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1、久效磷農(nóng)藥是一種高水溶性的有機(jī)磷農(nóng)藥,能夠誘導(dǎo)雄性金魚(yú)卵黃原蛋白的產(chǎn)生,具有環(huán)境雌激素活性,對(duì)水生生物和人類(lèi)健康具有潛在的威脅。關(guān)于久效磷的毒性效應(yīng)研究很多,久效磷能夠引起魚(yú)類(lèi)生理生化過(guò)程和生殖方面的損傷,但關(guān)于久效磷對(duì)魚(yú)類(lèi)性征的影響還少見(jiàn)報(bào)道??兹隔~(yú)是卵胎生魚(yú)類(lèi),便于實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng),繁殖周期短,精子數(shù)、體色、交配器、求偶行為和繁殖不受季節(jié)的限制,對(duì)環(huán)境化合物的反應(yīng)敏感,適合作為毒理學(xué)研究的模式動(dòng)物。因此,本文選用孔雀魚(yú)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,用0.0
2、1、0.10和1.00mg/L久效磷暴露孔雀魚(yú)90天,研究了久效磷在孔雀魚(yú)幼魚(yú)性別發(fā)育過(guò)程中對(duì)其第一性征和第二性征的影響,并初步探討了產(chǎn)生這種影響的機(jī)理。為進(jìn)一步了解久效磷農(nóng)藥的環(huán)境雌激素效應(yīng)提供基礎(chǔ)資料和理論依據(jù)。本文研究結(jié)果表明: (1)0.01、0.10和1.00 mg/L,久效磷暴露孔雀魚(yú)90天后,采用金魚(yú)VTG多克隆抗血清用Western-blot方法檢測(cè),結(jié)果表明久效磷能夠誘導(dǎo)雄性孔雀魚(yú)產(chǎn)生VTG,該VTG具有2個(gè)蛋
3、白亞基,亞基分子量分別為152kDa和135kDa,進(jìn)一步證明了久效磷的環(huán)境雌激素效應(yīng)。 (2)久效磷對(duì)孔雀魚(yú)第一性征的影響顯著。久效磷暴露孔雀魚(yú)90天,雄魚(yú)和雌魚(yú)性腺發(fā)育受到抑制,0.10和1.00mg/L組性腺指數(shù)都顯著下降;對(duì)照組和0.01、0.10和1.00mg/L久效磷暴露組雄魚(yú)交配器長(zhǎng)度為0.518±0.036、0.475±0.030、0.471±0.029、0.476±0.033cm,精子數(shù)分別為3.43±0.94
4、、2.57±0.68、2.06±0.43、2.00±0.49百萬(wàn)個(gè),交配器長(zhǎng)度和精子數(shù)均顯著降低;久效磷暴露組雌魚(yú)成熟卵細(xì)胞數(shù)目也顯著減少,久效磷還造成胚胎的發(fā)育畸形,導(dǎo)致雌魚(yú)產(chǎn)仔數(shù)和仔魚(yú)成活率的下降。隨久效磷暴露濃度的升高雄魚(yú)性腺睪酮含量逐漸降低,17B-雌二醇含量逐漸升高。本文研究認(rèn)為,可能是孔雀魚(yú)體內(nèi)性激素水平的變化導(dǎo)致了孔雀魚(yú)第一性征的變化。 (3)0.01和1.00mg/L久效磷造成孔雀魚(yú)第二性征的弱化。雄魚(yú)皮膚中類(lèi)胡
5、蘿卜素含量在0.10mg/L久效磷暴露時(shí)顯著降低,在1.00mg/L久效磷暴露時(shí)極顯著降低;類(lèi)胡蘿卜素含量的降低導(dǎo)致雄魚(yú)皮膚顏色比例下降,對(duì)照組、0.01、0.10、1.00 mg/L久效磷暴露組的顏色比例分別為33.65±0.05%、30.74±0.05%、28.12±0.04%、26.00±0.05%,0.10mg/L暴露組顯著降低,1.00mg/L暴露組極顯著降低。雄魚(yú)皮膚黑色素含量降低而酪氨酸酶活性沒(méi)有發(fā)生顯著變化。電鏡結(jié)果顯示
6、,黑色素細(xì)胞退化,色素顆粒顯著減少,出現(xiàn)低密度區(qū)域,大部分色素顆粒外膜溶解,不同區(qū)域出現(xiàn)色素顆粒溶解現(xiàn)象;虹彩細(xì)胞膜部分溶解,反射小板數(shù)量減少,結(jié)構(gòu)上部分小板有不同程度水腫并伴隨一定程度溶解,小板板層變薄,片層間隙不規(guī)則,有的小板間隙閉合。因此,本文研究認(rèn)為久效磷對(duì)魚(yú)體內(nèi)性激素的變化、皮膚類(lèi)胡蘿卜素含量的降低和皮膚結(jié)構(gòu)的破壞導(dǎo)致雄魚(yú)體色的黯淡和橙色區(qū)域面積減小,造成第二性征的雌性化。 綜上所述,本文在細(xì)胞水平、器官水平、個(gè)體水平
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