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文檔簡(jiǎn)介
1、本文使用平菇天達(dá)300菌株,利用孢子彈射法收集孢子,經(jīng)梯度稀釋、鏡檢獲得單核菌絲10株,再利用得到的單核菌絲進(jìn)行單核菌絲間的交配試驗(yàn)。成功獲得雙核菌絲9株。利用交配試驗(yàn)獲得各單核菌絲的交配型,發(fā)現(xiàn)單核菌絲表型特征與其交配型之間并無(wú)關(guān)聯(lián)。并針對(duì)單核菌絲和雙核菌絲間的差異進(jìn)行一系列進(jìn)行試驗(yàn)。以期探討單核菌絲間、單雙核菌絲間的差異。以及造成該差異的因?yàn)楹驮摬町惖膽?yīng)用價(jià)值。
1.以本實(shí)驗(yàn)室栽培的平菇天達(dá)300為材料,利用孢子彈射法
2、收集孢子,經(jīng)梯度稀釋,通過(guò)菌絲生長(zhǎng)速度、菌絲粗細(xì)、鏡檢是否存在鎖狀聯(lián)合等方法綜合鑒定獲得單核菌絲10株。
2.利用所得的10株單核菌絲,進(jìn)行相互間的菌絲交配試驗(yàn)。通過(guò)鏡檢是否存在鎖狀聯(lián)合,共得到9株雙核菌絲及10株單核菌絲的交配型和交配型比例。其中A1B1:A282:A182的比例分別為5:2:3,存在偏分離現(xiàn)象。依據(jù)菌絲生長(zhǎng)速度、氣生菌絲是否濃密、邊緣是否規(guī)則等特征將單核菌絲劃分為四種類型。通過(guò)比對(duì)10株單核菌絲表性特征
3、及測(cè)得的交配型,發(fā)現(xiàn)平菇菌絲表性特征與交配型之間無(wú)相關(guān)性。
3.采用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳的方法,對(duì)雙核菌絲13×3、4×3、13×5、4×5,單核菌絲13、3、4、5、6的漆酶、過(guò)氧化物酶、NADH脫氫酶、NADPH脫氫酶、纖維素酶進(jìn)行同工酶分析。發(fā)現(xiàn)單雙核菌絲間同工酶譜差異性較大,同一遷移率下有的同工酶酶譜無(wú)差別,有的單核菌絲有該同工酶譜而雙核菌絲沒(méi)有,有的單核菌絲沒(méi)有該同工酶譜而雙核菌絲有。
4.比對(duì)
4、了9株雙核菌絲及其親代兩個(gè)單核菌絲間的表型差異,以期利用該方法探討單核菌絲間的可親和性,甚至結(jié)實(shí)性。盡管該方法還有待完善。但是為鑒定平菇天達(dá)300單核菌絲間的可親和性提供了理論依據(jù)。
5.對(duì)研究中出現(xiàn)的同工酶差異及出現(xiàn)上述差異的因?yàn)檫M(jìn)行了分析,推測(cè)新條帶的出現(xiàn)可能與雜核體的營(yíng)養(yǎng)不親和性有關(guān)。而條帶的消失可能是編碼該同工酶的基因與來(lái)自另一核的基因具有同源性被沉默掉了,而關(guān)于新條帶出現(xiàn)的因?yàn)榭赡軐?duì)雜種優(yōu)勢(shì)機(jī)理的因?yàn)榈慕忉寱?huì)有幫
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