lm臨床班血液分析儀及其臨床應(yīng)用

1、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 紅細(xì)胞沉降率測(cè)定血液分析儀及其臨床應(yīng)用,第二章 血液一般檢驗(yàn)（三） BLOOD ROUTINE TEST,武漢科技大學(xué)天佑醫(yī)院檢驗(yàn)科李 明,,網(wǎng)織紅細(xì)胞(reticulocyte，Ret)是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟紅細(xì)胞間的過(guò)渡細(xì)胞，晚幼紅脫核后，胞質(zhì)內(nèi)含有殘存的RNA/DNA等嗜堿性物質(zhì)，在煌焦油藍(lán)或新亞甲藍(lán)活體染色時(shí)，呈現(xiàn)出淺藍(lán)或深藍(lán)色網(wǎng)織狀。 屬于尚未完全成熟的紅細(xì)胞(當(dāng)嗜堿性物質(zhì)消耗殆盡后才

2、被視為成熟紅細(xì)胞)，一般為8～9.5μm。,網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù),,【質(zhì)量保證】 以手工計(jì)數(shù)法為重點(diǎn)。 1．染料選擇,【質(zhì)量保證】 2．正確辨認(rèn)網(wǎng)織紅細(xì)胞 外周血中網(wǎng)織紅細(xì)胞主要為Ⅳ型，凡含有2個(gè)以上網(wǎng)織顆粒的紅細(xì)胞均應(yīng)計(jì)為網(wǎng)織紅細(xì)胞。 3．網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法 (1)Miller窺盤(pán)： (2)顯微成像系統(tǒng)：計(jì)算機(jī)和細(xì)胞形態(tài)分析軟件， ①HFR：粗顆粒堆積成網(wǎng)狀。 ②MFR：粗顆粒在10個(gè)以上，或細(xì)小顆粒超過(guò)

3、15個(gè)。 ③LFR：細(xì)胞內(nèi)含15個(gè)以下細(xì)小顆粒,①網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)： 成人和兒童:0.005～0.015 新生兒: 0.02～0.06②網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)數(shù)： 成人和兒童: (24～84)X109／L,參考值,臨床意義,1．評(píng)價(jià)骨髓增生能力，判斷貧血類型。 (1)網(wǎng)織紅細(xì)胞增多：表示骨髓造血功能旺盛，各種增生性貧血（HA、IDA及巨幼貧）及失血性貧血；某些貧血治療的恢復(fù)期明顯增多，如IDA補(bǔ)充鐵劑后。

4、 (2)網(wǎng)織紅細(xì)胞減少：常見(jiàn)于再生障礙性貧血(AA) (3)鑒別貧血：,臨床意義,2．評(píng)價(jià)療效 (1)觀察貧血療效：貧血隨訪 缺鐵貧或巨幼貧有效治療后，2～3d后Ret開(kāi)始上升，7～10d達(dá)到最高峰(約10％)，2周后漸降至正常。 (2)骨髓移植后監(jiān)測(cè)骨髓造血恢復(fù)： 骨髓移植后第21天，如Ret大于15X109／L，常表示無(wú)移植并發(fā)癥； 若骨髓開(kāi)始恢復(fù)造血功能，首先HFR和MFR上升，其次為網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)值上升

5、。,臨床意義,3．放療和化療的監(jiān)測(cè) 指導(dǎo)臨床適時(shí)調(diào)整治療方案，避免造成嚴(yán)重的骨髓抑制。機(jī)體接受放、化療后，如出現(xiàn)骨髓抑制，早期HFR和MFR降低，而后網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)值降低；停止放、化療，骨髓功能恢復(fù)后，這些指標(biāo)依次上升。,,臨床意義,紅細(xì)胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate，ESR)簡(jiǎn)稱血沉，指在規(guī)定條件下，離體抗凝全血中的紅細(xì)胞自然下沉的速率。 血沉過(guò)程一般分為3期：①緡錢(qián)狀紅細(xì)胞形成期，

6、一般要經(jīng)過(guò)數(shù)分鐘至10min。②快速沉降期，形成緡錢(qián)狀紅細(xì)胞以等速下降，約40min。 ③細(xì)胞堆積期，又稱緩慢沉積期或擠緊期，此時(shí)紅細(xì)胞堆積在試管底部。,紅細(xì)胞沉降率測(cè)定,[檢測(cè)原理]1．魏氏法(Westergren法) 將離體抗凝血液置于特制刻度測(cè)定管內(nèi)，垂直立于室溫中，記錄1h時(shí)紅細(xì)胞層下沉的距離(上層血漿的高度 )，用毫米(mm)數(shù)值報(bào)告。,[檢測(cè)原理]2．血沉儀法 血液經(jīng)抗凝靜置后，紅細(xì)胞下降，

7、紅細(xì)胞與血漿分離，其界面隨時(shí)間而下移，血沉儀用發(fā)光二極管和光電管檢測(cè)此界面的透光度改變，得到血沉值并顯示紅細(xì)胞沉降高度H與對(duì)應(yīng)時(shí)間t相關(guān)的H—t曲線。,[方法學(xué)評(píng)價(jià)] 1．手工法 魏氏法：為傳統(tǒng)方法，為國(guó)內(nèi)規(guī)范方法 . EDTA或枸櫞酸鈉抗凝血液標(biāo)本充分混合后，吸入魏氏血沉管200mm刻度處，將血沉管垂直室溫放置至少60min，應(yīng)避免振動(dòng)、風(fēng)吹、陽(yáng)光直射，然后讀取柱中紅細(xì)胞沉淀上透明血漿層約lmm處結(jié)果。IC

