克氏原螯蝦大顎器法尼酸甲基轉(zhuǎn)移酶的活力分析及眼柄因子的調(diào)控作用.pdf

1、甲殼動(dòng)物甲基法尼酯（Methyl farnesoate，MF）是一種類(lèi)似于昆蟲(chóng)保幼激素（JHⅢ）的類(lèi)倍半萜物質(zhì)，在化學(xué)結(jié)構(gòu)上僅比JHⅢ少一個(gè)環(huán)氧基團(tuán)，MF由大顎器（Mandibularorgan，MO）合成分泌，在甲殼動(dòng)物生長(zhǎng)、性腺發(fā)育、繁殖、蛻皮、變態(tài)、滲透壓調(diào)節(jié)等方面均發(fā)揮重要的生理作用。法尼酸甲基轉(zhuǎn)移酶（Farnesoic acid O-methyltransferase，F(xiàn)A-O-MeT）在腺苷甲硫氨酸（S-adenosyl m

2、ethionine，SAM）的參與下催化法尼酸（FA）向MF轉(zhuǎn)變，是MF生物合成途徑一個(gè)重要的限速酶，在MF合成中起到了至關(guān)重要的作用。甲殼動(dòng)物體內(nèi)的FA-O-MeT活性直接反映出MF合成及分泌水平，同時(shí)也間接的反映MF與機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育等生理過(guò)程的相互關(guān)系。
　　 本試驗(yàn)檢測(cè)了克氏原螯蝦在卵巢不同發(fā)育階段體長(zhǎng)、體重及卵巢的成熟情況，結(jié)果顯示克氏原螯蝦生長(zhǎng)發(fā)育可以分為兩個(gè)階段：在卵巢發(fā)育早期前機(jī)體主要處在生長(zhǎng)階段，體長(zhǎng)與體重增長(zhǎng)速度

3、較快；而當(dāng)卵黃發(fā)生之后，生長(zhǎng)基本停滯，卵巢發(fā)育增快，至成熟期性腺的成熟度可達(dá)3.53％。通過(guò)統(tǒng)計(jì)不同時(shí)期克氏原螯蝦體長(zhǎng)與體重平均值，得到兩者的關(guān)系式為W=0.0415×L3.1217（r2=0.9762）。
　　 同時(shí)利用放射化學(xué)測(cè)定法，測(cè)定克氏原螯蝦在不同發(fā)育階段、眼柄摘除處理（Eyestalk ablation，ESA）以及用竇腺（Sinus gland，SG）提取物處理等不同情況下，MO中FA-O-MeT的活性變化。結(jié)果表

4、明：（1）在卵巢不同發(fā)育階段FA-O-MeT活性呈現(xiàn)波動(dòng)變化趨勢(shì)，未發(fā)育期及發(fā)育早期酶活水平較低，卵黃發(fā)生期酶活增長(zhǎng)加快，至次級(jí)卵黃發(fā)生期達(dá)到一個(gè)高峰值，酶活力值為61.75pmol/p/h，但在產(chǎn)卵前酶活力值出現(xiàn)另一個(gè)高峰，產(chǎn)卵后酶活力急劇下降。推測(cè)FA-O-MeT與克氏原螯蝦卵巢發(fā)育及產(chǎn)卵行為有密切關(guān)系；（2）通過(guò)檢測(cè)三個(gè)發(fā)育時(shí)期的左右側(cè)MO中FA-O-MeT 活力值，得出克氏原螯蝦左右側(cè)MO中FA-O-MeT 活力無(wú)明顯差異；（3

5、）ESA 處理正?？耸显r，MO中FA-O-MeT活力急劇上升，在第5天達(dá)到最高值，5天后緩慢恢復(fù)。眼柄中具有調(diào)控MO活動(dòng)、抑制FA-O-MeT活力的物質(zhì)；（4）同時(shí)利用SG提取物處理正常及ESA后的克氏原螯蝦，可見(jiàn)SG提取物顯著抑制正常蝦MO中FA-O-MeT的活力，而1個(gè)當(dāng)量的SG提取物即可將ESA5天后FA-O-MeT活力值抑制到正常蝦水平，可見(jiàn)眼柄中SG對(duì)MO合成MF的能力起到了重要的抑制調(diào)控作用。
　　 綜上所述，克