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文檔簡介
1、芒果享有“熱帶水果之王”的美譽,與葡萄、柑橘、香蕉、蘋果并稱“世界五大水果”。商品化、規(guī)模化是我國南方地區(qū)芒果生產現(xiàn)如今的發(fā)展方向,但芒果的鑒定品種、選種育種及其遺傳規(guī)律相關的基礎研究絕大多數還是采用形態(tài)學標記方法。該方法雖然直觀地反映了植物的親緣遠近及演化關系,但未能反映植物內部的遺傳相關規(guī)律。采用此法進行品種鑒定、雜交育種及其相關研究存在準確性低等問題。隨著分子生物學及生物技術的發(fā)展,特別是分子標記在輔助育種、品種鑒定等各個方面的應
2、用,克服了傳統(tǒng)植物學性狀研究方法的缺陷,促進了芒果育種、鑒定品種和遺傳多樣性研究的發(fā)展。本試驗研究采用ISSR分子標記技術對芒果實生苗親本鑒定、不同顏色類群芒果遺傳多樣性分析等方面分別進行相關研究,并與植物學形態(tài)標記相比較,以達到揭示芒果遺傳特征的目的,為新品種的選育提供參考依據。結果如下:
1、通過對SDS法、CTAB法和改良CTAB法獲取芒果DNA方法比較分析可知:改良CTAB法獲得DNA效果較好;SDS法獲得的DNA
3、效果較差,芒果的ISSR分析不適合用于此方法。
2、適合于芒果ISSR-PCR分析的優(yōu)化反應體系和擴增程序為:最佳反應程序:94℃預變性5min、94℃變性60s、(退火溫度隨引物不同而定)50s、72℃延伸60s、循環(huán)35次、72℃最后延伸7min、10℃保存;20μl體系中,DNA模板濃度75ng/μl、dNTPs濃度0.25mmol/L、引物濃度0.20mmol/L、Taq酶濃度0.25Uμ/l、10×PCR Buf
4、fer加2μl、雙蒸水補至20μl,混勻后擴增。
3、從18條引物中篩選出4條引物(UBC-851,UBC-856,UBC-857,UBC-868),對97-1實生苗疑是親本進行ISSR-PCR分析,結果證明:97-1實生苗的父母本分別為四川紅芒和紫花芒。
4、采用ISSR分子標記技術對芒果紅色和黃綠色品種類群進行分析,結果表明:從50條引物中篩選出5條引物(UBC-840,UBC-857,UBC-864,U
5、BC-868,UBC-890)共擴增出51條帶,其中多態(tài)性條帶41條,多態(tài)率達到80.4%,條帶的大小分布在400bp-3200bp之間。聚類分析結果,以0.78作為相似系數分界點,8個芒果品種分為2個大類;凱特芒、愛文芒、紅芒6號(紅色品種類群)為一類;臺農1號、金煌芒、四季蜜芒、金穗芒、桂熱82(黃綠色品種類群)為一類。引物UBC-864可以將紅色品種類群與黃綠色品種類群完全區(qū)分開。
5、通過對97-1實生苗、紫花芒、
6、疑是親本四川紅芒的枝條、葉片顏色動態(tài)變化觀察對比分析可知:97-1實生苗枝條、葉片的顏色性狀更接近于四川紅芒枝條、葉片的顏色性狀。依據形態(tài)標記,推測實生苗的父本來自四川紅芒,果皮顏色可能表現(xiàn)紅色性狀。
6、從紅色品種類群和黃綠色品種類群枝條、葉片顏色動態(tài)變化觀察對比分析可知,不同品種的枝條,葉片的顏色指數與果實的顏色呈現(xiàn)出相關的規(guī)律性??梢栽谝欢ǔ潭壬?,用于品種顏色的區(qū)分和雜交后代果皮顏色推論。
7、不同顏色
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