大豆種質(zhì)11S球蛋白A-,1a-B-,1b-、A-,5-A-,4-B-,3-和A-,3-B-,4-亞基缺失的分子機(jī)制.pdf

1、本文以10個(gè)大豆亞基缺失品種為材料，包括1個(gè)A1aB1b亞基缺失，7個(gè)A5A4B3亞基缺失和2個(gè)A3B4亞基缺失，以亞基正常的南農(nóng)大黃豆為參照，在考察了它們亞基缺失穩(wěn)定性的基礎(chǔ)上，系統(tǒng)地對(duì)亞基缺失的分子遺傳機(jī)制進(jìn)行了探究，結(jié)果如下：
　　 (1)10個(gè)供試材料的缺失表型各對(duì)應(yīng)于基因水平上不同類(lèi)型的突變，這些突變?cè)谶z傳上是穩(wěn)定性的，沒(méi)有伴隨著其它變異的產(chǎn)生。
　　 (2)與參照南農(nóng)大黃豆以及NCBI上的正常序列相比，A1a

2、B1b亞基缺失材料桂陽(yáng)紫金豆的Gyl基因中存在大片段的序列重復(fù)，涉及長(zhǎng)度達(dá)584bp，但突變的存在并不影響基因的正常轉(zhuǎn)錄。相應(yīng)地，在其cDNA中也發(fā)現(xiàn)了額外的一段203bp的重復(fù)序列。由于發(fā)生變異的地方位于基因和cDNA序列的后半段，其mRNA翻譯時(shí)在此處的讀碼框?qū)l(fā)生改變，且被提前終止，得不到完整的A1aB1b亞基前體，導(dǎo)致缺失。
　　 (3)7個(gè)A5A4B3亞基缺失材料的cDNA的起始密碼子均發(fā)生了點(diǎn)突變，由ATG突變成了A

3、TA，從而喪失啟始mRNA翻譯的正常功能，與王紅玲(2006)發(fā)現(xiàn)這些材料Gy4基因的起始密碼子突變情況相吻合。該突變表現(xiàn)出良好的規(guī)律性和保守性，同樣也不影響基因的正常轉(zhuǎn)錄，可在接下來(lái)mRNA的翻譯過(guò)程中，起始密碼子的突變將導(dǎo)致讀碼的移位，產(chǎn)生一個(gè)全新的、極短的開(kāi)放讀碼框，使得理論上只能得到4個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)序列：MLCY。因此，這個(gè)關(guān)鍵位點(diǎn)的突變極有可能便是這7個(gè)缺失材料缺失A5A4B3亞基的共同原因。
　　 (4)對(duì)兩個(gè)A3

4、B4亞基缺失材料Gy5基因的終止密碼子所在片段進(jìn)行克隆測(cè)序，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)終止密碼子出現(xiàn)了變異，但在西峽小粒黃的cDNA序列中，終止密碼子卻由正常的TAA突變成了編碼谷氨酰胺(Gln)的CAA。結(jié)合王紅玲(2006)對(duì)黑豆一號(hào)的研究，發(fā)現(xiàn)兩個(gè)A3B4亞基缺失材料在基因沒(méi)有突變的情況下，其cDNA都在同樣的位置上發(fā)生了點(diǎn)突變，具有一定的規(guī)律性和保守性。終止密碼子突變的結(jié)果是，突變的mRNA的翻譯將不能被及時(shí)終止，與正常的A3B4亞基前體相比，由