噬菌蛭弧菌顆粒劑的制備及其性能的研究.pdf

1、噬菌蛭弧菌在水產(chǎn)動物病害防治及水質(zhì)凈化領(lǐng)域具有良好的效果，但目前常用的水劑由于運(yùn)輸和保存的不方便而限制了其應(yīng)用。固定化微生物技術(shù)作為一種新的技術(shù)方法，目前已在水處理及水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域等方面有了較為廣泛的研究。固定化技術(shù)與噬菌蛭弧菌相結(jié)合應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖，國內(nèi)外均未見報道。
　　 本研究主要通過自來水雙層瓊脂平板法檢測活菌數(shù)，同時以機(jī)械強(qiáng)度、傳質(zhì)性能為輔助的指標(biāo)分析方法，制備了噬菌蛭弧菌顆粒劑并優(yōu)化其制備工藝參數(shù)，并進(jìn)行了穩(wěn)定性和應(yīng)用性

2、的分析研究。
　　 1.包埋法制備噬菌蛭弧菌顆粒劑的固定化載體的選擇：本實驗選用瓊脂、明膠、海藻酸鈉及聚乙烯醇為載體，并以其機(jī)械強(qiáng)度、傳質(zhì)性能及活菌數(shù)進(jìn)行比較。試驗結(jié)果表明，海藻酸鈉制備的噬菌蛭弧菌顆粒較其他三種載體，機(jī)械強(qiáng)度較聚乙烯醇顆粒低，但傳質(zhì)性能較高，活菌數(shù)達(dá)到最高值，為1.54×105pfu/ml。此外，瓊脂機(jī)械強(qiáng)度為4種載體最差，明膠不利于傳質(zhì)性能的發(fā)揮。聚乙烯醇顆粒制備中加入的硼酸由于其對微生物的毒害作用，活菌數(shù)較

3、低。因此，本實驗初步篩選出海藻酸鈉為制備噬菌蛭弧菌顆粒的最佳載體。
　　 為了確定海藻酸鈉凝膠體系的二價金屬陽離子，本實驗觀察了海藻酸鈉分別與Ca2+、Mn2+、Ba2+制備顆粒的活菌數(shù)比較研究。結(jié)果顯示，3種離子對蛭弧菌的活菌數(shù)差異顯著(p＜0.05)?；罹鷶?shù)對數(shù)值分別為5.81、3.51及1.14。綜合考慮，本實驗采用海藻酸鈉-鈣離子體系作為后續(xù)試驗的凝膠體系。
　　 2.噬菌蛭弧菌顆粒劑制備條件的優(yōu)化：本實驗探索了

4、噬菌蛭弧菌顆粒制備中的影響因素對噬菌蛭弧菌顆粒的活菌數(shù)的影響。結(jié)果表明，顆粒劑制備的最佳工藝參數(shù)為海藻酸鈉濃度1.5％，氯化鈣濃度6.5％，蛭弧菌菌液與海藻酸鈉膠體溶液的比例(v/v)50％，玉米油濃度4.5％，包埋溫度47.5℃，攪拌時間40min,攪拌速度450r/min及交聯(lián)時間36h。而且制得的固定化蛭弧菌顆粒活菌數(shù)對數(shù)值達(dá)到7.51。此外，作為載體配方優(yōu)化因素的海藻酸鈉濃度和玉米油濃度對活菌數(shù)具有顯著性影響，而氯化鈣濃度和蛭弧

5、菌菌液與海藻酸鈉膠體溶液的比例(v/v)影響不顯著；作為過程優(yōu)化因素的溫度和攪拌速度對活菌數(shù)具有顯著性影響，而攪拌時間和交聯(lián)時間影響不顯著。
　　 3.噬菌蛭弧菌顆粒劑的穩(wěn)定性能研究：探索了不同溫度(30℃、40℃、50℃、60℃及70℃)、不同pH(4、5、6、7、8及9)及室溫避光條件下的不同儲存時間(1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月及8個月)對水劑、顆粒劑的存活率的影響。結(jié)果表明，顆粒劑較水劑有明顯的

6、溫度、pH及儲存穩(wěn)定性。
　　 4.噬菌蛭弧菌顆粒劑對養(yǎng)殖廢水應(yīng)用的研究：本實驗觀察了0.1ppm水劑及顆粒劑的投加量對養(yǎng)殖廢水的DO含量、NH3-N含量、NO3--N含量、COD含量、弧菌總數(shù)等主要水質(zhì)指標(biāo)影響。結(jié)果顯示，顆粒劑較水劑與對照組相比，試驗組ΔCOD、ΔNH3-N、ΔNO2--N及Δ弧菌總數(shù)明顯減少(p＜0.05)，ΔDO增大(p＜0.05)，但pH變化不明顯(p＞0.05)。說明蛭弧菌顆粒劑的加入有利于加快降低養(yǎng)