食品中人工合成著色劑的測(cè)定

1、<p>　　食品中人工合成著色劑的測(cè)定</p><p>　　摘要：在日常試驗(yàn)用HPLC測(cè)定食品品中人工合成著色劑的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.35- 2003時(shí)，我們發(fā)現(xiàn)該方法測(cè)定高蛋白質(zhì)油脂等固態(tài)樣品的前處理方法以及梯度洗脫程序存在一定的不足，因此，對(duì)該方法的前處理以及梯度洗脫程序加以改進(jìn)，使得樣品前處理簡(jiǎn)便快捷，六種色素回收率均在90%以上，而且延長(zhǎng)了色譜柱的壽命。 </p><p

2、>　　關(guān)鍵詞：人工合成著色劑 HPLC 食品 前處理 </p><p>　　Through daily test with HPLC determination food products in the artificial synthesis colors agent of national standard GB/T5009.35-2003， we found law determination hig

3、h protein oil， solid samples of processing method and gradient wash program exists must of insufficient， therefore， on the method of processing and gradient wash program be improved， makes samples processing easy shortcu

4、t， six kind of pigment recovery are in 90% above， and extended the spectrum column of life </p><p>　　人工合成著色劑作為一種添加劑廣泛用于食品中，GB2760-2011對(duì)其使用有明確的限量標(biāo)準(zhǔn) ，但在市場(chǎng)上卻時(shí)有發(fā)現(xiàn)這些人工合成著色劑被濫用，如染色饅頭，所以對(duì)它的檢測(cè)監(jiān)管是相當(dāng)重要的，測(cè)定這些人工合成著色劑方法有

5、高效液相色譜法、薄層色譜法等[1] ，但無(wú)論哪一種方法都涉及樣品前處理。國(guó)標(biāo)法第一法是用HPLC測(cè)定合成著色劑，將食品中人工合成著色劑用聚酰胺吸附法制成水溶液，注入高效液相色譜儀，經(jīng)反相色譜分離，根據(jù)保留時(shí)間定性和峰面積比較進(jìn)行定量[1] 。在大量的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)遇到含有多量蛋白質(zhì)、脂肪等固體樣品，如鴨腳包，綠豆糕等，按國(guó)標(biāo)法測(cè)定色素提取困難，抽濾過(guò)程極慢 ，樣品回收率低，耗時(shí)長(zhǎng)不適合批量做樣。我們?cè)谠A(chǔ)上加以改進(jìn)，能較好地將樣品

6、中的著色劑吸附提取，從而大大地提高測(cè)定的準(zhǔn)確度和實(shí)驗(yàn)效率。 </p><p><b>　　1、材料與方法 </b></p><p>　　1.1 儀器與試劑 </p><p>　　島津高效液相色譜儀（LC20A）帶紫外檢測(cè)器（島津公司， 日本） ； </p><p>　　超聲波清洗器；GWA-UN3超純水系統(tǒng)。 </

7、p><p>　　乙腈（HPLC級(jí)） ；甲醇（分析純）；甲酸（分析純）；無(wú)水乙醇-氨水- 水（7 + 2 + 1） ；醋酸銨溶液（0.02 mol/L） ；標(biāo)準(zhǔn)工作液為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稀釋而成，實(shí)驗(yàn)用水為超純水。 </p><p>　　1.2 儀器工作條件 </p><p>　　色譜柱為Athena C18-WP 反相色譜柱（ 4.6mm ×250 mm，粒徑5μm

8、） ；流動(dòng)相采用0.02 mol/L 醋酸銨A ? 乙腈B； </p><p>　　流速1.0 ml/min； 進(jìn)樣量10μl； 柱溫40℃； 檢測(cè)波長(zhǎng)254nm。 </p><p>　　梯度洗脫： A： 95 B：5 保持5min，5～25min A： 95→60 B：5→40， 25～26min A： 60→95 B：40→5， 26～35min A： 95 B：5。 </p&g

9、t;<p><b>　　1.3 試樣處理 </b></p><p>　　稱(chēng)取10.0 g粉碎試樣，放于100 ml錐形瓶中，加50 ml無(wú)水乙醇- 氨水- 水[2]，超聲波提取5min，過(guò)濾，收集濾液，再向殘?jiān)屑?0ml無(wú)水乙醇- 氨水- 水超聲波提取5min，過(guò)濾，收集濾液。重復(fù)操作一次。將濾液合并揮干，加水20ml，按GB/T5009.35-2003 中5.2.1 處理。

10、 </p><p>　　1.4 標(biāo)準(zhǔn)系列和樣品的測(cè)定 </p><p>　　將檸檬黃、日落黃、莧菜紅、胭脂紅、誘惑紅、亮蘭各貯備液稀釋配制成標(biāo)準(zhǔn)混合液，混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度分別為：0.0098，0.0196，0.0284， 0.04， 0.05 mg/mL。上機(jī)測(cè)定，按保留時(shí)間定性，峰面積定量，以峰面積對(duì)濃度作圖，計(jì)算回歸方程，外標(biāo)法定量。 </p><p><

11、b>　　2、結(jié)果與討論 </b></p><p>　　2.1 無(wú)水乙醇- 氨水- 水的加入 </p><p>　　測(cè)定糕點(diǎn)，醬腌菜參照GB/T5009.35-2003的聚酰胺粉吸附法測(cè)定時(shí)，樣品的無(wú)法抽濾，有時(shí)以致實(shí)驗(yàn)無(wú)法進(jìn)行下去。測(cè)定鴨腳包等肉制品時(shí)，樣品中含有蛋白質(zhì)、脂肪，蛋白質(zhì)與聚酰胺粉競(jìng)爭(zhēng)吸附，造成回收率偏低。本法先加無(wú)水乙醇- 氨水- 水，人工合成著色劑在無(wú)水乙

12、醇- 氨水- 水體系中，成功解決了樣品無(wú)法抽濾以及回收率偏低問(wèn)題，而且加快了樣品的處理速度。 </p><p>　　2.2 流動(dòng)相的選擇 </p><p>　　本方法改進(jìn)了GB/T5009.35-2003的梯度洗脫程序，解決了由于流動(dòng)相緩沖液成分含量過(guò)高以致再大量進(jìn)樣后的柱壓過(guò)高的問(wèn)題，延長(zhǎng)了柱子的壽命，使用該流動(dòng)相回歸方程線(xiàn)性良好，各種參數(shù)的分離度均達(dá)到要求。 </p>&

13、lt;p>　　2.3加標(biāo)回收試驗(yàn) </p><p>　　加入高（0.04 mg/L） 、低（0.0098 mg/L）含量標(biāo)準(zhǔn)，加入桃酥樣品中，按本法測(cè)定，計(jì)算回收率在90% ～95% 之間，符合方法學(xué)要求。 </p><p><b>　　3、小結(jié) </b></p><p>　　采用本方法對(duì)實(shí)際糕點(diǎn)樣品進(jìn)行測(cè)定，前處理效率高，方法穩(wěn)定，回收

14、率良好，適用于批量完成食品中人工合成色素測(cè)定。 </p><p><b>　　參考文獻(xiàn)： </b></p><p>　　[ 1 ] GB /T5009. 35 ? 2003.食品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法理化部分（一） </p><p>　　[ 2 ] 歐陽(yáng)燕玲，陳玲，謝維平. 肉制品中人工合成著色劑測(cè)定前處理方法的研究 [J ] .中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志 ， 2