橙色莫桑比克羅非魚（♀）和荷那龍羅非魚（♂）的雜交試驗(yàn).pdf

1、為了培育新的羅非魚雜交種，本試驗(yàn)采用羅非魚種間雜交的方法，以橙色莫桑比克羅非魚Oreochromis mossambicus(♀)和荷那龍羅非魚Oreochromis hornorum(♂)為親本，繁殖得到了雜交F1(莫荷魚)。利用蛋白質(zhì)電泳技術(shù)研究了兩親本的同工酶組織特異性，并運(yùn)用AFLP分子標(biāo)記技術(shù)分析了兩親本種群內(nèi)、種群間的遺傳多樣性，同時(shí)對(duì)兩親本及其雜種F1進(jìn)行了低溫致死、耗氧率以及耐鹽試驗(yàn)，并比較了莫荷魚與尼奧魚(尼羅羅非魚♀

2、×奧利亞羅非魚♂)的生長(zhǎng)差異。為羅非魚新雜交種的獲得提供基礎(chǔ)資料。結(jié)果如下：1、橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚的同工酶電泳分析 　對(duì)兩親本羅非魚的5種組織(肝臟、心臟、肌肉、腦和腎臟)中的EST、SOD和LDH三種同工酶進(jìn)行了初步分析，結(jié)果表明三種同工酶均具有明顯的組織特異性。EST在兩種羅非魚的肝臟中表達(dá)最強(qiáng)，且?guī)鸵沧顝?fù)雜。兩種羅非魚具有相似的SOD和LDH酶譜，SOD在肌肉中的酶帶條數(shù)最多且多數(shù)酶帶的表達(dá)量較高。LDH在腦中

3、豐富表達(dá)。同時(shí)同工酶的分析結(jié)果顯示橙色莫桑比克羅非魚相對(duì)荷那龍羅非魚具有多種基因型，可能含有較多可供選擇的等位基因，可用于良種選育。2、橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚群體的遺傳多樣性研究 　運(yùn)用AFLP分子標(biāo)記檢測(cè)了橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚的遺傳多樣性。用篩選出的3對(duì)選擴(kuò)引物組合(E-AGG/M-CTT、E/AGG/M-CAT和E-ACG/M-CTT)在橙色莫桑比克羅非魚種群中分別檢出32、19和23條帶，在荷那龍羅非魚種群中

4、分別檢出35、22和25條帶。橙色莫桑比克羅非魚種群內(nèi)遺傳相似系數(shù)為0.765，荷那龍羅非魚為0.821，說(shuō)明兩種羅非魚種群內(nèi)遺傳多態(tài)性均較高，但相對(duì)而言橙色莫桑比克羅非魚種群內(nèi)遺傳多樣性比荷那龍羅非魚更豐富些，具有更大的選育空間。兩種羅非魚的種間遺傳距離為0.306，表明兩種羅非魚具有一定的遺傳距離，雜交產(chǎn)生的子代可能具有一定的雜種優(yōu)勢(shì)。3、橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚及雜交F1的主要生物學(xué)、生理學(xué)測(cè)定3.1 性成熟年齡及懷卵量

5、 橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚最小繁殖年齡均為6個(gè)月，屬于多次產(chǎn)卵，其性成熟最小體長(zhǎng)分別為6.60cm和8.64cm，最小體重分別為14.077g和37.544g。橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚的絕對(duì)繁殖力(懷卵量，粒)分別為620～97l和716～983，相對(duì)殖力分別為31.233±7.190和17.860±3.1913.2耐鹽性 設(shè)置6個(gè)鹽度梯度：0、15、25、30、35和40，檢測(cè)兩親本羅非魚的耐鹽性。結(jié)果表明：橙

6、色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚均屬于耐鹽性較強(qiáng)的魚類。在幾種耐鹽指標(biāo)中，橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚的96小時(shí)半致死鹽度分別為22.29和21.56；在除鹽度為40外的其它各鹽度中，橙色莫桑比克羅非魚的50％死亡時(shí)間和平均死亡時(shí)間均高于荷那龍羅非魚，但差異不顯著(p>0.05)。在鹽度馴化試驗(yàn)中，兩親本羅非魚均能耐受較高鹽度咸水并維持較低死亡率。 3.3耗氧率 用呼吸室法測(cè)定橙色莫桑比克羅非魚、荷那龍羅非魚及莫荷魚不

7、同溫度下的耗氧率，結(jié)果表明：(1)水溫為16～32℃時(shí)，兩親本及莫荷魚的耗氧率范圍分別是，橙色莫桑比克羅非魚(體重18.98～102.53g)0.06～0.43mg/gh，荷那龍羅非魚(體重10.40～116.28g)0.07～0.61m/g.h，莫荷魚(體重2.24～133.82g)0.06～0.65m/g.h。(2)兩親本及莫荷魚的耗氧率存在晝夜變化規(guī)律，耗氧率隨著溫度的升高而增加，同時(shí)與試驗(yàn)魚體重呈負(fù)相關(guān)。(3)水溫24℃時(shí)，兩親

8、本及莫荷魚的溶氧臨界窒息點(diǎn)分別是，橙色莫桑比克羅非魚為0.31～0.45mg／L，荷那龍羅非魚為0.33～0.55mg／L，莫荷魚為0.38～0.43mg／L。 3.4低溫耐受能力 通過(guò)人工加冰降溫的方法比較了兩親本及莫荷魚的低溫耐受能力，結(jié)果表明：橙色莫桑比克羅非魚、荷那龍羅非魚及莫荷魚的低溫死亡溫度范圍分別是9.9～8.0℃、15.1～9.5℃和11.4～7.5℃；半致死低溫分別為：9.2℃、10.1℃和8.57℃，

9、說(shuō)明兩親本及雜交F1對(duì)低溫的耐受能力均較差。 4、莫荷魚與尼奧魚養(yǎng)殖性能比較 比較莫荷魚與四個(gè)不同品系尼羅羅非魚(♀)與奧利亞羅非魚(♂)的雜交F1(尼奧I、尼奧Ⅱ、尼奧Ⅲ、尼奧Ⅳ)的養(yǎng)殖性能，試驗(yàn)結(jié)果表明：(1)絕對(duì)增重率(mg/d)：莫荷魚(1.054)>尼奧Ⅱ(0.710)>尼奧Ⅲ(0.666)>尼奧Ⅳ(0.597)>尼奧I(0.579)(p<0.05)；(2)雄性率(％)：莫荷魚(100)>尼奧III(99.3)

10、>尼奧I(88.9)>尼奧II(86.6)>尼奧Ⅳ(85.9)(p<0.05)；(3)肥滿度(K)：莫荷魚(4.183)>尼奧Ⅳ(4.072)>尼奧Ⅲ(3.960)>尼奧Ⅱ(3.906)>尼奧I(3.763)(p<0.01)。養(yǎng)殖生長(zhǎng)試驗(yàn)表明橙色莫桑比克羅非魚♀×荷那龍羅非魚♂的雜交F1養(yǎng)殖性能較好，具有推廣價(jià)值。 本研究從蛋白質(zhì)水平和DNA分子水平均發(fā)現(xiàn)，相對(duì)而言橙色莫桑比克羅非魚種群的遺傳多樣性更豐富，AFLP分析結(jié)果表明兩