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文檔簡(jiǎn)介
1、本文研究了五個(gè)Cd2+濃度(分別為7.25、14.5、29、58和116 mg/L)在四個(gè)時(shí)間段(24、48、72和96h)對(duì)華溪蟹(Sinopotamon)肝胰腺組織細(xì)胞線粒體抗氧化酶—超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPX)的活力及抗氧化劑—谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;線粒體呼吸鏈的自由基代謝,包括抗超氧陰離子(O2·-)和抑制羥自由基(·OH)產(chǎn)生能力、過(guò)氧化氫(H2O2)和一氧化
2、氮(NO)含量及一氧化氮合成酶(NOS)活力;呼吸鏈上與電子傳遞和能量生成有關(guān)的酶—還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶(NADH氧化酶)、琥珀酸脫氫酶(SDH)、細(xì)胞色素c氧化酶(COX)活力的影響,旨在探明鎘對(duì)線粒體抗氧化系統(tǒng)與能量代謝的毒性機(jī)理機(jī)制,為漁業(yè)的健康養(yǎng)殖、食品安全提供必要的科學(xué)依據(jù)。結(jié)果顯示:
(1)低濃度鎘可以顯著誘導(dǎo)SOD、CAT、GPX活力及GSH含量的升高,且SOD在48h、29mg/L,CAT在72h、
3、14.5mg/L,GPX在48h、7.25mg/L,GSH在72h、58mg/L時(shí)分別升至最高,較對(duì)照組相比差異極顯著。隨著鎘濃度增加和處理時(shí)間的延長(zhǎng),酶的活性或GSH含量開(kāi)始呈現(xiàn)下降趨勢(shì),其中SOD在96h被直接抑制,且在58mg/L濃度降至最低,較對(duì)照組差異極顯著,GPX的活性變化與SOD類(lèi)似;CAT活性在24、72和96h的最高濃度組(116mg/L)穩(wěn)定在正常水平,較對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異。GSH含量的變化與CAT類(lèi)似。然而,線
4、粒體MDA含量在整個(gè)染毒期間不斷增多,在各時(shí)間段的29mg/L濃度組已明顯高于對(duì)照組水平,且在第96h、116mg/L時(shí)達(dá)到最大值,較對(duì)照組差異極顯著。
(2)在同一時(shí)間隨Cd2+濃度的增加或者在同一濃度隨時(shí)間的延長(zhǎng),線粒體抗O2·-能力、抑制·OH產(chǎn)生能力逐漸降低,與之相反,H2O2含量呈現(xiàn)逐漸增高趨勢(shì),且均在96h、116mg/L達(dá)到峰值,較對(duì)照組差異極顯著;線粒體NO含量和NOS活力的變化趨于一致,即低濃度Cd2+可以顯
5、著誘導(dǎo)NO含量和NOS活力的升高,且均在72h、29mg/L時(shí)升至最高,較對(duì)照組相比差異極顯著。隨著Cd2+濃度的增加和處理時(shí)間的延長(zhǎng),NO含量或NOS活力開(kāi)始下降,且均在第96h、116mg/L時(shí)達(dá)到最大值,較對(duì)照組差異極顯著。
(3)當(dāng)處理時(shí)間為48h,線粒體NADH氧化酶、SDH活力均隨著Cd2+濃度的增加先升后降,COX活力則被直接抑制。NADH氧化酶、SDH活力在濃度為14.5mg/L達(dá)到最大值,NADH氧化酶、CO
6、X活力在濃度為116mg/L達(dá)到最小值,且均與對(duì)照組相比出現(xiàn)極顯著差異;96h,除了SDH活力在低濃度Cd2+作用下被誘導(dǎo)并在濃度為14.5mg/L時(shí)升至最高外,NADH氧化酶及COX活力均被直接抑制,且均在116mg/L時(shí)降至最低,較對(duì)照組差異極顯著。
結(jié)論:
(1)經(jīng)鎘處理后,華溪蟹線粒體內(nèi)主要抗氧化酶、抗氧化劑及脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA,電子傳遞鏈上由于電子遺漏而產(chǎn)生的各種自由基的含量及NOS活力均受到影響,表明線
7、粒體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)已經(jīng)遭受破壞,自由基代謝發(fā)生紊亂,自由基蓄積必將導(dǎo)致線粒體結(jié)構(gòu)和功能的改變。
(2)與三磷酸腺苷(ATP)形成有關(guān)的呼吸鏈復(fù)合物酶活力在鎘暴露后也受到明顯抑制,且時(shí)間和濃度效應(yīng)關(guān)系顯著。由此可以推測(cè)線粒體電子傳遞和氧化磷酸化過(guò)程受到阻礙,能量合成受阻勢(shì)必會(huì)引起組織細(xì)胞由于供能不足而受損。
(3)線粒體作為重金屬毒性作用的靶標(biāo),其抗氧化系統(tǒng)及能量代謝的各種指標(biāo)敏感改變表明,線粒體生理生化性質(zhì)已經(jīng)受到鎘脅
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