玉米幼胚培養(yǎng)系統(tǒng)優(yōu)化及硝態(tài)氮代謝與幼胚培養(yǎng)關(guān)系的研究.pdf

1、針對玉米自交系較難誘導(dǎo)高質(zhì)量愈傷組織的問題，本試驗(yàn)以鄭22、掖478和鄭58三個(gè)自交系為材料，研究了不同激素、不同濃度及其配比對愈傷組織誘導(dǎo)和生長的影響。結(jié)果表明：愈傷組織誘導(dǎo)率和愈傷質(zhì)量存在基因型差異，對鄭22較易誘導(dǎo)出高質(zhì)量愈傷的材料，可直接用含2mg·L-12，4-D的誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)，用添加2mg·L-12，4-D的培養(yǎng)基進(jìn)行繼代培養(yǎng)；對于鄭58和掖478等較難誘導(dǎo)愈傷的材料，可使用2～3mg·L-1的麥草畏誘導(dǎo)，再用添加2mg·

2、L-12，4-D的培養(yǎng)基繼代培養(yǎng)。 本研究同樣證實(shí)，同一基因型的材料隨著繼代次數(shù)的增加，愈傷組織生長量及植株再生率明顯下降，且自交系生長量與植株再生率普遍低于雜交組合；Ⅱ型愈傷如齊319經(jīng)多次繼代后生長量與植株再生率均無明顯下降。為保持長期繼代愈傷組織的胚性，提高植株再生率，在分化前對愈傷組織進(jìn)行了48h干燥處理，再生苗率平均比對照提高57.39％，最高為對照的11倍。此外又用不同濃度的ABA、山梨醇及干燥48h在繼代與分化前對

3、愈傷組織進(jìn)行預(yù)處理，結(jié)果表明：（1）適當(dāng)濃度的山梨醇能夠加快愈傷組織的生長，其適宜濃度為4％或5％；ABA處理對愈傷組織生長量的影響不明顯；48h干燥處理后，所有基因型愈傷組織的生長量比對照均有顯著提高。（2）三種處理的植株再生率均高于對照，其中干燥48h處理的效果最好，ABA在提高植株再生方面相對比較明顯，再生苗率最大值多出現(xiàn)在3mg·L-1ABA處理中；三種方法均能明顯加快植株再生進(jìn)程。從提高愈傷組織生長量、植株再生率及加快再生進(jìn)程

4、方面綜合分析，干燥48h處理的效果最好，并且操作簡便，沒有基因型的差異，具有廣泛的適應(yīng)性。 基于ABA在提高植株再生方面優(yōu)于山梨醇的特點(diǎn)，將愈傷組織在繼代與分化前用不同濃度ABA預(yù)處理一周與將愈傷組織放在含ABA的繼代和分化培養(yǎng)基上直接培養(yǎng)對生長量和植株再生率的影響進(jìn)行比較分析，結(jié)果顯示：直接用含ABA的繼代培養(yǎng)基培養(yǎng)，愈傷組織生長能力普遍較低，而用ABA預(yù)處理一周后，生長量普遍較對照有所提高；用3mg·L-1ABA進(jìn)行預(yù)處理，

5、愈傷組織生長量明顯高于其他濃度處理；另外，3mg·L-1ABA預(yù)處理可使長期繼代的愈傷組織植株再生率提高25.71％，且第二周平均植株再生率可達(dá)22.6％，而直接生長在含ABA的分化培養(yǎng)基上的材料第二周無再生苗，可見，3mg·L-1ABA預(yù)處理對提高生長量和植株再生率及加快再生進(jìn)程均有一定的促進(jìn)作用。氮代謝是植物體內(nèi)最基本的物質(zhì)代謝之一，亞硝酸積累對細(xì)胞有毒害作用，有關(guān)氮代謝及其他生理因素對玉米愈傷組織生長量和植株再生的影響尚未見詳細(xì)報(bào)

6、道。本文對玉米自交系在脫分化、繼代及分化過程中的硝態(tài)氮代謝進(jìn)行了研究，對同一基因型不同類型的愈傷組織及經(jīng)干燥48h處理的愈傷組織的氮代謝進(jìn)行了比較分析。研究表明：（1）不同基因型脫分化過程中氮代謝存在差異，各基因型硝酸鹽含量差異不顯著，而亞硝酸還原酶活性自交系本地白最低，其他基因型為本地白的2～2.7倍，另外本地白的亞硝酸鹽積累量明顯高于其他基因型。（2）繼代與分化過程中，掖478的NiR活性均較高而其亞硝酸鹽含量也較高，雖能長期繼代但