產(chǎn)漆酶菌Fusarium solani MAS2對蒽和類固醇激素降解的研究.pdf

1、多環(huán)芳烴由于其具有毒性、致突變性和致癌性,易對環(huán)境和人類都具有很大的危害性。環(huán)境激素導(dǎo)致人類精子數(shù)目下降、損害動物生殖機能同時還導(dǎo)致睪丸癌和生殖系統(tǒng)腫瘤增加。雌激素及衍生物為主的類固醇激素是環(huán)境激素的一種,因此兩者引起了世界及越來越多科學(xué)工作者的關(guān)注。漆酶對多種污染底物具有降解作用,已有許多關(guān)于植物、細(xì)菌、白腐真菌產(chǎn)漆酶的研究,漆酶可用于降解多種多環(huán)芳烴和類固醇激素。鑒于用產(chǎn)漆酶的非白腐真菌降解蒽和類固醇激素較少被報道,本文以課題組保存

2、的FusariumsolaniMAS2為研究對象,探究其對多種的單環(huán)芳烴、類固醇激素和多環(huán)芳烴的降解能力,以及漆酶基因的克隆表達。主要結(jié)果如下:
　　1、菌株F.solaniMAS2能夠降解多種單環(huán)芳烴、多環(huán)芳烴和類固醇激素。菌株對蒽和類固醇激素有很好的降解效果,尤其是較難被降解的17β-乙炔基雌二醇(EE2)。
　　2、將單因素分析及響應(yīng)面試驗設(shè)計,應(yīng)用于降解蒽及產(chǎn)漆酶的的研究。在單因素試驗的基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)面分析法建立蒽

3、降解效率和產(chǎn)漆酶效率的二次多項數(shù)學(xué)模型,并驗證了模型的有效性。分析不同培養(yǎng)環(huán)境對降解蒽的影響,單因素試驗表明,在以下環(huán)境中降解蒽的效果較佳:蒽的初始濃度50mg/L、培養(yǎng)時間為30天、NaCl9g/L、pH7.5、(NH4)2SO41.5g/L、接種3個菌塊。為了確定產(chǎn)漆酶菌株最佳的發(fā)酵條件,通過Box-Behnken法設(shè)計了響應(yīng)面實驗對培養(yǎng)基中的溫度、pH和蒽的初始濃度進行了產(chǎn)漆酶優(yōu)化,獲得較佳的培養(yǎng)條件20℃、pH6.5and30m

4、gl-1,漆酶的產(chǎn)量比原來的(25℃,pH5.5and50mgl-1,0.52Umgprotein-1/4.11Uml-1)增加了38.9倍。
　　3、通過生物量、產(chǎn)酶量和降解率分析F.solaniMAS2降解四種類固醇激素的降解能力,同時對降解EE2的培養(yǎng)環(huán)境進行探究。單因素試驗表明,以下培養(yǎng)條件有較好的降解效果:NaCl24g/L、pH7.5、MgCl2·6H2O2.5g/L、(NH4)2SO42g/L、K2HPO4·3H2O