日本血吸蟲重組表膜蛋白LHD-Sj23和SjTSP2免疫保護(hù)機(jī)制的初步研究.pdf

1、日本血吸蟲病(Schistosomiasis japonicium)是一種嚴(yán)重危害人、畜健康,影響社會(huì)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展的人、畜共患寄生蟲病。上世紀(jì)50年代以來,我國血吸蟲病防治工作取得了舉世矚目的成就,但由于釘螺孳生環(huán)境難以得到根本改變,藥物滅螺效果難以持久和鞏固,并可能造成生態(tài)環(huán)境污染；長期使用吡喹酮進(jìn)行擴(kuò)大化療,有產(chǎn)生耐藥性的危險(xiǎn)。作為滅螺、藥物防治和其他綜合防治措施的重要補(bǔ)充,血吸蟲病疫苗的研究就顯得十分必要。迄今研制的一些日本血吸蟲疫

2、苗保護(hù)效果還不夠理想,探討疫苗候選分子的免疫保護(hù)機(jī)制,篩選理想的免疫佐劑是提高疫苗保護(hù)效果的有效途徑之一。
　　 本文以BALB/c小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,應(yīng)用兩種純化的日本血吸蟲重組表膜蛋白LHD-Si23和SjTSP2與3種佐劑(弗氏佐劑、ISA206佐劑、ISA70M佐劑)配伍免疫小鼠,3次免疫后,各組小鼠經(jīng)腹部皮膚感染日本血吸蟲尾蚴40±2條,感染6周后,經(jīng)肝門靜脈灌注法收集成蟲,檢測(cè)每克肝臟蟲卵數(shù),計(jì)算減蟲率和肝臟減卵率

3、。初步試驗(yàn)結(jié)果顯示重組抗原UHD-Sj23結(jié)合三種佐劑免疫小鼠后都誘導(dǎo)了較高的免疫保護(hù)效果。重組抗原SjTSP2的免疫保護(hù)效果與使用的佐劑有關(guān),其中ISA206佐劑組獲得的保護(hù)效果最高,弗氏佐劑組次之,ISA70M佐劑組沒有保護(hù)作用。為探討這兩種重組抗原誘導(dǎo)產(chǎn)生的免疫保護(hù)機(jī)制,本文通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)了3次免疫后1周的小鼠的CD4+、CD8+細(xì)胞,及IL2、IL4、IL10、IFNγ等細(xì)胞因子的變化情況。通過ELISA方法檢測(cè)免疫前、第3

4、次免疫小鼠1周后以及尾蚴攻擊6周后血清中的特異性抗體IgG及其亞型IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3,和IgE、IgA、IgM的變化情況。初步實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與空白對(duì)照組相比,免疫組小鼠CD4+、CD8+細(xì)胞的數(shù)值以及CD4+/CD8+比值,細(xì)胞因子IL2、II4、IL10、IFNγ水平都有不同程度的變化,免疫組的小鼠機(jī)體誘導(dǎo)產(chǎn)生了Th1/Th2型混合的細(xì)胞免疫反應(yīng),其中Th1型免疫應(yīng)答占優(yōu)勢(shì)地位。同時(shí),免疫組小鼠誘導(dǎo)產(chǎn)生了較為強(qiáng)