連云港及周邊地區(qū)豬高熱病病例中常見病毒混合感染情況的調(diào)查及PRRSV疫苗免疫、PCV2感染對豬瘟疫苗免疫的影響研究.pdf

1、2001年以來，連云港以及周邊地區(qū)在每年的5月底到10月份，爆發(fā)一種以高熱，食欲下降，呼吸困難，皮膚發(fā)紅，部分妊娠母豬流產(chǎn)，死產(chǎn)為特征的豬傳染病。該病可感染不同豬，發(fā)病率高，幾乎達(dá)到100％；死亡率隨病程、繼發(fā)感染的嚴(yán)重程度不同而異。剖檢變化以彌散性、出血性間質(zhì)肺炎、淋巴結(jié)和各內(nèi)臟器官不同程度出血為特征。由于發(fā)病率、病死率高，治愈率較低，容易繼發(fā)或并發(fā)其他病原微生物導(dǎo)致死亡，無特異防制方法，從而給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。為了弄清連云港

2、以及周邊地區(qū)豬高熱病的流行情況以及PRRS疫苗和PCV-2對豬瘟免疫的影響，以便做好防控工作，本論文從以下幾個(gè)方面進(jìn)行了調(diào)查和研究。
　　 第一章、PRRSV和CSFV RT-PCR檢測方法的建立
　　 根據(jù)GenBank中已發(fā)表的序列，設(shè)計(jì)針對豬繁殖與呼吸綜合征(porcinereproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)病毒ORF7基因和豬瘟病毒(classica

3、l swine fever virus，CSFV)5'-NCR基因，設(shè)計(jì)特異性引物，建立針對上述兩種RNA病毒的RT-PCR方法，可同時(shí)擴(kuò)增出相應(yīng)的377 bp和288 bp的目的片段。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明這兩個(gè)RT-PCR方法特異、敏感、快速，具有廣闊的應(yīng)用前景。
　　 第二章、PPV、PCV-2、PRV多重PCR方法的建立
　　 根據(jù)GenBank中已發(fā)表的序列，針對豬偽狂犬病病毒(porcine pseudorabiesv

4、irus，PRV)gI基因和豬細(xì)小病毒(porcine parvovirus，PPV)VP2基因的特異性引物，參考有關(guān)文獻(xiàn)得到擴(kuò)增豬圓環(huán)病毒2型(porcine circovirus type2，PCV2)ORF2基因的引物，建立針對上述三種病毒的多重PCR方法，可在一次PCR反應(yīng)中擴(kuò)增出相應(yīng)的277 bp、511 bp、404 bp目的片段。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該多重PCR方法特異、敏感、快速，具有廣闊的應(yīng)用前景。
　　 第三章200

5、7-2009年連云港及周邊地區(qū)豬高熱病中常見病毒混合感染規(guī)律研究
　　 應(yīng)用PCR方法，對連云港及周邊地區(qū)的235份豬高熱病病料(血液樣品)進(jìn)行檢測，結(jié)果97份病料為PCV2陽性，陽性率為41.3％；146份病料為PRRSV陽性，陽性率為62.1％；103份為CSFV陽性，陽性率為43.8％；10份為PPV陽性，陽性率為4.3％；6份為PRV陽性，陽性率為2.6％；其中PCV2、PRRSV的混合感染陽性率最高，235份病料中有8

6、0份，占總數(shù)的34.0％；且有17份為PRRSV、PCV2和CSFV的三重感染，占總數(shù)的7.2％。在混合感染比例中，PRRSV和CSFV混合感染居第二，235份病料中有61份，占總數(shù)的26.0％。
　　 豬瘟是危害最為嚴(yán)重的豬烈性傳染病之一，本次調(diào)查中CSFV的陽性率高達(dá)43.8％，其對豬高熱病的協(xié)同致病作用顯而易見。PCV-2對機(jī)體的影響主要造成免疫抑制，使機(jī)體的免疫力下降，造成細(xì)菌和病毒的繼發(fā)感染，從而引起更嚴(yán)重的臨床癥狀，

7、從檢測結(jié)果看PCV-2陽性率為41.3％。豬繁殖與呼吸綜合癥是由PRRSV引起的以流產(chǎn)、死胎、胎兒木乃伊化和呼吸道疾病為特征的傳染病，PRRSV可導(dǎo)致豬的嚴(yán)重免疫抑制，在臨床上混合感染十分普遍，本次檢測陽性率為62.1％，流行情況是嚴(yán)重的。上述檢測結(jié)果說明我國豬高熱病的復(fù)雜性及防治的艱巨性。
　　 第四章勃林格Ingelvac PRRS活疫苗(ATCC-VR2332株)對豬瘟疫苗免疫的影響研究
　　 用勃林格Ingelv

8、ac PRRS活疫苗(ATCC-VR2332株)對豬瘟細(xì)胞苗和睥淋苗在商品豬的免疫效果的影響進(jìn)行了研究，免疫后定期采集血清進(jìn)行豬瘟抗體的測定，結(jié)果勃林格Ingelvac PRRS活疫苗(ATCC-VR2332株)和豬瘟細(xì)胞苗組與只免疫豬瘟細(xì)胞苗組相比，產(chǎn)生豬瘟抗體的滴度沒有差異；勃林格Ingelvac PRRS活疫苗(ATCC-VR2332株)和豬瘟睥淋苗免疫組與只免疫豬瘟睥淋苗組相比，產(chǎn)生豬瘟抗體的滴度也沒有差異，結(jié)果表明，勃林格In

9、gelvac PRRS活疫苗(ATCC-VR2332株)對豬瘟疫苗的抗體產(chǎn)生無影響。
　　 第五章 PCV-2感染對豬瘟疫苗免疫的影響研究
　　 選取30日齡商品豬，每15天檢測一次PRRSV、PCV-2感染情況和豬瘟抗體動(dòng)態(tài)變化情況，在免疫豬瘟脾淋苗2頭份后28天(58日齡)，豬瘟抗體水平維持在53以上；此時(shí)檢測出部分豬出現(xiàn)圓環(huán)病毒感染，將同批豬分為有、無圓環(huán)病毒感染的兩個(gè)組，以上述豬瘟脾淋苗同劑量加強(qiáng)免疫一次，二免后