雞毒支原體F弱毒疫苗對(duì)肉雞生長(zhǎng)及免疫性能影響的研究.pdf

1、雞毒支原體（Mycoplasma gallisepticum，MG）是引發(fā)雞慢性呼吸道疾?。╟hronic respiratory disease，CRD）和火雞傳染性竇炎（infectious sinusitis）的主要病原菌。MG在國內(nèi)雞場(chǎng)的感染率很高，除大多數(shù)的祖代種雞場(chǎng)進(jìn)行疫苗免疫外，商品蛋雞和肉雞場(chǎng)多數(shù)都只用藥物來維持雞群的健康，使MG的徹底控制存在一定的局限性，也給養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失。因此，利用MG F疫苗對(duì)CRD進(jìn)行

2、防控具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本研究的目的主要包括：①建立一種快速、特異的雙重PCR檢測(cè)方法，以區(qū)別MG F疫苗株與MG強(qiáng)毒株；②研究MG F疫苗免疫對(duì)商品肉雞和種肉雞生產(chǎn)及免疫性能的影響，并探索其合理免疫程序。本研究?jī)?nèi)容包括以下幾個(gè)部分：
　　 試驗(yàn)一：雞毒支原體強(qiáng)毒株與F 疫苗株雙重PCR檢測(cè)方法的建立
　　 試驗(yàn)選用標(biāo)準(zhǔn)MG F 弱毒疫苗株和國際實(shí)驗(yàn)室公認(rèn)MG 標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒R 株，根據(jù)R 株的pvpA基因序列和F 疫苗株假定

3、的α磷酸海藻糖酶基因序列，設(shè)計(jì)2 對(duì)引物R1、R2和F1、F2，在單一PCR的基礎(chǔ)上，建立檢測(cè)MG 強(qiáng)毒株和F 疫苗株的雙重PCR方法。該方法特異性強(qiáng)，敏感度高，能同時(shí)檢測(cè)的MG R 株和F株的DNA最低含量分別為0.45ng和0.25ng。與傳統(tǒng)的MG分離鑒定方法相比，該方法操作簡(jiǎn)便，能直接對(duì)臨床樣品進(jìn)行檢測(cè)，并區(qū)分出強(qiáng)、弱毒株，為MG陰性雞群的建立提供了重要的技術(shù)手段。試驗(yàn)表明，喉、氣管棉拭子為首選檢測(cè)對(duì)象，其結(jié)果具有良好的實(shí)際應(yīng)用

4、價(jià)值。
　　 試驗(yàn)二：雞毒支原體F 疫苗對(duì)商品肉雞生長(zhǎng)及免疫性能的影響
　　 試驗(yàn)選用200只1日齡健康三黃肉雞，采用單因素4水平隨機(jī)設(shè)計(jì)，每組50只，分為免疫攻毒組、攻毒組、免疫組和對(duì)照組，相應(yīng)為試驗(yàn)一組、試驗(yàn)二組、試驗(yàn)三組和對(duì)照組。在1日齡和16日齡對(duì)試驗(yàn)一組和三組進(jìn)行兩次F疫苗免疫，并在24日齡時(shí)對(duì)試驗(yàn)一組和二組進(jìn)行攻毒，統(tǒng)計(jì)每組雞1-42日齡的增重和耗料量；在攻毒后隔7天每組剖殺5只雞，采集喉拭子、氣囊拭子和喉頭

5、、肺臟、肝臟等組織，運(yùn)用雙重PCR方法檢測(cè)，并進(jìn)行心臟采血，對(duì)血清中鈣離子（SCA）、磷離子（SP）、總膽固醇（SCHOL）、總蛋白（TP）和尿素氮（SUN）成分進(jìn)行測(cè)定分析；對(duì)31日齡和38日齡所采血液通過HA-HI試驗(yàn)進(jìn)行NDV免疫抗體檢測(cè)分析。
　　 結(jié)果顯示，免疫攻毒組所檢測(cè)到的R株數(shù)比攻毒組低60％。免疫組總增重優(yōu)于其它三組，較試驗(yàn)一組、二組和三組分別提高了14.2％、19.66％和10.38％，差異顯著（p<0.05

6、），料重比分別低0.12、0.37和0.14；抗體水平也一直維持在較高的滴度，與攻毒組之間存在顯著差異性（p<0.05），與對(duì)照組相比前期差異顯著（p<0.05），后期無顯著差異（p>0.05），而與免疫攻毒組之間無顯著性差異（p>0.05）；不同時(shí)期各組血液指標(biāo)值組間差異并不顯著（p>0.05）。表明免疫M(jìn)G F疫苗，能夠抑制后續(xù)MG感染，改善商品肉雞生長(zhǎng)性能，降低MG強(qiáng)毒對(duì)NDV疫苗的影響，增強(qiáng)免疫效果，并且不影響體內(nèi)的代謝平衡，有

7、利于提高養(yǎng)殖效益。
　　 試驗(yàn)三：雞毒支原體F 疫苗對(duì)種肉雞生長(zhǎng)及免疫性能的影響
　　 試驗(yàn)選用3000只1日齡健康的三黃種肉雞，采用單因素2水平設(shè)計(jì)，每組1500只，分為免疫組和對(duì)照組，相應(yīng)為試驗(yàn)一組和試驗(yàn)二組。1日齡時(shí)對(duì)試驗(yàn)一組進(jìn)行MG F疫苗免疫，并于5日齡、30日齡和40日齡時(shí)采集兩組雞喉棉拭子樣品，運(yùn)用PCR方法進(jìn)行檢測(cè)；分別統(tǒng)計(jì)0-22日齡、22-32日齡、32-40日齡和0-40日齡期間各組雞的增重、耗料量

8、和死淘率；在31日齡、38日齡進(jìn)行采血，通過HA-HI試驗(yàn)進(jìn)行NDV和AIV（H9）免疫抗體檢測(cè)分析。
　　 結(jié)果顯示，免疫組檢測(cè)到的野毒株的量低于對(duì)照組；整個(gè)試驗(yàn)期總增重較對(duì)照組提高了3.6％，料重比低0.14，差異顯著（P<0.05），而且在不同階段也都存在顯著性差異（P<0.05）；兩種免疫抗體水平比對(duì)照組都高，差異顯著（p<0.05）。
　　 表明免疫M(jìn)G F疫苗，能夠抑制后續(xù)MG的感染，改善種肉雞生長(zhǎng)性能，降低