甲烷利用菌的研究及熒光法表征.pdf

1、第一章:概述了甲烷利用菌的概念及其分類，闡明了單加氧酶的作用機理，較為詳細地綜述了國內(nèi)外甲烷利用菌的研究進展，并對其發(fā)展趨勢進行了展望。
　　第二章:以假單胞菌ME16和克雷伯氏菌ME17為模型菌株，為增強這兩種菌株利用甲烷的能力，采用比濁法考察了影響其生長的主要因素，包括:培養(yǎng)溫度、接種量、甲烷含量和培養(yǎng)基pH值。實驗過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)溫度、接種量和甲烷含量三因素對以上兩菌株生長能力的影響比較顯著，在此基礎(chǔ)上，利用響應(yīng)曲面實驗設(shè)計(

2、Response Surface Methodology，RSM)確定了兩菌株的最佳培養(yǎng)條件。結(jié)果表明，假單胞菌ME16的最佳培養(yǎng)條件為:溫度25.0℃，接種量2.00％，甲烷含量為10.0％;克雷伯氏菌ME17:溫度22.5℃，接種量9.85％，甲烷含量24.5％。第三章:針對微生物學(xué)鑒別和表征細菌的復(fù)雜性，提出了基于內(nèi)源熒光法鑒別和表征細菌的新方法。本文用二維熒光法考察了甲基桿菌，假單胞菌和克雷伯氏菌中氨基酸的峰位和強度。由于細菌是

3、復(fù)雜的微生物體系，用二維熒光法考察細菌的內(nèi)源物質(zhì)有可能會有譜峰的重疊，在此基礎(chǔ)上采用三維熒光指紋圖譜全面地考察了三種菌內(nèi)部的物質(zhì)組成，并利用熒光法與化學(xué)計量學(xué)主成分分析(PCA)法相結(jié)合更深入地探討了三種菌的鑒別和表征。結(jié)果表明，在250nm激發(fā)下，氨基酸在340和450nm處有不同的熒光強度;甲基桿菌和克雷伯氏菌在ex:335nm，em:410nm處顯示出相同的指紋，但兩處指紋的熒光強度有較大差異，而假單胞菌在ex:335nm，em:

4、412nm和ex:400nm，em:465nm兩處顯示出指紋圖譜，據(jù)此可將三種菌進行初步的鑒定。
　　第四章:微生物生長繁殖和產(chǎn)物合成中需要無機鹽和微量元素作為其生理物質(zhì)的組成或生理活性的調(diào)節(jié)物。隨著金屬離子的增加，菌體自身的內(nèi)源熒光物質(zhì)會發(fā)生相應(yīng)的變化?；诖吮疚目疾炝藘煞N堿金屬離子Ca2+和Mg2+、一種堿土金屬離子Al3+和六種過渡金屬離子Fe3+，F(xiàn)e2+，Mn2+，Ni2+，Zn2+，Cu2+對甲基桿菌菌株ME25生長代

5、謝及合成色氨酸的影響，在此基礎(chǔ)上進一步考察了影響顯著的Fe3+，Ca2+，Ni2+對ME25的具體作用，并用正交實驗設(shè)計探索了這三種離子對ME25的復(fù)合作用。結(jié)果表明:9種金屬離子對甲基桿菌菌株ME25的促進作用為:Ni2+＞Fe2+＞Fe3+≈Ca2+＞Al3+＞Cu2+＞Mg2+≈Mn2+≈Zn2+。當Fe3+濃度為6mmol/L和5mmol/L時可分別促進ME25的生長和合成內(nèi)源熒光物質(zhì)色氨酸;當Ca2+濃度為1mmol/L和2m