氟損傷甲狀腺機理研究.pdf

1、氟是機體必需的微量元素，攝入適量能維持機體正常的生命活動，但它還是一種全身性毒物，其對機體內分泌腺的影響已成為近年來的研究熱點。有實驗表明氟能夠引起甲狀腺腫大，但是也有學者持反對意見。
　　 本實驗分別復制SD大鼠氟中毒動物模型和氟化鈉處理原代培養(yǎng)SD大鼠甲狀腺細胞、大鼠甲狀腺細胞系（fisher rat thyroid cell line，F(xiàn)RTL）。80只SD大鼠飲水中添加的氟化鈉含量分別為0，50mg/L，100mg/L，

2、200mg/L，原代培養(yǎng)的SD大鼠甲狀腺細胞染氟化鈉濃度分別為0，10μmol/L，100μmol/L，1000μmol/L，F(xiàn)RTL細胞染氟化鈉濃度分別為0，1.25mg/L，2.5mg/L，5.0mg/L，10.0mg/L，20mg/L。運用電鏡學、分子生物學、免疫學等技術研究氟對甲狀腺激素代謝基因表達、功能蛋白表達和分布、細胞因子基因表達及分泌的影響，體外實驗能解除下丘腦-腺垂體-甲狀腺軸的影響，影響因素單一。本實驗通過體內體外氟

3、中毒實驗闡述氟引起甲狀腺腫大的分子機理，從而為揭示氟引起甲狀腺損傷提供理論依據(jù)。
　　 實驗成功的復制SD大鼠氟中毒動物模型和制備體外氟中毒甲狀腺細胞樣品，通過形態(tài)學觀察及競爭放射性免疫法測定反映甲狀腺細胞結構和分泌激素功能的一系列指標，結果發(fā)現(xiàn)氟引起甲狀腺激素T3、T4合成和分泌障礙及直接影響整個甲狀腺細胞的生長和發(fā)育過程。
　　 高氟（200mg/L）大鼠甲狀腺血管增生和大面積增生結節(jié)，尤其氟對甲狀腺細胞膜損傷嚴重；

4、本實驗通過甲狀腺組織切片HE染色和掃描電鏡等手段檢測氟對甲狀腺細胞的損傷，結果證明氟能夠引起甲狀腺腫大和一序列的損傷；運用RT-PCR、免疫細胞化學和免疫熒光組織化學等方法測定甲狀腺相關功能酶類，以及部分相關蛋白和生長因子的表達與含量，結果發(fā)現(xiàn)甲狀腺球蛋白（TG）、過氧化物酶（TPO）、鈉碘轉運體（NIS）、促甲狀腺激素受體（TSHR）、血管內皮生長因子（VEGF）等與甲狀腺功能密切相關的指標均表現(xiàn)異常；氟引起自由基代謝紊亂，致NO生成

5、的功能酶以及相關生長因子（如iNOS和VEGF）表達受到影響發(fā)生顯著變化，微血管增生，自由基和脂質過氧化物在甲狀腺中蓄積，破壞了甲狀腺濾泡上皮細胞結構和功能，干擾膠質的代謝，抑制甲狀腺中碘的轉運和有機化過程，干擾甲狀腺過氧化物酶的活性，破壞甲狀腺激素合成和分泌的各個環(huán)節(jié)，阻斷了TSH對甲狀腺細胞刺激作用，導致TSHR-cAMP無法發(fā)揮正常作用，甲狀腺細胞功能下降。
　　 此外本實驗研究FRTL細胞在外界氟的作用下NO分泌、細胞因

6、子基因表達和分泌的影響。運用RT-PCR、ELISA檢測氟刺激FRTL細胞72h后IL-6 mRNA、IL-8mRNA、IFN-γmRNA，TNF-a mRNA水平和細胞上清中VEGF分泌量；同時western blot測定NF-κB p65蛋白水平，結果表明：氟刺激這些細胞因子的表達，一方面通過抑制甲狀腺激素代謝基因表達而影響甲狀腺細胞甲狀腺激素的分泌；另一方面，氟刺激細胞因子和NF-κB p65表達導致甲狀腺細胞自身抵抗氟能力下降，