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文檔簡介
1、腸道菌群與人類的健康息息相關(guān)。腸道菌群可以參與物質(zhì)代謝,協(xié)助宿主完成營養(yǎng)吸收,還可以合成人體必需的維生素。除此之外,腸道菌群失調(diào)還與很多疾病,比如糖尿病、胃腸道疾病、肥胖、心血管疾病甚至精神疾病相關(guān)。
微生物的結(jié)構(gòu)組成會受到很多因素的影響,比如宿主基因型、年齡、飲食、抗生素等。抗腫瘤藥物存在毒副作用,這種毒副作用亦能夠影響腸道菌群結(jié)構(gòu),但其作用機(jī)制尚不明確。因此,本文以此為切入點,進(jìn)行口服抗腫瘤藥物卡培他濱對小鼠腸道菌群和免疫
2、相關(guān)基因表達(dá)的影響研究,以期揭示藥物影響腸道菌群及免疫系統(tǒng)的作用機(jī)制。
以小鼠為模型,進(jìn)行短、中、長(下稱Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)三個時期灌胃,灌胃劑量822mg/Kg/day。
觀察實驗小鼠的表型,監(jiān)測體重,結(jié)果顯示實驗組小鼠體重下降,背毛枯槁,提示卡培他濱影響了小鼠腸道正常的消化吸收功能,從而導(dǎo)致小鼠體質(zhì)量下降。
通過16s rRNA基因測序技術(shù)對實驗小鼠不同時期糞便、腸內(nèi)容物、腸黏液中菌群的多樣性及結(jié)構(gòu)組成進(jìn)行分
3、析,發(fā)現(xiàn)糞便中的優(yōu)勢菌群為擬桿菌門、厚壁菌門;腸黏液、腸內(nèi)容物中的優(yōu)勢菌群為厚壁菌門、擬桿菌門和變形菌門。糞便菌群與腸黏液菌群、腸內(nèi)容物菌群,存在明顯差異。腸黏液菌群和腸內(nèi)容物菌群相似度較高,差異不顯著。糞便菌群和腸內(nèi)容物菌群,實驗組和對照組之間有顯著差異,但發(fā)生差異的菌種并不多。與之相比,實驗組腸黏液和對照組腸黏液中菌群差異非常顯著,而腸黏液是黏膜免疫的組成部分,提示腸道菌群與免疫系統(tǒng)相關(guān)。
通過轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)篩選Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ
4、三個時期實驗組和對照組中差異表達(dá)基因,以及這些差異表達(dá)基因相關(guān)的信號通路,隨后進(jìn)一步篩選差異表達(dá)的免疫相關(guān)基因和它們參與的信號通路。研究結(jié)果顯示,Ⅰ期實驗組共有334個差異表達(dá)基因,上調(diào)201個,下調(diào)133個。Ⅱ期實驗組共有141個差異表達(dá)基因,上調(diào)68個,下調(diào)73個。Ⅲ期實驗組共有221個差異表達(dá)基因,上調(diào)165個,下調(diào)56個。三個時期篩選得到的免疫相關(guān)差異基因共25個。這些免疫差異基因參與的通路有:NOD樣受體信號通路(NOD-li
5、ke receptor signaling pathway)、T細(xì)胞受體信號通路(T cell receptor signaling pathway)、TOll樣受體信號通路(Toll-like receptor signaling pathway)、抗原呈遞(Antigen processing and presentation)、趨化因子信號通路(Chemokine signaling pathway)、FcγR介導(dǎo)的吞噬通路(Fc
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