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文檔簡介
1、本課題的目的是初步闡釋日糧纖維水平對M細胞與抗原相互作用的調(diào)控效應,研究日糧中不同纖維水平對生長肉兔生長性能、屠宰性能、肌肉品質(zhì)以及胃腸道和免疫器官發(fā)育的影響。為其他動物及人類關于營養(yǎng)因素調(diào)控腸道黏膜免疫的機制提供理論依據(jù),并為營養(yǎng)因素作為抗原免疫調(diào)節(jié)劑的研究提供支持。
1.日糧纖維水平對生長肉兔的影響
試驗選用120只體重相近,健康狀況良好的35日齡斷奶肉兔,隨機分成3組,每組40個重復,每個重復1只試兔,分別飼喂
2、低(LF, CF14.32%)、中(MF, CF18.46%)、高(HF, CF22.37%)三種不同纖維水平的試驗日糧。預試期7 d,正試期20d。試驗結(jié)果如下:
日糧不同纖維水平對平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)有顯著影響(P=0.0012、P=0.0219和P=0.0001),ADG最高或F/G最低出現(xiàn)在LF組。日糧不同纖維水平對宰前活重、半凈膛胴體重和全凈膛胴體重宰前活重(P=0.018
3、0、P=0.0366和P=0.0341)影響差異顯著,但對半凈膛屠宰率和全凈膛屠宰率無顯著差異(P>0.05)。日糧不同纖維水平對生長肉兔肌肉的pH,亮度值(L*)、紅度值(a*)和黃度值(b*)均無顯著影響(P>0.05)。日糧不同纖維水平對胃、盲腸及其內(nèi)容物的相對重量(P=0.0115、P=0.0220和 P=0.0311、P=0.0311)影響差異顯著,其中HF日糧組均顯著高于LF日糧組(P<0.05)。日糧不同纖維水平對胸腺、脾
4、臟和肝臟重量(P=0.0052,P=0.0068和 P=0.0338)均有顯著影響,隨著日糧纖維水平的升高,免疫器官的重量均顯著增大。另外,脾臟指數(shù)在 MF組達到最大值,但與 LF組之間無顯著差異(P>0.05)。
2.日糧纖維水平對兔腸道M細胞與抗原相互作用的影響
選擇飼喂后20d的試兔,分別在三個日糧處理組中隨機選擇8只試兔采集腸道派爾氏結(jié),在體外進行組織細胞培養(yǎng),接種同一數(shù)量含綠色熒光蛋白的XL-Gold大腸桿
5、菌(指示菌),分別培養(yǎng)10 min、30 min、1 h后,經(jīng)組織固定制作石蠟切片。通過外科麻醉手術取出結(jié)腸末端蚓突進行結(jié)扎,做成腸袢,分別接種相同數(shù)量的指示菌,選擇在10 min、30 min、1 h三個不同時間點蚓突進行組織固定后,制作石蠟切片。采集腸道派爾氏結(jié)和蚓突組織液氮保存,分析相關基因水平與蛋白水平的表達差異;利用抗波形蛋白抗體檢測上述淋巴組織內(nèi)M細胞的數(shù)量,評價不同水平纖維調(diào)控下腸道M細胞對特定病原體的運載能力的影響。研究
6、結(jié)果如下:
2.2體外試驗
日糧纖維水平M細胞數(shù)量的影響,對培養(yǎng)10min時的M細胞數(shù)量影響不顯著(P>0.05),對培養(yǎng)30 min時組織上的M細胞有顯著影響(P<0.05),但是LF組和HF組無顯著差異(P>0.05),對培養(yǎng)1h時組織上M細胞的數(shù)量影響不顯著(P>0.05)。
2.3體內(nèi)試驗
日糧不同纖維水平對派爾氏結(jié)RANK、RANK-L和OPG基因表達水平HF組和LF組之間影響不顯著(P
7、>0.05),對RANK和OPG基因的表達水平在活體培養(yǎng)10min、30min和1h時均有顯著影響(P<0.05),對RANK-L基因的表達水平均無顯著影響(P>0.05);對RANK、RANK-L和OPG蛋白水平的表達均無顯著影響(P>0.05);對蚓突活體培養(yǎng)30min和1h時所含M細胞的數(shù)量均有顯著影響(P<0.05),對M細胞吞菌數(shù)量和吞菌距離在30min和1h兩個時間點均有顯著影響(P<0.05)。
綜合本試驗測定指
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