山東省獸醫(yī)微生物菌毒種平臺(tái)的初步建立.pdf

1、本研究根據(jù)2006～2007年山東省畜禽疾病爆發(fā)報(bào)道和山東省畜禽養(yǎng)殖分布，在山東省范圍內(nèi)進(jìn)行大腸桿菌、豬鏈球菌、金黃色葡萄球菌、雞傷寒沙門氏菌和新城疫病毒的病料采集，采集地點(diǎn)分布在濟(jì)南、濰坊、煙臺(tái)、臨沂、青島等9個(gè)地區(qū)17個(gè)規(guī)模牧場(chǎng)及獸醫(yī)院。
　　 研究對(duì)細(xì)菌庫(kù)采用“病料收集—分離培養(yǎng)—生物學(xué)特性試驗(yàn)—細(xì)菌純化真空凍干”的技術(shù)路線，分別以動(dòng)物臨床癥狀、鏡檢觀察、分離培養(yǎng)特性、細(xì)菌生化鑒定來(lái)判定和描述細(xì)菌特性;對(duì)病毒庫(kù)采用“病料收

2、集—病毒分離培養(yǎng)—生物學(xué)特性試驗(yàn)——分子生物學(xué)鑒定—病毒純化真空凍干”的技術(shù)路線，分別以HA-HI試驗(yàn)、動(dòng)物臨床癥狀、MDT和ICPI測(cè)定初步判定和描述NDV的特性，以RT-PCR分子生物學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行最終鑒定，來(lái)獲得菌種資源信息。
　　 本研究共分離鑒定了大腸桿菌80株，平臺(tái)資源號(hào)為1511C0006SL000061～140;金黃色葡萄球菌30株，平臺(tái)資源號(hào)為1511C0006SL000141～170;豬鏈球菌50株，平臺(tái)資源號(hào)為

3、1511C0006SL000171～190和1511C0006SL000271～300;雞傷寒沙門氏菌103株，平臺(tái)資源號(hào)為1511C0006SL000318～420;特殊菌株17株，平臺(tái)資源號(hào)為1511C0006SL000301～317。對(duì)分離到細(xì)菌資源進(jìn)行生化試驗(yàn)，均符合各自的生化特性。
　　 本研究共分離到60株NDV，6.6％的新城疫分離株為新城瘦弱毒型，35％為中等毒力型，58.3％為強(qiáng)毒型，都可以特異性擴(kuò)增出F基因片

4、段。山東省NDV病毒庫(kù)的強(qiáng)毒株與國(guó)內(nèi)外NDV序列的HN基因同源性在80％～97％之間，中毒株的同源性在82％～98％之間，弱毒株的同源性在82％～98％之間;山東省NDV病毒庫(kù)21株毒株之間核苷酸同源性在92％～99.9％之間，氨基酸同源性在95％～100％之間。同源關(guān)系進(jìn)化樹表明強(qiáng)毒株與標(biāo)準(zhǔn)株LaSota距離較近，強(qiáng)、中弱毒株在進(jìn)化樹上明顯分為不同類別。菌種資源收集合理并具有代表性，資源平臺(tái)能夠充分刻畫山東省NDV特性。