蝦蟹螺原體病免疫組化和病理學(xué)比較研究.pdf

1、中華絨螯蟹螺原體(Spiroplasma eriocheiris),是近年來在水生甲殼動物中發(fā)現(xiàn)的新型病原微生物,該病原體可引起中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)顫抖病(Tremordisease),還可以導(dǎo)致南美白對蝦(Penaeus vannamei)、克氏原螯蝦(Procambarusclarkia)、羅氏沼蝦(Macrobrachium rosenbergii)的大規(guī)模死亡,給我國蝦蟹等重要的經(jīng)濟水生甲殼動物的養(yǎng)

2、殖造成了極大威脅。
　　 螺原體是原核細胞生物中最小的一類,可濾過220nm孔徑濾膜,它有一種特殊的頂端結(jié)構(gòu),能使其粘附在宿主細胞表面,這與螺原體的侵染和致病有關(guān)。該病原體在宿主細胞內(nèi)存在侵染方式有:1、單個分散形式；2、眾多螺原體在細胞內(nèi)大量繁殖后聚集形成包涵體,其大小不等,形態(tài)不一,由于螺原體體積很小,在光鏡下不宜辨認,所以普通的H.E染色很難確定螺原體感染的病理學(xué)特征。
　　 本文運用免疫組化方法開展了螺原體對河蟹

3、和克氏原螯蝦不同器官和組織的感染病理學(xué)研究。在河蟹和克氏原螯蝦的各個組織包括心肌、肝胰腺、腸、鰓,以及感染發(fā)病嚴重個體的肌肉組織均呈現(xiàn)陽性反應(yīng),大量的螺原體寄生于結(jié)締組織中,聚集形成包涵體,呈棕黃色顆粒狀,單個散在形式存在的螺原體呈淡黃色。
　　 通過螺原體不同菌株對羅氏沼蝦進行感染實驗,經(jīng)過二十多天的觀察統(tǒng)計,發(fā)現(xiàn)1～3組中無論是實驗組還是對照組,在接種后的前幾天基本都出現(xiàn)個別蝦死亡的現(xiàn)象,最可能的原因是接種時機械損傷和應(yīng)激反

4、應(yīng)導(dǎo)致個體死亡。用分離自中華絨螯蟹的螺原體菌株BY08-1接種羅氏沼蝦其死亡率高于對照組,但死亡率不是很高(33％)。而用分離自羅氏沼蝦的螺原體菌株MR10感染健康羅氏沼蝦,隨著感染時間的延長,發(fā)病率和死亡率隨之明顯上升,至最后,死亡率達到95％。雖然兩種菌株均分離自水生甲殼動物,屬于水生螺原體,但由于最初分離的寄主不同,其對羅氏沼蝦的致病性存在明顯差別。隨后進行免疫組化實驗,分別用中華絨螯蟹螺原體多抗和羅氏沼蝦螺原體多抗與患螺原體病的

5、羅氏沼蝦組織進行反應(yīng),結(jié)果顯示羅氏沼蝦螺原體多抗反應(yīng)強烈,而中華絨螯蟹螺原體多抗陽性反應(yīng)較弱,也進一步證實了從不同水生動物上分離到的螺原體對不同寄主存在感染差異。
　　 基于以上的研究結(jié)果,即從不同水生動物上分離到的螺原體存在感染差異,本文對不同來源的螺原體感染宿主的超微病理學(xué)進行了比較研究。結(jié)果顯示螺原體在患顫抖病河蟹的各個組織中主要以包涵體的形式寄生在細胞質(zhì)內(nèi)；在患螺原體病羅氏沼蝦的各個組織中更多的是以散狀的方式寄生。