三疣梭子蟹不同地理群體遺傳多樣性和雜交育種的初步研究.pdf

1、本文利用生物學(xué)性狀多元分析和線粒體DNA基因片段序列分析技術(shù)對(duì)分別采自海州灣、萊州灣、遼東灣、舟山的三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)4個(gè)群體的遺傳多樣性進(jìn)行了比較分析，同時(shí)對(duì)三疣梭子蟹群體內(nèi)自繁和種群間雜交子代的生長(zhǎng)性狀進(jìn)行了研究，主要結(jié)果如下： 對(duì)三疣梭子蟹4個(gè)野生群體線粒體16S rRNA和COI基因片段進(jìn)行了PCR擴(kuò)增和產(chǎn)物測(cè)序，分別得到長(zhǎng)度為524bp和658bp的片段。兩段序列的堿基組成均

2、顯示較高的A+T比例(16S rRNA基因70.8％，COI基因63％)，這與果蠅、蝦類、蟹類等無(wú)脊椎動(dòng)物的16S rRNA和CO I基因片段研究結(jié)果相似。通過對(duì)三疣梭子蟹16S rRNA和CO I基因片段遺傳特征的研究，發(fā)現(xiàn)種內(nèi)地理群體間變異較低，在16個(gè)樣本中，16S rRNA基因序列中共檢測(cè)到1個(gè)變異位點(diǎn)，2種單倍型；CO I基因序列中共檢測(cè)到4個(gè)變異位點(diǎn)，5種單倍型。另外，以中華絨螯蟹為外群探討了梭子蟹科(Portunidea)

3、幾個(gè)屬種的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系。用MEGA4.0軟件中的NJ法構(gòu)建了系統(tǒng)進(jìn)化樹，基于16S rRNA和CO I兩種片段的聚類結(jié)果均顯示梭子蟹屬(Portunus)與美青蟹屬(Callinectes)親緣關(guān)系最近，先聚在一起，然后再與蟳屬(Charybdis)聚在一起，最后才與外群中華絨螯蟹聚在一起，這一結(jié)果與傳統(tǒng)分類基本一致。 采用不同地理群體內(nèi)自繁和種群間雜交的方法，進(jìn)行了自繁和雜交子一代生長(zhǎng)性狀的比較研究。結(jié)果表明，80日齡時(shí)的雜交

4、子一代在各項(xiàng)指標(biāo)都表現(xiàn)出一定的雜種優(yōu)勢(shì)(0.24％～13.50％)，LS在5個(gè)性狀中都高于ZL。100日齡時(shí)雜交子一代表現(xiàn)出的雜種優(yōu)勢(shì)有所下降，雜種優(yōu)勢(shì)率在-0.88％～4.13％之間，甲長(zhǎng)表現(xiàn)出雜種劣勢(shì)。120日齡時(shí)雜交子一代的雜種優(yōu)勢(shì)范圍為-1.91％～4.37％，甲長(zhǎng)、甲寬表現(xiàn)出雜種劣勢(shì)。可見不同雜交組合、不同性狀、不同時(shí)間表現(xiàn)出的雜種優(yōu)勢(shì)有顯著差異。ANOVA分析表明，80日齡、100日齡、120日齡時(shí)，5個(gè)生長(zhǎng)性狀在群體之間存

5、在極顯著差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，三疣梭子蟹4個(gè)雜交子一代在生長(zhǎng)性狀上存在一定程度的雜種優(yōu)勢(shì)，可見種內(nèi)群體間雜交是培育三疣梭子蟹優(yōu)良新品系的重要方法之一。 另外，測(cè)量了海州灣、萊州灣、遼東灣、舟山4個(gè)選育二代群體100日齡三疣梭子蟹的5個(gè)外部形態(tài)性狀，用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)這4個(gè)群體進(jìn)行了聚類分析、判別分析和單因子方差分析。聚類分析結(jié)果表明，海州灣和舟山2個(gè)群體形態(tài)最為接近，遼東灣和萊州灣2個(gè)群體形態(tài)較為接近。對(duì)樣本所屬群體進(jìn)行

6、判別分析，海州灣、萊州灣、遼東灣、舟山4個(gè)群體的判別準(zhǔn)確率分別為80％、76.7％、80％和42.9％，綜合判別率為70.3％；建立了4個(gè)群體各自的判別函數(shù)公式。通過對(duì)4項(xiàng)形態(tài)比例參數(shù)進(jìn)行單因素方差分析，計(jì)算差異系數(shù)，發(fā)現(xiàn)4個(gè)參數(shù)在群體間存在極顯著差異。3種分析結(jié)果均認(rèn)為，4個(gè)群體三疣梭子蟹在形態(tài)上產(chǎn)生了一定程度的差異，但所有的差異均未達(dá)到亞種水平。 本研究以期為三疣梭子蟹親緣關(guān)系的比較、種質(zhì)資源保護(hù)和良種的培育提供依據(jù)，從而促