臨床生化檢驗(yàn)基本知識(shí)

1、1,第二章 　臨床生化檢驗(yàn)基本知識(shí),,,2,教 學(xué) 目 標(biāo),1、了解生化檢驗(yàn)報(bào)告單的申請(qǐng)和報(bào)告方式，2、說出生化檢驗(yàn)工作流程，3、簡(jiǎn)述生化檢驗(yàn)質(zhì)量管理要素，4、說出影響標(biāo)本采集的生物學(xué)因素有哪些？5、熟練敘述標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)。,3,第一節(jié) 臨床生化檢驗(yàn)的申請(qǐng)方式與報(bào)告,一、單項(xiàng)檢驗(yàn)與組合檢驗(yàn),4,,單項(xiàng)血糖測(cè)定指導(dǎo)胰島素用量,,不同時(shí)段血中孕酮測(cè)定了解是否排卵,評(píng)價(jià)早期妊娠,,,,,(一)單項(xiàng)檢驗(yàn),測(cè)定24小時(shí)尿蛋白或電

2、解質(zhì)含量發(fā)解排出量,5,(二) 組 合 檢 驗(yàn),6,肝功八項(xiàng):丙氨酸轉(zhuǎn)移酶（ALT）門冬氨酸轉(zhuǎn)移酶（AST）總蛋白白蛋白球蛋白白球比總膽汁酸（TBA）膽堿酯酶（CHE）,7,8,二、報(bào)告單發(fā)放形式,9,第二節(jié) 臨床生化檢驗(yàn)質(zhì)量管理要素,一、臨床生化檢驗(yàn)流程,檢驗(yàn)前階段,檢驗(yàn)中階段,檢驗(yàn)后階段,,,,標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室前的階段：包括；醫(yī)生申請(qǐng)、患者準(zhǔn)備、標(biāo)本采集、標(biāo)本運(yùn)送與收檢,標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室到報(bào)告發(fā)出前的階段：檢驗(yàn)人員完成

3、,報(bào)告發(fā)放及發(fā)放后的工作,對(duì)以上三個(gè)階段的質(zhì)量控制稱：全面質(zhì)量控制,10,二、檢驗(yàn)前質(zhì)量管理要素,包括醫(yī)生申請(qǐng)、患者準(zhǔn)備、標(biāo)本采集、標(biāo)本運(yùn)送與收檢五個(gè)環(huán)節(jié)。由臨床醫(yī)、護(hù)人員完成，檢驗(yàn)前的差占到總差錯(cuò)的60%以上。,11,（一）醫(yī) 生 申 請(qǐng),主要是合理的選擇項(xiàng)目。主要應(yīng)考慮4個(gè)要素：1.針對(duì)性2.敏感性和特異性3.報(bào)告時(shí)間4.經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),12,影響檢驗(yàn)結(jié)果的生物學(xué)因素,（二）患 者 準(zhǔn) 備,1.避免劇烈運(yùn)動(dòng)：運(yùn)動(dòng)可使血清中多種酶

4、活性增高，ALT在2 h最先增高，CK在11小時(shí)達(dá)到峰值,最高可達(dá)7000 U/L（正常值10～180 U/L）,持續(xù)60h后才恢復(fù)正常，AST在5h增加41%。運(yùn)動(dòng)也常導(dǎo)致血鉀、鈉、鈣、堿性磷酸酶、白蛋白、糖、磷、尿酸、尿素、膽紅素、轉(zhuǎn)氨酶等升高1倍以上,磷酸肌酸激酶升高4倍。,13,2.年齡:人在不同的年齡階段，其生理指標(biāo)是不同的。新生兒紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白含量比成人高很多，乳酸脫氫酶(LD)、蘋果酸脫氫酶(MD)、異檸檬酸脫氫酶(

5、ICD)高于成人2～3倍。血液中堿性磷酸酶含量提示成骨細(xì)胞活性，在青春期會(huì)達(dá)到一個(gè)高峰，活性從500 U/L左右升到750 U/L左右，18歲以后逐漸降到200 U/L以下。,14,3.性別:男性肌肉發(fā)達(dá)，體重高，多數(shù)指標(biāo)都比女性高,如轉(zhuǎn)氨酶、膽紅素、肌酸、尿酸、總蛋白、白蛋白、膽固醇、甘油三酯等。女性比男性高的有高密度脂蛋白-膽固醇、銅和網(wǎng)織紅細(xì)胞等。,15,4.妊娠: 6～8周開始血容量約增加30%～45%,平均增加1 500 ml

