刺梨花藥和未受精胚珠離體培養(yǎng).pdf

1、本論文以刺梨系列品種花藥和未受精胚珠為材料，對(duì)影響花藥和未受精胚珠離體培養(yǎng)的關(guān)鍵因素進(jìn)行了篩選，并開展了愈傷組織再分化試驗(yàn)，此外對(duì)愈傷組織及其分化器官作了細(xì)胞學(xué)鑒定。獲得以下結(jié)果：
　　1、確定了刺梨品種貴農(nóng)1號(hào)、2號(hào)、5號(hào)、6號(hào)、7號(hào)小孢子處于單核期時(shí)花器的形態(tài)特征。
　　2、愈傷組織誘導(dǎo)
　?。?）小孢子處于單核期的花藥最有利于愈傷組織的誘導(dǎo)。
　?。?）所有參試刺梨品種花藥和貴農(nóng)1號(hào)、5號(hào)、6號(hào)、7號(hào)未受精

2、胚珠低溫預(yù)處理3d，愈傷組織誘導(dǎo)率最高；100mg·L-1Vc浸泡預(yù)處理2h最有利于花藥愈傷組織的誘導(dǎo)。
　?。?）愈傷組織誘導(dǎo)率大小順序?yàn)椋嘿F農(nóng)1號(hào)>貴農(nóng)5號(hào)>貴農(nóng)7號(hào)>貴農(nóng)6號(hào)>貴農(nóng)2號(hào)。
　?。?）花藥愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為MS+3％蔗糖+3.0mg·L-1NAA+0.5mg·L-16-BA；未受精胚珠愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為MS+5％蔗糖+1.0mg·L-1NAA+1.0mg·L-16-BA。
　?。?）

3、培養(yǎng)基中附加100mg·L-1Vc或50mg·L-1AgNO3顯著提高愈傷組織的誘導(dǎo)率，花藥和未受精胚珠的最高誘導(dǎo)率分別為41.56％和83.47％。
　　（6）隨著取蕾時(shí)期的推移，愈傷組織誘導(dǎo)率呈現(xiàn)先增后降的趨勢(shì)，花期的2-6周為最佳的取蕾時(shí)期。
　?。?）黑暗條件下培養(yǎng)可以提高愈傷組織的誘導(dǎo)率。3、花藥愈傷組織形態(tài)及其起源的細(xì)胞學(xué)觀察
　　初步判斷一個(gè)月后花藥壁四周或腹縫線形成的白色疏松顆粒狀愈傷組織多數(shù)為花粉愈傷

4、組織；小孢子脫分化的啟動(dòng)時(shí)間比藥壁組織的時(shí)間晚1周左右；貼近藥壁組織的小孢子較易形成愈傷組織。
　　4、增殖與分化
　?。?）花藥愈傷組織的最佳繼代周期為20-25d。
　?。?）貴農(nóng)1號(hào)未受精胚珠愈傷組織根的分化率高于貴農(nóng)5號(hào)。
　?。?）添加較高濃度的AgNO3有利于愈傷組織分化出根。
　?。?）添加0.5mg·L-12,4-D有利于愈傷組織根分化。
　　（5）愈傷組織類原球莖分化的最佳培養(yǎng)基為M