河蚌多糖對羅非魚腸道黏膜免疫和菌群的影響.pdf

1、本文以羅非魚的腸道為研究對象，選用體長10cm左右、初體重(75.0±5.0)g健康羅非魚，隨機分成4組，每組20尾，分別在每公斤基礎飼料中添加0.05％、0.1％、0.15％的河蚌多糖，飼喂一個月，研究河蚌多糖對羅非魚腸道黏膜形態(tài)和腸道相關免疫細胞的影響、河蚌多糖對腸道溶菌酶活性的影響和河蚌多糖對羅非魚腸道微生態(tài)的影響，旨在探討河蚌多糖對羅非魚腸道黏膜免疫的作用。本論文分三個試驗進行。 試驗一：研究河蚌多糖對羅非魚腸黏膜結構和

2、腸道相關免疫細胞的影響。試驗采用傳統(tǒng)的制作組織學切片的方法，應用顯微鏡進行觀察。 采用HE染色法檢測羅非魚腸絨毛形態(tài)變化。結果表明：添加0.05％河蚌多糖組的前腸腸絨毛長度顯著長于對照組的前腸腸絨毛長度，添加0.1％河蚌多糖組的前腸腸絨毛長度與對照組相比增加了29.61％，差異極顯著(P<0.01)。對于中腸和后腸來說，添加了0.1％河蚌多糖的試驗組，腸絨毛長度分別較對照組都有顯著的增長(P<0.05)；羅非魚的腸絨毛寬度的變化

3、相對于對照組來說差異不明顯；在前腸部位，添加0.1％河蚌多糖的試驗組肌層厚度與對照組相比，顯著增加了18.83％(P<0.05)。后腸部位，添加不同劑量的多糖組和對照組相比，肌層厚度均有不同程度的增厚。 采用阿利新蘭醋酸染色檢測羅非魚前腸、中腸、后腸杯狀細胞的數(shù)量變化，探討不同濃度的河蚌多糖對羅非魚腸道內(nèi)杯狀細胞數(shù)量的影響。結果表明：添加0.05％和0.1％的河蚌多糖對羅非魚的前腸和中腸的杯狀細胞都有顯著的影響(P<0.01)。

4、 采用奧新蘭-沙黃染色法檢測羅非魚前腸、中腸和后腸肥大細胞數(shù)量變化，探討不同水平的河蚌多糖對羅非魚腸道內(nèi)肥大細胞數(shù)量的影響。結果顯示：不同水平的河蚌多糖對羅非魚腸道肥大細胞數(shù)量的影響不大，但有增加的趨勢。 采用HE染色法檢測羅非魚前腸、中腸、后腸中腸上皮內(nèi)淋巴細胞數(shù)量變化，探討不同水平的河蚌多糖對羅非魚腸道內(nèi)淋巴細胞的數(shù)量的影響。結果表明：添加0.05％多糖組和添加0.1％多糖組對前腸和中腸的對照組來說，腸道上皮內(nèi)淋巴細

5、胞數(shù)量都有顯著的增加。 試驗二：研究河蚌多糖對羅非魚腸道中溶菌酶的影響。飼喂結束后，每池取4尾魚。無菌解剖，取出相應的魚的腸道組織，然后根據(jù)溶菌酶試劑盒的方法操作檢測羅非魚前腸、中腸、后腸中溶菌酶的活性。結果表明，在飼料中添加0.1％的河蚌多糖能顯著增加羅非魚前腸和中腸中溶菌酶的活性。 試驗三：研究河蚌多糖對羅非魚腸道微生態(tài)的影響。采用非培養(yǎng)法，直接提取腸道內(nèi)細菌的總DNA，然后采用16s rDNA的PCR-DGGE的技