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1、本論文研究了杏鮑菇真菌(Pleurotus eryngii)固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)漆酶的工藝條件,比較幾種纖維廢料的發(fā)酵效果,發(fā)現(xiàn)適宜用秸稈作為基質(zhì),同時(shí)對(duì)工藝進(jìn)行優(yōu)化,獲得高效產(chǎn)酶條件:即一定量的微量元素液,0.5mmol/L的銅離子溶液,菌液最適接種量為10%,最適溫度25℃和最適pH6.0。在此模式下發(fā)酵10d,即能達(dá)到最大產(chǎn)酶高峰9875U/g。用該方法產(chǎn)漆酶,縮短了產(chǎn)酶周期,獲得了較高的產(chǎn)酶量。在固態(tài)發(fā)酵所得的酶曲中,除了漆酶,還檢測(cè)到了
2、CMC酶和木聚糖酶,說(shuō)明杏鮑菇除了可以降解木質(zhì)素外,還可以降解纖維素和半纖維素。采用固態(tài)發(fā)酵杏鮑菇產(chǎn)漆酶,能耗低,產(chǎn)酶活力高,同時(shí)利用農(nóng)業(yè)廢棄物為發(fā)酵原料,其經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益十分明顯。
同時(shí)對(duì)杏鮑菇漆酶的酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了研究,結(jié)果表明在30℃溫度下,漆酶活力最高,且能保持較長(zhǎng)時(shí)間,8h后仍維持80%左右;漆酶最佳pH為7,在pH7左右,漆酶穩(wěn)定性較好;不同的緩沖液對(duì)酶活也有影響,利用醋酸緩沖液作為漆酶酶活的緩沖液,測(cè)得的酶活最
3、高,磷酸緩沖液次之,碳酸緩沖液效果最差。在30℃、pH7.0的條件下配置不同濃度的HBT,作漆酶/HBT動(dòng)力學(xué)曲線,從而得到杏鮑菇漆酶對(duì)HBT的Km值為0.110mmol/L;在冰箱(4℃)中保存酶液,可以較好的保持酶的活性,儲(chǔ)藏20d后活性仍可保持80%以上。
杏鮑菇是一種白腐真菌,降解染料過(guò)程中起主要作用的是其胞外的木素氧化酶系,其中,木素過(guò)氧化物酶和錳過(guò)氧化物酶的催化反應(yīng)需要雙氧水存在時(shí)才能發(fā)揮作用,而漆酶則沒(méi)有這些條件
4、限制。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明漆酶可以直接對(duì)偶氮染料脫色,且對(duì)不同結(jié)構(gòu)的偶氮染料如單偶氮染料和雙偶氮染料,脫色效果差異明顯。從脫色結(jié)果來(lái)看,漆酶對(duì)單偶氮染料的脫色效果要優(yōu)于雙偶氮染料,可能是由于雙偶氮染料結(jié)構(gòu)含有兩個(gè)偶氮鍵,而偶氮鍵是穩(wěn)定結(jié)構(gòu),不易被降解,所以雙偶氮染料比單偶氮染料更難降解。還需要進(jìn)一步研究漆酶對(duì)其他偶氮染料的脫色效果,或者做產(chǎn)物分析來(lái)確定具體的原因。
漆酶/HBT系統(tǒng)的脫色效果普遍優(yōu)于漆酶直接脫色染料的效果,可能是因?yàn)?/p>
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