白靈菇多糖提取工藝優(yōu)化及其抗氧化活性研究.pdf

1、白靈菇是一種珍貴的食用菌，白靈菇多糖(Pleurotus nebrodensis polysaccharides，PNPs)具有增強(qiáng)免疫力、抗氧化、抗腫瘤等功能，是一種具有較高開發(fā)利用價(jià)值的功能性食品。
　　本文研究了菌袋無覆土栽培、菌袋中部環(huán)切覆土栽培、脫袋覆土栽培三種栽培方法對(duì)白靈菇子實(shí)體生長(zhǎng)的影響。綜合評(píng)價(jià)得出菌袋中部環(huán)切覆土栽培占地面積小，易于管理，更適合進(jìn)行白靈菇栽培。
　　以白靈菇子實(shí)體為材料，采用超聲波輔助提法

2、提取白靈菇多糖，選取超聲波處理時(shí)間、提取溫度和液料比進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)，運(yùn)用Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)超聲波處理時(shí)間、提取溫度和液料比三個(gè)工藝條件進(jìn)行分析與優(yōu)化。確定了超聲波輔助提取白靈菇多糖的最佳工藝參數(shù)為提取溫度56℃、超聲波處理時(shí)間45min、提取的液料比為41∶1，在此條件下進(jìn)行2次提取，得到白靈菇多糖得率為12.26％，相比于傳統(tǒng)熱水提取法（提取溫度77℃、提取時(shí)間190min、液料比46∶1、提取次數(shù)為2次）多糖得率提高了

3、44.41％。
　　白靈菇多糖除蛋白結(jié)果表明:使用Sevage法，即加入多糖1/3體積的Sevage試劑（氯仿∶正丁醇=4∶1），震蕩30min，3500r/min離心10min，取上清，重復(fù)9次，得到的多糖純度為89.57％，與鹽酸法相比除蛋白效果較好，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。利用DEAE-52纖維素柱純化白靈菇多糖，得到蒸餾水洗脫組分PNPsA、0.1mol/L NaCl洗脫組分PNPsB和0.3mol/L NaCl洗脫組分PNP

4、sC，共三個(gè)多糖組分。
　　體外抗氧化實(shí)驗(yàn)表明:超聲波輔助提取的白靈菇多糖清除羥基自由基和DPPH自由基的能力強(qiáng)于清除超氧陰離子自由基的能力，在4mg/mL時(shí)白靈菇多糖清除羥基自由基、DPPH自由基和超氧陰離子自由基的能力分別為98.39％、60.8％和22.06％。經(jīng)過DEAE柱純化得到的PNPsA、PNPsB和PNPsC三個(gè)組分中都具有清除羥基自由基和DPPH自由基的能力，且清除能力的大小為:PNPsB＞PNPs＞PNPsA＞

5、PNPsC。
　　果蠅生存實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，分別向培養(yǎng)基中添加0.25％、0.5％、1％白靈菇多糖會(huì)不同程度地提高果蠅半數(shù)死亡時(shí)間、平均壽命和最高壽命。1％劑量組的雌性果蠅的最高壽命比對(duì)照提高10.61％，雄性果蠅的最高壽命比對(duì)照提高11.82％，二者均達(dá)到顯著水平;0.5％劑量組的雌性果蠅的半數(shù)死亡時(shí)間、平均壽命和最高平均壽命分別比對(duì)照提高了23.08％、22.77％、18.24％，其中對(duì)平均壽命的提高效果達(dá)到顯著水平，半數(shù)死亡時(shí)

6、間和最高壽命的提高效果達(dá)到極顯著水平;添加0.5％白靈菇多糖的雄性果蠅的半數(shù)死亡時(shí)間、平均壽命和最高壽命分別提高27.86％、21.01％、20.05％，其中對(duì)平均壽命的提高效果達(dá)到顯著水平，對(duì)半數(shù)死亡時(shí)間和最高壽命的提高效果達(dá)到極顯著水平。因此，在培養(yǎng)基中添加0.5％白靈菇多糖能夠明顯延長(zhǎng)果蠅的壽命。
　　進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基中添加0.25％、0.5％、1％白靈菇多糖劑量組對(duì)果蠅的體重、逆重力爬行能力也有不同程度的增加。用0

7、.5％白靈菇多糖喂養(yǎng)果蠅30天后，雌性和雄性果蠅體重分別比對(duì)照顯著增加了12.02％和18.77％，逆重力爬行能力顯著提高了44.71％和34.80％。果蠅體內(nèi)抗氧化性測(cè)定結(jié)果顯示，不同白靈菇多糖劑量組喂養(yǎng)30天的雌性和雄性果蠅，超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性均升高，MDA含量下降，0.5％劑量組與對(duì)照組相比SOD、CAT酶活性升高與MDA含量降低均達(dá)到顯著水平，推測(cè)白靈菇多糖可通過提高抗氧化酶活性，減少脂質(zhì)過氧化作