西瓜花藥、子房和子葉離體培養(yǎng)影響因素的研究.pdf

1、西瓜屬于葫蘆科蔬菜作物，是重要的經(jīng)濟作物之一。長期以來，常規(guī)的遺傳育種的周期長、工作量大、遺傳性狀不穩(wěn)定以及栽培種遺傳基礎狹窄等因素極大的限制了西瓜一代雜種的育種進程。因此，如何提高優(yōu)良自交系的選育速度，并對優(yōu)良單株的保存和利用，成為西瓜一代雜種育種的關鍵。利用生物技術手段進行種質資源創(chuàng)新，可以加快培育和保存優(yōu)質、高產(chǎn)的新品種。
　　 本試驗采用6個不同基因型的西瓜自交系為材料，探討了西瓜花藥和未受精子房離體培養(yǎng)發(fā)育途徑和培養(yǎng)過

2、程中的各種影響因素，并對各種影響因素范圍進行限定，提高西瓜花藥和未受精子房愈傷組織的誘導率，為今后西瓜單倍體植株的研究奠定基礎：此外，研究了西瓜子葉離體培養(yǎng)的技術體系，為進一步完善離體培養(yǎng)再生體系和種質資源創(chuàng)新提供依據(jù)。主要結果如下：
　　 （1）西瓜花藥取材外形特征為：未開花，淺綠色，花蕾縱徑4.5-6.5mm，橫徑4.4-5.1mm，花瓣與花萼大致等長或稍長，花蕾明顯膨大，萼片張開。
　　 （2）在花藥誘導愈傷組織的

3、培養(yǎng)中，采用春季盛花期的花藥，在4℃預處理72h后，愈傷組織誘導率較高，而且愈傷組織生長迅速、質地緊密，有一定的分化潛力；以正交試驗篩選出2個誘導效果比較好的激素配方，分別為KT0.5mg/L+6-BA1.5 mg/L+NAA1.0 mg/L、KT1.5 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.5 mg/L，在此基礎上，發(fā)現(xiàn)本試驗的6個基因型的材料花藥愈傷組織誘導率有較大的差異，編號122最高，達80.34％；以添加30g/L蔗糖

4、和50g/L的葡萄糖效果較好，黑暗培養(yǎng)7天后可以提高愈傷組織誘導率。在愈傷組織增殖和分化培養(yǎng)中，以在MS+NAA1.0mg/L+6-BA0.25mg/L的培養(yǎng)基中愈傷組織增殖效果最好，嘗試調(diào)節(jié)6-BA和IAA的濃度比例仍未能誘導出不定芽。
　　 （3）在未受精子房誘導愈傷組織的培養(yǎng)中，以正交試驗篩選出2個誘導效果比較好的激素配方，分別為2，4-D1.5mg/L+NAA1.0 mg/L+6-BA0.25 mg/L、2，4-D1.0

5、 mg/L+NAA1.0 mg/L+6-BA1.0 mg/L；接種的適宜時期是開花當日，以添加40g/L的蔗糖效果較好，4℃的預處理72h亦能提高愈傷組織誘導率，基因型的差異與花藥誘導大致相同；添加活性炭對愈傷組織誘導率無明顯的影響。
　　 （4）在子葉離體培養(yǎng)中，篩選出MS+6-BA2mg/L為最佳培養(yǎng)基，并以子葉基部的誘導不定芽的效果較好，添加2mg/L的AgNO3能顯著提高每塊外植體的再生芽數(shù)，生根培養(yǎng)基為MS+IAA0.