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1、通過花藥離體培養(yǎng)技術(shù)開展植物單倍體育種工作是現(xiàn)代生物技術(shù)育種最有效的手段之一。通過離體培養(yǎng)誘導(dǎo)甜瓜花藥產(chǎn)生單倍性胚性愈傷組織,進(jìn)而誘導(dǎo)產(chǎn)生胚狀體和單倍體再生植株,能簡(jiǎn)化花藥培養(yǎng)的過程,加快單倍體育種的進(jìn)程。但目前對(duì)花藥離體培養(yǎng)的研究,多集中在十字花科和禾本科作物上,對(duì)甜瓜花藥胚狀體和胚性愈傷組織發(fā)生以及甜瓜花藥單倍體愈傷組織發(fā)生過程中的組織和生理生化變化機(jī)制的研究較少。論文通過對(duì)甜瓜花藥離體培養(yǎng)過程中單倍性胚性愈傷組織誘導(dǎo)率影響的研究,
2、從而篩選出最佳的激素組合。同時(shí),對(duì)單倍性胚性愈傷組織發(fā)育過程中的顯微結(jié)構(gòu)變化、POD活性、可溶性蛋白含量和特異性蛋白的變化情況進(jìn)行研究,主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下: 1、單倍體胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基的篩選。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明甜瓜花藥在MS+NAA1.0mg/L+KT1.0mg/L+6-BA0.2mg/L培養(yǎng)基上,溫度30℃,pH=5.8,蔗糖濃度40g/L,光照強(qiáng)度為20001x每天10小時(shí)的條件下,甜瓜花藥單倍體愈傷組織誘導(dǎo)效果最好,平
3、均愈傷組織誘導(dǎo)率在80%以上。 2、甜瓜花藥單倍體愈傷組織在MS+KT1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L+IAA0.5mg/L培養(yǎng)基上可以使甜瓜花藥愈傷組織通過非胚性途徑誘導(dǎo)出根和葉芽。 3、單倍體愈傷組織在MS+2,4-D0.4mg/L+KT1.0mg/L的培養(yǎng)基上,在培養(yǎng)溫度28℃,黑暗條件下可誘導(dǎo)出具有胚性細(xì)胞的甜瓜花藥胚性愈傷組織,培養(yǎng)40天后轉(zhuǎn)入到MS空白培養(yǎng)基上,28℃、黑暗條件下繼
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