根癌農桿菌介導產葉黃素小球藻遺傳轉化的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、　　葉黃素是一種含氧類胡蘿卜素，具有抗氧化活性，能夠預防癌癥、心血管疾病和年齡相關黃斑變性等疾病。小球藻中含有豐富的葉黃素，且具有生長速度快、可異養(yǎng)培養(yǎng)、易于進行規(guī)?；囵B(yǎng)和藻種改良的優(yōu)點，利用小球藻合成葉黃素越來越受人們的關注。
　　本研究以普通小球藻(Chlorella vulgaris)為轉化材料，建立了根癌農桿菌介導普通小球藻的遺傳轉化體系，分別將IPP異構酶基因(idi)、透明顫菌血紅蛋白基因(vgb)和葡萄糖轉運酶基

2、因(Glut1)轉入普通小球藻中。具體研究內容和結果如下：
　　1、成功構建了根癌農桿菌介導普通小球藻的遺傳轉化體系。利用根癌農桿菌介導的轉化方法，將pCAMBIA2301質粒的T-DNA區(qū)轉入普通小球藻，以G418抗性基因(NPTⅡ)作為篩選標記，篩選出陽性轉化子。PCR驗證結果表明NPTⅡ基因已經(jīng)整合到普通小球藻基因組中。RT-PCR驗證結果表明NPTⅡ基因在普通小球藻細胞成功轉錄。
　　2、成功介導IPP異構酶基因

3、(idi)轉化普通小球藻。利用根癌農桿菌介導的轉化方法，將idi基因轉入普通小球藻。結果表明大部分轉化子的生物量與野生型相似；轉化子的葉黃素含量與野生型相比提高了 30.95%；轉化子的葉黃素產量和野生型相比提高了36.77%。
　　3、成功介導透明顫菌血紅蛋白基因(vgb)轉化普通小球藻。利用根癌農桿菌介導的轉化方法，將vgb基因轉入普通小球藻。結果表明轉化子的生物量和野生型相比提高了 38.81%；葉黃素含量與野生型相比提高

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