栽培黃瓜種間染色體導(dǎo)入系的構(gòu)建及遺傳評(píng)價(jià).pdf

1、黃瓜（Cucumis sativus L.）是葫蘆科黃瓜屬的一種重要蔬菜作物。由于其遺傳基礎(chǔ)極其狹窄，栽培種內(nèi)多態(tài)性低、優(yōu)異資源匱乏，已經(jīng)定位的目標(biāo)性狀QTL非常有限，已經(jīng)成為制約黃瓜分子育種進(jìn)程的重要因素。而其野生或近緣野生種中蘊(yùn)藏著豐富的基因資源，挖掘利用野生有用性狀是突破黃瓜育種瓶頸的一條有效途徑。本研究以受體親本栽培黃瓜‘北京截頭’和供體親本野生酸黃瓜（Cucumis hystrix Chakr.）經(jīng)遠(yuǎn)緣雜交和多代回交、自交而來

2、的后代群體為試驗(yàn)材料，通過分子標(biāo)記鑒定和。DNA序列分析，在證明酸黃瓜外源遺傳物質(zhì)已進(jìn)入后代群體的基礎(chǔ)上，結(jié)合分析標(biāo)記輔助選擇和表型變異分析構(gòu)建了黃瓜屬首個(gè)種間染色體片段導(dǎo)入系，并對(duì)其進(jìn)行了遺傳評(píng)價(jià)，以期為轉(zhuǎn)移利用野生優(yōu)異資源改良栽培黃瓜和種質(zhì)創(chuàng)新奠定理論和物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　 1栽培黃瓜經(jīng)種間雜交導(dǎo)入外源DNA片段的分子驗(yàn)證
　　 以普通栽培黃瓜與野生酸黃瓜經(jīng)種間雜交和多代回交、自交后代群體為材料，借助分子標(biāo)記證明該群體已

3、經(jīng)導(dǎo)入酸黃瓜外源DNA片段，遺傳多態(tài)性為13.2％，包括帶的缺失和新帶的產(chǎn)生。利用RAPD引物D-11和SSR引物06632在后代中分別擴(kuò)增出約350bp和180bp的酸黃瓜特異帶，序列分析表明其與酸黃瓜相應(yīng)DNA片段的相似性分別為92.93％和96.48％，堿基差異分別為41個(gè)和9個(gè)，包括堿基轉(zhuǎn)換、顛換和缺失。表明野生酸黃瓜DNA在導(dǎo)入進(jìn)入栽培黃瓜基因組的同時(shí)發(fā)生了少量不同類型的變異。
　　 2栽培黃瓜種問染色體片段導(dǎo)入系的構(gòu)

4、建
　　 以綜合性狀優(yōu)良的栽培黃瓜‘北京截頭’為受體親本，以攜帶有多種抗性基因的黃瓜珍稀野生種酸黃瓜為供體親本，在本試驗(yàn)室前期獲得種問雜交異源四倍體的基礎(chǔ)上，通過多代回交、自交，結(jié)合SSR標(biāo)記輔助選擇構(gòu)建了以‘北京截頭’為遺傳背景的黃瓜野生種染色體片段導(dǎo)入系，并對(duì)其導(dǎo)入片段的數(shù)目、分布、大小和覆蓋率等進(jìn)行了評(píng)價(jià)。結(jié)果表明：該群體由17個(gè)導(dǎo)入系組成，各導(dǎo)入系的覆蓋率介于0.8％～19.1％，平均為6.6％。其攜帶的38個(gè)供體片段不

5、均勻地分布于黃瓜7條染色體上，其長度介于1.1～14.9 cM，平均長度為5.3 cM，總長度為201.9 cM，在黃瓜基因組上的覆蓋率為23.5％。
　　 3栽培黃瓜種間染色體導(dǎo)入系農(nóng)藝性狀遺傳變異分析
　　 以12個(gè)黃瓜屬染色體片段導(dǎo)入系和其受體親本栽培黃瓜‘北京截頭’為試驗(yàn)材料，對(duì)其表現(xiàn)黃瓜野生種主要特征的農(nóng)藝性狀進(jìn)行了調(diào)查分析和相關(guān)QTL檢測。結(jié)果表明：各導(dǎo)入系在多數(shù)性狀上與受體親本差異極顯著，表現(xiàn)出野生種的遺傳