羅非魚排綜合利用技術的研究.pdf

1、本文以羅非魚加工下腳料——羅非魚排為原料，將魚排上的碎肉與魚骨分離，分別研究了魚排碎肉和魚骨的高值化利用技術。本實驗利用乳酸菌發(fā)酵法提取魚骨中活性鈣；利用蛋白酶水解羅非魚排上的碎肉，制得的水解液再脫除芳香族氨基酸制備高F值寡肽，并用秀麗隱桿線蟲模型評價高F值寡肽對秀麗隱桿線蟲壽命、移動力、生殖能力等的影響。具體研究內容和研究結果如下：
　　1、以羅非魚骨為原料，采用乳酸菌發(fā)酵法提取魚骨中的活性鈣，確定提取活性鈣的最佳條件。結果表明

2、：選用嗜酸乳桿菌CICC6074，葡萄糖5 g，蛋白胨0.5 g，接菌量為3 mL/100mL，羅非魚骨粉2 g，水100 mL，溫度37℃，發(fā)酵時間48 h，魚骨粉的鈣溶出率可達40％，發(fā)酵液中氨基態(tài)氮含量可達1.3 g/100mL。
　　2、以羅非魚碎肉為原料，采用蛋白酶水解法制備高F值寡肽。通過單因素篩選及正交試驗設計確定最佳水解條件，水解液再經活性炭吸附脫除芳香族氨基酸。結果表明：堿性蛋白酶為最適水解用酶，其最佳水解條件為

3、加酶量1200 U/g底物，料水比1:15，水解時間4.5 h，pH8.0，溫度50℃，在此條件下水解后蛋白質的回收率為74.5%，水解液經活性炭吸附后F值為23.1。對活性炭吸附脫除芳香族氨基酸的條件進行優(yōu)化后，確定吸附條件為用炭量1:15（活性炭質量：水解液體積），時間0.5 h，pH6.0，溫度室溫，經優(yōu)化脫除芳香族氨基酸后的水解液的F值為29.3，活性炭吸附后的蛋白質回收率為31.2%。
　　3、上述蛋白酶水解液，通過上大

4、孔吸附樹脂柱，再用不同濃度的乙醇進行梯度洗脫，從而達到對水解液分級分離的目的。結果表明：用60%乙醇以1.5 mL/min進行洗脫獲得的組分其F值最大為19.3，多肽回收率為23.2%，其F值未能達到高F值寡肽的要求。但是將大孔吸附樹脂與活性炭吸附脫除芳香族氨基酸兩種方法結合，即將60%乙醇以1.5 mL/min進行洗脫獲得的組分再經過活性炭吸附處理，得到F值達31，可顯著提高F值，滿足高F值寡肽的要求。
　　4、水解液通過活性炭

5、吸附和大孔吸附樹脂與活性炭吸附結合兩種方法得到的兩個高F值寡肽組分，F值分別為22和31（以下簡稱樣1和樣2）。采用體外抗氧化活性評價法對高F值寡肽的抗氧化活性進行評價，并探究F值的大小與抗氧化活性間的關系。結果表明：體外抗氧化活性評價樣1和樣2的羥自由基清除率分別為86.9%、87.2%，沒有明顯差異，初步說明樣1和樣2具有抗氧化活性，但與F值的大小并沒有直接的關系。
　　5、研究了樣1和樣2對秀麗隱桿線蟲的壽命、產卵量、移動力