大豆質(zhì)核互作雄性不育系NJCMS1A與保持系NJCMS1B差異表達(dá)基因的研究.pdf

1、作物雜種優(yōu)勢利用是提高產(chǎn)量的一條有效途徑，質(zhì)核互作雄性不育性在雜種優(yōu)勢利用中具有重要作用?；蛐酒夹g(shù)是研究差異表達(dá)基因的有效手段，有助于篩選目的基因。本文利用基因芯片技術(shù)篩選大豆質(zhì)核互作雄性不育系NJCMS1A與其保持系NJCMS1B間的差異表達(dá)基因，尋找大豆雄性不育相關(guān)基因，旨在為大豆雄性不育機(jī)理研究提供基礎(chǔ)。獲得主要結(jié)果如下:
　　 1.以大豆質(zhì)核互作雄性不育系NJCMS1A及其保持系NJCMS1B為材料，通過基因芯片技術(shù)

2、獲取兩者的花蕾期基因表達(dá)譜，篩選出表達(dá)量具有顯著差異的基因985個(gè)，其中上調(diào)差異表達(dá)基因429個(gè)、下調(diào)差異表達(dá)基因556個(gè)。利用GO(GeneOntology)分類技術(shù)對差異表達(dá)2倍以上的基因進(jìn)行功能分析，發(fā)現(xiàn)這些差異表達(dá)基因主要涉及蛋白代謝、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、物質(zhì)運(yùn)輸、能量代謝、核酸代謝、基因表達(dá)調(diào)控等，可能與大豆雄性不育有關(guān)，挑選大豆Gmatp6和GmSYP兩個(gè)基因進(jìn)行進(jìn)一步研究。
　　 2.從大豆質(zhì)核互作雄性不育系NJCMS1A中

3、克隆了Gmatp6基因的cDNA全長，多重序列比較分析表明Gmatp6與其它物種atp6基因具有較高的同源性，有共同的保守結(jié)構(gòu)域，屬于ATP合成酶家族成員，并構(gòu)建植物表達(dá)載體轉(zhuǎn)化擬南芥，進(jìn)行了初步的功能分析。
　　 3.以ATP6作為誘餌蛋白，應(yīng)用酵母雙雜交技術(shù)共轉(zhuǎn)化Gmatp6和開花相關(guān)基因MADS-box，以驗(yàn)證兩者的互作性，結(jié)果顯示在獲得的陽性克隆中并沒有發(fā)現(xiàn)兩者存在相互作用。
　　 4.從NJCMS1B中克隆了可