0.05)。菌肽蛋白對血清和肝臟CAT活性無顯著影響(P＞0.05)。與普通豆粕組相比，15％菌肽蛋白組的IgA、IgM和補(bǔ)體C3、C4含量顯著上升(P＜0.05)。
　　7.血清生化指標(biāo):

9、與普通豆粕組相比，菌肽蛋白組血清TP和AKP性活均明顯提高(P＜0.05);15％菌肽蛋白組血清BUN含量顯著低于其它處理組(P＜0.05)。
　　小結(jié):(1)飼喂菌肽蛋白可明顯提高斷奶仔豬平均日增重，降低料重比和腹瀉率，從而提高斷奶仔豬生產(chǎn)性能;(2)可提高胰臟和十二指腸內(nèi)容物消化酶活性和小腸粘膜二糖酶活性，從而增強(qiáng)斷奶仔豬消化功能，提高對粗蛋白和粗脂肪消化率;(3)提高小腸絨毛高度，降低隱窩深度，改善絨毛形態(tài)，而且可提高微絨毛

10、長度和密度，從而有利于營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收;(4)高通量測序結(jié)果顯示，菌肽蛋白可增加革蘭氏陽性菌（厚壁菌門）比例，減少革蘭氏陰性菌（擬桿菌門、變形菌門）比例來調(diào)節(jié)腸道菌群結(jié)構(gòu);并提高腸道內(nèi)容物細(xì)菌酶活性和丁酸含量，從而改善腸道內(nèi)部環(huán)境;(5)菌肽蛋白可降低腸粘膜TLR4含量，影響腸粘膜炎性細(xì)胞因子釋放，使抑炎因子IL-10含量提高，促炎因子IL-2、IL-6、IFN-γ和TNF-a含量降低;還可提高腸粘膜HSP70、MUC2和SIgA含量