丹參復(fù)方多糖顆粒劑與松塔色素的制備及其抗氧化活性研究.pdf

1、本課題對(duì)丹參復(fù)方多糖的體外抗氧化活性以及其制劑、分析方法等進(jìn)行了系列研究工作，對(duì)來自廢棄資源的紅松松塔的色素提取物的抗氧化活性也進(jìn)行了研究，主要內(nèi)容如下:
　　1、對(duì)丹參復(fù)方總多糖的抗氧化活性進(jìn)行研究，并對(duì)其脫蛋白脫色純化前后的活性進(jìn)行對(duì)照測定。
　　采用水提醇沉法制備丹參復(fù)方總多糖，并對(duì)得到的總多糖進(jìn)行脫蛋白、脫色等不同方法的純化，測定各多糖產(chǎn)物清除羥基自由基、DPPH·自由基及超氧陰離子自由基的能力。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，丹參

2、復(fù)方總多糖樣品呈現(xiàn)明顯的體外抗氧化活性，多糖活性隨其濃度增大而增強(qiáng);總多糖經(jīng)脫蛋白、脫色等純化步驟后體外抗氧化活性增強(qiáng)，純化后的丹參復(fù)方總多糖仍然呈現(xiàn)明顯的量效關(guān)系。體內(nèi)脂質(zhì)過氧化是諸多疾病的常見原因之一，天然成分的抗氧化活性常與抗腫瘤活性有一定關(guān)聯(lián)，并與許多疾病的防治相關(guān)，丹參復(fù)方多糖的抗氧化活性值得繼續(xù)深入研究和開發(fā)利用。
　　2、建立了丹參復(fù)方多糖顆粒劑中多糖含量測定的新方法——淀粉酶法聯(lián)合DNS法進(jìn)行測定，有效克服了輔料淀

3、粉干擾有效成分多糖含量測定這一技術(shù)難點(diǎn)，文獻(xiàn)中尚未見有同類工作報(bào)道。
　　在應(yīng)用DNS法（3，5-二硝基水楊酸法）對(duì)丹參復(fù)方多糖顆粒劑中有效成分多糖進(jìn)行含量測定時(shí)曾發(fā)現(xiàn)，因輔料淀粉也為多糖成分對(duì)含量測定形成干擾，導(dǎo)致DNS法不能測得有效成分多糖含量，只能獲知有效成分多糖和輔料淀粉含量之和，文獻(xiàn)中未見相應(yīng)解決辦法。本實(shí)驗(yàn)巾嘗試了下述思路:首先采用淀粉酶法除去顆粒劑中的輔料淀粉，將淀粉酶解為小分子雙糖后，再利用它和多糖的醇溶性不同，以

4、醇沉法分離出丹參復(fù)方多糖，此后即可使用DNS法對(duì)該多糖進(jìn)行含量測定，避免輔料淀粉的干擾;由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，所建立的淀粉酶法和DNS法聯(lián)合測定丹參復(fù)方多糖顆粒劑多糖含量的方法，成功克服了輔料淀粉的干擾，方法學(xué)考察各項(xiàng)指標(biāo)均符合規(guī)定，該方法可用于丹參復(fù)方多糖顆粒劑的多糖含量測定，對(duì)于含有輔料淀粉的其它中藥制劑的多糖含量測定也可提供參考。
　　3、在活性研究基礎(chǔ)上，又進(jìn)一步研究了丹參復(fù)方多糖顆粒劑的制劑工藝及質(zhì)量檢查。在制劑工藝研究中，通

5、過比較試驗(yàn)，分別對(duì)顆粒劑的吸濕性、流動(dòng)性及成型性等指標(biāo)進(jìn)行了考察，優(yōu)選出顆粒劑的輔料種類及原料和輔料的配比。以含水乙醇為潤濕劑進(jìn)行制粒，干燥，整粒，即得丹參復(fù)方多糖顆粒劑。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果可為丹參復(fù)方多糖制劑的后續(xù)研發(fā)提供參考。
　　4、除上述丹參復(fù)方多糖系列研究之外，還對(duì)廢棄資源松塔的色素提取物的初步分離和體外抗氧化活性進(jìn)行研究，測定各色素產(chǎn)物的還原能力、清除·OH自由基、O2-·自由基能力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，色素粗提物和經(jīng)陰離子交換樹脂

6、純化得到的NaCl洗脫物均有明顯的體外抗氧化活性。該NaCl洗脫物再經(jīng)pH梯度萃取所得各組分也進(jìn)行抗氧化活性測定，其中5％NaHCO3和5％Na2CO3萃取組分活性較強(qiáng)，5％NaOH萃取組分活性低于上述兩萃取物。已知5％NaHCO3、5％Na2CO3萃取物的酸性高于5％NaOH萃取物的酸性，因而該實(shí)驗(yàn)中酸性較強(qiáng)的組分抗氧化活性也較強(qiáng)。
　　離子交換樹脂純化所得鹽酸-乙醇不同洗脫物的抗氧化活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，兩種后被洗脫的組分3號(hào)和2

7、號(hào)活性相近，最先洗脫的1號(hào)洗脫物活性低于上述兩組分。即該實(shí)驗(yàn)中對(duì)陰離子樹脂吸附強(qiáng)的組分，抗氧化活性也相對(duì)較強(qiáng)。
　　由上述可知，本課題中研究確認(rèn)了丹參復(fù)方多糖的體外抗氧化活性，經(jīng)脫蛋白脫色純化后其活性明顯增強(qiáng)，研究了丹參復(fù)方多糖顆粒劑的制備，成功建立了丹參復(fù)方多糖顆粒劑中有效成分多糖含量測定的方法，有效克服了輔料淀粉干擾含量測定的技術(shù)難點(diǎn)，為丹參復(fù)方多糖的開發(fā)應(yīng)用提供了活性、制劑、分析方法等系列參考數(shù)據(jù)，此外，還對(duì)松塔色素提取物進(jìn)