細(xì)胞色素P450對(duì)蟲(chóng)螨腈在家蠶和小菜蛾體內(nèi)代謝的影響.pdf

1、本研究以家蠶和小菜蛾為試蟲(chóng)，測(cè)定了蟲(chóng)螨腈對(duì)家蠶和小菜蛾的毒性差異，利用多種P450誘導(dǎo)劑，篩選出了對(duì)家蠶和小菜蛾體內(nèi)P450含量和活性具有顯著誘導(dǎo)作用的誘導(dǎo)劑及其最佳使用濃度，比較了P450誘導(dǎo)劑和抑制劑處理家蠶和小菜蛾后，蟲(chóng)螨腈對(duì)家蠶和小菜蛾致毒作用的改變，探討了P450在蟲(chóng)螨腈致毒和代謝中的作用機(jī)制。主要結(jié)果如下：
　　 1.采用食下毒葉法和浸蟲(chóng)法測(cè)定了蟲(chóng)螨腈對(duì)2齡家蠶的毒性，48h結(jié)果表明，蟲(chóng)螨腈對(duì)家蠶的LC50值分別為2

2、40.05 mg·L-1和292.42 mg·L-1。采用浸葉法和浸蟲(chóng)法測(cè)定了蟲(chóng)螨腈對(duì)4齡小菜蛾的毒力，48h結(jié)果表明，蟲(chóng)螨腈對(duì)小菜蛾的LC50值分別為14.787mg·L-1和20.359 mg·L-1。食下毒葉法/浸葉法測(cè)得的毒力明顯大于浸蟲(chóng)法，說(shuō)明蟲(chóng)螨腈的胃毒作用大于觸殺作用。蟲(chóng)螨腈對(duì)小菜蛾的毒性與其對(duì)家蠶毒性相差近20倍，說(shuō)明蟲(chóng)螨腈對(duì)家蠶和小菜蛾具有明顯的毒性選擇性。
　　 2.用染有誘導(dǎo)劑的葉片飼喂4齡家蠶和小菜蛾，發(fā)

3、現(xiàn)家蠶和小菜蛾體內(nèi)P450含量能夠被誘導(dǎo)，并且P450含量隨誘導(dǎo)劑濃度和誘導(dǎo)時(shí)間的改變而發(fā)生變化。用10000mg·L-1的苯巴比妥、巴比妥、五甲基苯和香葉醇誘導(dǎo)處理家蠶一定時(shí)間后，家蠶體內(nèi)P450含量分別達(dá)到10.656、9.9515、6.2774和7.1656 pmol·mg pro-1，分別為對(duì)照的3.31、3.09、1.95和2.22倍。用10000mg·L-1的苯巴比妥、巴比妥、五甲基苯和香葉醇誘導(dǎo)處理小菜蛾一定時(shí)間后，測(cè)得小

4、菜蛾體內(nèi)P450含量分別為0.2471、0.1219、0.1297和0.1306 nmol·mg pro-1，分別是對(duì)照的4.08、2.01、2.14和2.16倍。對(duì)家蠶和小菜蛾來(lái)說(shuō)，苯巴比妥是最有效的P450含量誘導(dǎo)劑。萘和地塞米松對(duì)家蠶和小菜蛾P(guān)450含量沒(méi)有明顯的誘導(dǎo)作用。通過(guò)測(cè)定發(fā)現(xiàn)，家蠶和小菜蛾體內(nèi)P450含量差異顯著，正常情況下小菜蛾體內(nèi)P450含量是家蠶的20倍，誘導(dǎo)后可達(dá)80倍。
　　 3.誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)家蠶和小菜蛾

5、一定時(shí)間后，以對(duì)硝基苯甲醚為底物，測(cè)定家蠶和小菜蛾體內(nèi)P450 O-脫甲基酶活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，誘導(dǎo)劑對(duì)家蠶和小菜蛾體內(nèi)P450活性誘導(dǎo)作用不同。苯巴比妥和五甲基苯誘導(dǎo)家蠶48h后，家蠶體內(nèi)P450 O-脫甲基酶活性分別為4.6930和4.1237 pmol·mgpro-1·min-1，分別為對(duì)照的1.50和1.32倍。巴比妥和香葉醇對(duì)家蠶P450活性誘導(dǎo)作用不顯著。四種誘導(dǎo)劑對(duì)小菜蛾P(guān)450 O-脫甲基酶活性都具有誘導(dǎo)作用。在10000

6、mg·L-1濃度下，苯巴比妥、巴比妥、五甲基苯和香葉醇處理小菜蛾48h后測(cè)得小菜蛾體內(nèi)P450 D-脫甲基酶活性分別為0.4219、0.3157、0.3286和0.3186 nmol·mg pro-1·min-1，分別是對(duì)照的2.09、1.57、1.63和1.58倍。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，小菜蛾與家蠶體內(nèi)P450活性存在顯著差異，兩者相差近100倍。
　　 4.采用食下毒葉法和浸葉法測(cè)定誘導(dǎo)劑+蟲(chóng)螨腈和抑制劑+蟲(chóng)螨腈對(duì)家蠶和小菜蛾的毒力發(fā)現(xiàn)

7、，苯巴比妥、巴比妥、五甲基苯和香葉醇誘導(dǎo)后蟲(chóng)螨腈對(duì)家蠶的毒性上升，48h增效倍數(shù)分別為1.54、1.43、1.67和1.78倍。四種誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)后蟲(chóng)螨腈對(duì)小菜蛾的毒力明顯降低，48h LC50值分別為57.337、53.892、90.653和65.307 mg·L-1，毒力分別較對(duì)照降低了2.94、2.77、4.66、3.35倍。P450抑制劑（PBO）能夠增大蟲(chóng)螨腈對(duì)家蠶毒性，PBO+蟲(chóng)螨腈48h LC50值為171.79 mg·L-1

8、，增效倍數(shù)為1.48倍。PBO能夠降低蟲(chóng)螨腈對(duì)小菜蛾的毒力，PBO+蟲(chóng)螨腈對(duì)小菜蛾48h LC50值為31.391mg·L-1，增效倍數(shù)為0.63。
　　 5.以苯巴比妥為P450誘導(dǎo)劑，設(shè)定10.0、5.0和2.5 mg·L-1三個(gè)蟲(chóng)螨腈濃度測(cè)定蟲(chóng)螨腈對(duì)家蠶和小菜蛾呼吸代謝的影響。結(jié)果表明，在這些濃度下蟲(chóng)螨腈對(duì)家蠶呼吸速率的影響較小，并且苯巴比妥能夠降低由蟲(chóng)螨腈引起的家蠶呼吸速率的增大；蟲(chóng)螨腈能夠顯著影響小菜蛾的呼吸速率，藥劑