6、,由于血液稀釋紅細(xì)胞和血紅蛋白均下降。白細(xì)胞比較高,嗜中性粒細(xì)胞增加。妊娠期血液處于高凝狀態(tài)，凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ增加，僅Ⅺ、ⅩⅡ降低，纖維蛋白原含量增加40%～50%，血沉可高達(dá)100 mm/h。 妊娠常引起甲狀腺素、脂類、銅、血糖含量升高,總蛋白、白蛋白、鐵、轉(zhuǎn)鐵蛋白減少。,16,5、飲食和藥物的影響：（1）禁食各種煙、酒、飲料，（2）藥物影響被測(cè)物濃度、影響檢驗(yàn)方法，新藥不斷應(yīng)用，藥物的影響不確定因素較多。除了急

7、診或其它特殊原因外，一般主張空腹12小時(shí)以后取血。,17,18,胸腔、腹腔、心包膜,腰椎、小腦延髓池、嬰兒時(shí)期的前囟門作側(cè)腦室穿刺,（三）標(biāo) 本 采 集,標(biāo)本：血液、尿液、腦脊液、胸水、腹水、漿膜腔積液等,滲出液、漏出液,19,1、血液標(biāo)本的采集,血液標(biāo)本來源,毛細(xì)血管血：手指或耳垂，用于需血量少的檢驗(yàn)，也主要用于兒童。,靜脈血：是最常用的標(biāo)本，靜脈穿刺是最常用的采血方法,動(dòng)脈血：血?dú)夥治龆嗍褂?（Ｐ０２，ＰＣＯ２，pＨ

8、）,,（動(dòng)脈化毛細(xì)血管血）,20,,采血方法：,（1）靜脈采血法,①步驟（普通采血法）,核對(duì)　　容器準(zhǔn)備　　病人準(zhǔn)備體位　　　前臂肘窩正中靜脈采血　　　取針頭，將血液沿管壁緩慢注入容器。,,,,（靜脈采血一般用肘部靜脈，當(dāng)肘部靜脈不明顯時(shí)，可采用手背靜脈、手腕靜脈及踝部靜脈。如還是無法將血采出時(shí)可選用股靜脈。嬰幼兒有時(shí)采取頸靜脈采血）,,,扎止血帶常規(guī)消毒,,,l 5度一30度角,,21,② 注 意 事 項(xiàng),防止溶血,ⅰ抽血器和容器

9、必須干燥潔凈，因?yàn)榧t細(xì)胞遇水即會(huì)溶血，應(yīng)盡量使用一次性抽血器。 ⅱ不用或短時(shí)間使用止血帶，忌長(zhǎng)時(shí)間壓迫血管。 ⅲ抽血后取下針頭再將血液沿容器壁徐徐注入容器內(nèi)，切勿用力過猛。 ⅳ若需血漿可用抗凝管作容器，應(yīng)輕輕倒轉(zhuǎn)容器與抗凝劑混勻，切勿用力振搖。,22,ⅴ 避免充血和血液濃縮ⅵ 若病人正在進(jìn)行靜脈輸液，不宜在輸液同側(cè)手臂采血；若女性病人做了乳腺切除術(shù)，應(yīng)在手術(shù)對(duì)側(cè)手臂采血ⅶ 采血的體位ⅷ 采血時(shí)只能向外抽，決不能向靜脈內(nèi)推，以

10、免注人空氣，形成氣栓而造成嚴(yán)重后果。ⅸ 暈血處理,,23,（2）動(dòng)脈采血法,①部 位：,肱動(dòng)脈、股動(dòng)脈、橈動(dòng)脈以及其它任何部位的動(dòng)脈都可以作為采血點(diǎn)，但多選擇肱動(dòng)脈和橈動(dòng)脈,②步 驟：,觸摸　消毒　固定　針頭成60°角穿刺　血液自動(dòng)注入容器,,,,,24,（3）真空采血法(已普遍采用）,優(yōu)點(diǎn):1、在完全封閉狀態(tài)下采血,避免血液外溢,有利保存。 2、標(biāo)準(zhǔn)真空采血管采用國際通用的頭蓋和標(biāo)簽顏色顯示采血管內(nèi)添加劑種類和

11、試驗(yàn)用途?？筛鶕?jù)需要選擇相應(yīng)的盛血試管,25,血清生化、血庫試驗(yàn),快速血清分離生化免疫 惰性膠體+促凝劑,全血血液血常規(guī)試驗(yàn) K2EDTA 或K3EDTA,血漿凝血試驗(yàn) PT，TT， 凝血因子試驗(yàn) 枸櫞酸鈉,全血血細(xì)胞沉降率試驗(yàn)枸櫞酸鈉,血清葡萄糖試驗(yàn) 氟化鈉+草酸鉀,26,普通血清管  紅色頭蓋，采血管內(nèi)不含添加劑，用于常規(guī)血清生化、血庫和血清學(xué)相關(guān)檢驗(yàn)。,27,快速血清管  橘紅色頭蓋，采血管內(nèi)有

