油料能源植物光皮樹花藥離體培養(yǎng)研究.pdf

1、光皮樹(Swida wilsoniana)屬于山茱萸科株木屬，適應(yīng)性強(qiáng)，果實含油率高，是重要的生態(tài)經(jīng)濟(jì)型油料能源樹種。光皮樹油以不飽和脂肪酸為主，是制取優(yōu)質(zhì)生物柴油的理想原料。目前，光皮樹良種選育主要以自然變異和無性系選育為主，周期長，選育率低，嚴(yán)重制約了光皮樹良種化進(jìn)程。通過花藥培養(yǎng)獲得原生質(zhì)體，建立倍性育種體系，縮短育種周期，提高變異率，為選育大果粒、高含油、高產(chǎn)新品種實現(xiàn)光皮樹資源規(guī)?；_發(fā)與利用奠定了堅實的基礎(chǔ)。
　　

2、本試驗以6個光皮樹良種的花藥為外植體，通過單因子試驗設(shè)計，研究了基因型、花藥發(fā)育時期、碳源濃度、預(yù)處理時間及激素配比等因素對光皮樹花藥離體培養(yǎng)的影響，探討各影響因子對愈傷組織誘導(dǎo)形成、增殖及細(xì)胞特征的影響，闡述光皮樹花藥愈傷組織發(fā)生機(jī)理。以誘導(dǎo)出的光皮樹花藥愈傷組織為材料，研究愈傷組織形態(tài)結(jié)構(gòu)、酶液組合、酶解時間及滲透壓對原生質(zhì)體分離效果及活力的影響，初步建立光皮樹花藥愈傷組織原生質(zhì)體高效分離技術(shù)體系，為光皮樹多倍體育種及遺傳改良提供技

3、術(shù)和理論支撐。試驗研究結(jié)果如下：
　　 1、取材時間為5月上旬最佳，此時期花蕾為黃綠色，縱橫徑比在3.8左右，花瓣尚未張開，花藥為淡黃色，大部分小孢子處于單核期。花藥在4℃低溫預(yù)處理7～11d或32℃高溫預(yù)處理1d有利于提高愈傷組織誘導(dǎo)率。
　　 2、愈傷組織誘導(dǎo)的最佳體系：將花藥在0.1％HgCl2消毒5min，然后接種到MS+2，4-D1mg/L+TDZ0.5mg/L+3％蔗糖的培養(yǎng)基中，在28℃預(yù)培養(yǎng)1w，再轉(zhuǎn)入2

4、4℃進(jìn)行暗培養(yǎng)，有利于花藥誘導(dǎo)出愈傷組織。
　　 3、光皮樹花藥愈傷組織增殖最佳體系：MS+ZT1.5mg/L+NAA0.5mg/L為光皮樹花藥愈傷組織最佳增殖培養(yǎng)基。
　　 4、通過分析基因型、花藥發(fā)育時期、碳源濃度、預(yù)處理時間及激素配比等因素對光皮樹花藥離體培養(yǎng)的影響，其中花藥發(fā)育時期影響最大，其次是基因型，再次是激素配比。
　　 5、花藥愈傷組織原生質(zhì)體分離最佳體系：材料以淡黃綠色、疏松的愈傷組織最好，置于