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文檔簡介
1、} Y9 6 8 0 9 6勢囊號: 望墅論文編號; 2 Q Q i Q i 篷2密綴:————賽搦大學2 0 0 6 麟碩士研究擻學位論文擬青霉H - 1 0 4 - 1 ( 砌裙洳“ 9 憾! ! 『掣.H - 1 0 4 一1 )產(chǎn)漆酶愛其對參蠡苯酚的i 駑解研究霉秘專建:研究方向:導 幫:研炎生:徽生翱應瀚真菌學粱寒璉數(shù)授趙 爵中湖- 貴州- 貴陽2 0 0 6 年8 男貴州土學2 0 0 6 屆碩士學位論文 擬青霉H - 1
2、0 4 - 1 產(chǎn)漆酶及其對4 - 氯苯酚的降解研究摘 要以從土壤中分離到的一株新的耐熱單瓶梗擬青霉P a e c i l o m y c e s s p .H - 1 0 4 —1 為試驗菌種( 以下略為“H .1 0 4 —1 ”) ,液體發(fā)酵擬青霉H .1 0 4 - l 產(chǎn)漆酶的最佳培養(yǎng)條件為:1 、3 0 0 m l 三角瓶裝量1 2 0 r a l 培養(yǎng)液中,接種量5 m l ( 2 .O ×1 0 5 孢予/m
3、1 ) :2 、初始p H 值6 .0 :3 、轉(zhuǎn)速1 2 0 r p m - 1 5 0 r p m :4 、培養(yǎng)溫度4 0 “ C 。在擬青霉H - 1 0 4 .1 的液體培養(yǎng)體系內(nèi)加入O .0 0 8 %T w e e n .8 0 表面活性劑,能將酶活提高到1 8 .6 3 U /L 。于培養(yǎng)基中分別添加0 .5 r a m 的愈創(chuàng)木酚、二苯胺和苯甲醇3 種化學物質(zhì),它們相應對H .1 0 4 .1 菌株漆酶的產(chǎn)生都有不同程度
4、的誘導作用。分別以不同載體固定化擬青霉H - 1 0 4 - 1 進行培養(yǎng),酶活提高不顯著,產(chǎn)酶周期無較大提前。但考察以活性炭固定化培養(yǎng)擬青霉H ·1 0 4 - I 產(chǎn)漆酶較單純液體培養(yǎng)產(chǎn)酶耐熱性有相應的提高。利用廉價的麩皮汁。通過響應面方法優(yōu)化擬青霉H .1 0 4 .1 產(chǎn)酶培養(yǎng)基,獲得擬臺的二次多項式模型:Y = 8 8 .3 6 .1 .3 9X l - 5 .5 5 X 3 .1 8 .7 8 X l2 1 2 +
5、 9 1 溺2 + 1 .5 0 X lX 3其中,x l 為麩皮汁.x 3 為草酸銨,該模型的確定系數(shù)達到9 3 %。確認以麩皮汁改良培養(yǎng)基配方后所能預期獲得的漆酶酶活可以達到8 9 .0 0 U /L ,是原來未經(jīng)改良的酶活的近6 倍。用擬青霉H .1 0 4 .1 菌株所產(chǎn)漆酶對4 .氯苯酚( 4 .C P ) 進行降解表明:l 、H .1 0 4 .1 漆酶降解4 - C P 的最適反應溫度為3 s ℃;2 、在酶用量一定的情況
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