12、促凝劑，可激活纖維蛋白酶，使可溶性纖維蛋白變?yōu)椴豢扇艿睦w維蛋白多聚體，進(jìn)而形成穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊?？焖傺骞芸稍?#160;5 分鐘內(nèi)使采集的血液凝固，適用于急診血清生化試驗(yàn)。,28,惰性分離膠促凝管  金黃頭蓋，采血管內(nèi)添加有惰性分離膠和促凝劑。標(biāo)本離心后，惰性分離膠能夠?qū)⒀褐械囊后w成分（血清或血漿） 和固體成分（紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板、纖維蛋白等） 徹底分開并完全積聚在試管中央而形成屏障，

13、標(biāo)本在 48 小時(shí)內(nèi)保持穩(wěn)定。促凝劑可快速激活凝血機(jī)制，加速凝血過程，適用于急診血清生化試驗(yàn)。,29,肝素抗凝管  　　綠色頭蓋，采血管內(nèi)添加肝素。具有抗凝血酶的作用，可延長(zhǎng)標(biāo)本凝血時(shí)間。適用于紅細(xì)胞脆性試驗(yàn)、血?dú)夥治?、紅細(xì)胞壓積試驗(yàn)、血沉及普通生化測(cè)定，不適于做血凝試驗(yàn)。過量的肝素會(huì)引起白細(xì)胞的聚集，不能用于白細(xì)胞計(jì)數(shù)。因其可使血片染色后背景呈淡藍(lán)色，故也不適于白細(xì)胞分類。,30,血漿分離管 

14、; 淺綠色頭蓋，在惰性分離膠管內(nèi)加入肝素鋰抗凝劑，可達(dá)到快速分離血漿的目的，是電解質(zhì)檢測(cè)的最佳選擇，也可用于常規(guī)血漿生化測(cè)定和 IC U 等急診血漿生化檢測(cè)。血漿標(biāo)本可直接上機(jī)并在冷藏狀態(tài)下保持 48 小時(shí)穩(wěn)定。,31,E DT A 抗凝管  紫色頭蓋，乙二胺四乙酸（ E DT A ） 可螯合血

15、液標(biāo)本中的鈣離子。防止血液標(biāo)本凝固。適用于一般血液學(xué)檢驗(yàn)，不適用于凝血試驗(yàn)及血小板功能檢查，亦不適用于鈣離子、鉀離子、鈉離子、鐵離子、堿性磷酸酶、肌酸激酶和亮氨酸氨基肽酶的測(cè)定及 PCR 試驗(yàn)。,32,枸櫞酸鈉凝血試驗(yàn)管  淺藍(lán)頭蓋，枸櫞酸鈉主要通過與血樣中鈣離子螯合而起抗凝作用。適用于凝血實(shí)驗(yàn)，抗凝劑與血液的比例是 1 ∶ 9 。,33,枸櫞酸鈉血沉試驗(yàn)管

16、60; 黑色頭蓋，血沉試驗(yàn)要求的構(gòu)櫞酸鈉濃度是 3 .2 ％ （相當(dāng)于 0 .109 mol ／ L ），抗凝劑與血液的比例為 1 ∶ 4 。,34,35,3、尿液標(biāo)本的采集,尿液標(biāo)本分類,,隨機(jī)新鮮尿定時(shí)尿24小時(shí)尿晨尿餐后2小時(shí)尿其它包括中段尿、導(dǎo)尿、恥骨上膀胱穿刺尿,,8-20,3

17、h尿,注意事項(xiàng)：1、容器清潔干燥 2、避免污染 3、及時(shí)送檢和防腐保存。,36,4、特殊標(biāo)本的采集（醫(yī)生采集）,（1）腦脊液的采集： 腦脊液正常和病變形狀：顏色、透明度、細(xì)胞化學(xué)成分采集部位：腰椎、小腦延髓池、嬰兒時(shí)期的前囟門作側(cè)腦室穿刺收集方法：收集于三支無菌試管中，第l管作細(xì)菌檢查，第2管作生化檢查，第3管作細(xì)胞計(jì)數(shù)。,（2）漿膜腔積液的采集：胸腔、腹腔、心包膜,（3）羊水的采集：產(chǎn)前診斷,37,（

18、四）標(biāo)本運(yùn)送與收檢,1、拒收標(biāo)本條件：① 標(biāo)志脫落、不清或錯(cuò)誤② 標(biāo)本容器使用錯(cuò)誤③ 標(biāo)本含量不合要求④ 抗凝的血液中有凝塊或用錯(cuò)抗凝劑⑤ 要求與空氣隔絕的標(biāo)本未能與空氣隔絕⑥ 標(biāo)本采集與送檢之間時(shí)間過長(zhǎng)⑦ 嚴(yán)重違反標(biāo)本采集規(guī)程,38,2、其它要求：（1）對(duì)可能影響結(jié)果的標(biāo)本可在報(bào)告單上注明，（2）履行交接簽字手續(xù)，（3）避免高溫、冷凍，（4）避免外溢及污染,39,三、檢驗(yàn)中的質(zhì)量管理要素 在第十九章一起講