海洋細菌Bacillus velezensis DM09在油菜中的定植及對油菜菌核病的防治研究.pdf

1、油菜菌核病是由核盤菌(Sclerotinia Sclerotiorum(Lib)de Bary）侵染引起的，是我國油菜的主要病害之一。油菜感染菌核病后，可直接導致減產(chǎn)5％～30％，含油量降低1％～5％。我國每年發(fā)病面積約470萬hm2，直接經(jīng)濟損失達數(shù)億元。由于化學農(nóng)藥防治存在污染環(huán)境、在食物鏈中殘留、防效低、病原菌容易產(chǎn)生耐藥性等問題，尋找有效的拮抗核盤菌的生物農(nóng)藥成為熱點。本文以BacillusvelezensisDM09為材料，對

2、其抗真菌活性物質(zhì)的理化特性、DM09在油菜體內(nèi)的定植、誘導抗性以及對油菜菌核病的防治作用等進行了研究。
　　 從深海海水中分離得到的BacillusvelezensisDM09經(jīng)MB培養(yǎng)基活化，在PD液體培養(yǎng)基中發(fā)酵后，發(fā)酵濾液具有廣泛的抗真菌能力。DM09所產(chǎn)的抗真菌活性粗提物在4℃保存60d、100℃處理30min，其抗真菌活性不變；對蛋白酶K和胰蛋白酶不敏感；在pH7～10的范圍內(nèi)，有較好的活性；對紫外線不敏感。
　

3、　 油菜離體葉片實驗表明，DM09發(fā)酵濾液能控制油菜核盤菌菌絲的生長，且能有效的降低發(fā)病率，防效達92.51％；DM09活菌體對油菜核盤菌的拮抗作用不明顯，防效均在25％以下；發(fā)酵菌懸液的防效和發(fā)酵濾液相當。
　　 DM09通過灌根接種法，能在油菜莖和葉內(nèi)穩(wěn)定定植。1×105CFU/mL芽胞懸液為最適的接種濃度。接種后第20d，體內(nèi)菌數(shù)達到(7.1±0.30)×103CFU/g鮮植株，50d時為(5.16±0.61)×103C

4、FU/g鮮植株。DM09通過葉面噴菌法，也能在油菜莖和葉定植，定植數(shù)量與灌根接種法相當。DM09在油菜根內(nèi)定植數(shù)量極少。DM09在油菜體內(nèi)定植后，能增強油菜對核盤菌的抵抗能力。具體表現(xiàn)為能明顯抑制核盤菌菌絲的生長，防效達到54.58％。
　　 油菜接種DM09或經(jīng)DM09發(fā)酵液上清處理后，再接種S.Sclerotiorum，與空白組相比，發(fā)病率和菌斑面積有顯著的降低，且POD(peroxidase)、PPO(polyphenol