8、SH方法: 參考方法, 用于驗(yàn)證其他方法的可靠性。,,,[方法學(xué)評(píng)價(jià)]2．儀器法 血沉儀可動(dòng)態(tài)記錄整個(gè)血沉過(guò)程的變化，描繪出紅細(xì)胞沉降的曲線， ESR測(cè)定在30min或lmin內(nèi)得到檢測(cè)結(jié)果，大大縮短了臨床等候報(bào)告的時(shí)間。,,[質(zhì)量保證] 紅細(xì)胞數(shù)量、表面積、厚度、直徑、血紅蛋白量和血漿中各種蛋白比例。影響紅細(xì)胞緡錢(qián)狀形成的主要因素有： 1.血漿中各種蛋白的比例，與總蛋白濃度無(wú)關(guān)。清蛋白帶負(fù)電荷，球蛋白與

9、纖維蛋白原帶正電荷，紅細(xì)胞因唾液酸而帶負(fù)電荷，彼此排斥。 促緡錢(qián)狀聚集的物質(zhì)：纖維蛋白原＞γ球蛋白＞αβ球蛋白、膽固醇、甘油三酯等； 清蛋白及卵磷脂則抑制紅細(xì)胞緡錢(qián)狀的形成。,3．血沉管與血沉架 血沉管與血沉架規(guī)格必須符合標(biāo)準(zhǔn)。血沉管置血沉架上應(yīng)完全垂直，傾斜時(shí)，會(huì)加速沉降。4.血標(biāo)本 避免脂肪血；抗凝劑濃度增加使血沉減慢，每周配制1次，置冰箱血與抗凝劑比例要準(zhǔn)確。抽血應(yīng)在30s內(nèi)完成，不得混入消毒劑，避

10、免形成凝塊。,5．溫度 18～25℃的室溫下測(cè)定。室溫過(guò)高時(shí)血沉加快，可以按溫度系數(shù)校正。 6．其他 注射器、試管、血沉管要干燥潔凈，以避免溶血。7．及時(shí)測(cè)定 采血后應(yīng)盡快進(jìn)行測(cè)定，室溫下，標(biāo)本置放時(shí)間不應(yīng)超過(guò)4h，置4℃冰箱時(shí)枸櫞酸鈉抗凝血可6h, EDTA抗凝血可24h. 。,[質(zhì)量保證],[參考值]①50歲：男性85歲：男性< 30mm／h,女性< 42mm／h。④兒童< 10mm／h。,血沉是較

11、為常用而缺乏特異性的試驗(yàn)， 對(duì)判斷機(jī)體有無(wú)感染、組織損傷、壞死或某些疾病有無(wú)活動(dòng)、進(jìn)展、惡化及腫瘤浸潤(rùn)、播散、轉(zhuǎn)移等都有一定的價(jià)值。 血沉測(cè)定常作為疾病是否活動(dòng)的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。,臨床意義,1．血沉增快(1)生理性：女性高于男性。婦女月經(jīng)期由于子宮內(nèi)膜破損及出血，血沉略有增快；妊娠3個(gè)月以上可因生理性貧血及血漿纖維蛋白原增加使血沉增快；老年人，特別是70歲以上的高齡者，多因纖維蛋白原增高而血沉增快。,臨床意義,(2)病理性

12、 1)各種炎癥：感染是血沉加快最常見(jiàn)的原因。 急性細(xì)菌性炎癥時(shí)，由于血中急性時(shí)相反應(yīng)蛋白增多，包括α1胰蛋白酶、α2巨球蛋白、C反應(yīng)蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、纖維蛋白原等。在炎癥發(fā)生后2～3d可出現(xiàn)血沉增快； 慢性炎癥，如結(jié)核病、結(jié)締組織炎癥、風(fēng)濕熱等，于活動(dòng)期常見(jiàn)血沉增快，病情好轉(zhuǎn)時(shí)血沉減慢，非活動(dòng)期血沉可正常。,2)組織損傷及壞死： 范圍較大的組織損傷或手術(shù)創(chuàng)傷常致血沉增快，若無(wú)合并癥，一般2～3周內(nèi)恢復(fù)正常；

13、 心肌梗死時(shí)，于發(fā)病后3～4d可見(jiàn)血沉增快(急性時(shí)相反應(yīng)蛋白)，并持續(xù)1～ 3周，而心絞痛時(shí)血沉多正常。,3)惡性腫瘤： 血沉可作為惡性腫瘤的普查篩選的輔助指標(biāo)， 通常迅速增長(zhǎng)的惡性腫瘤血沉均增快，良性腫瘤血沉多正常。 惡性腫瘤手術(shù)切除后或治療較徹底，血沉可趨于正常，復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移時(shí)又可增快。,4)高球蛋白血癥： 多種因素導(dǎo)致的免疫球蛋白增高可見(jiàn)血沉增快，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、惡性

14、淋巴瘤、亞急性感染性心內(nèi)膜炎、肝硬化、慢性腎炎等。 高粘滯性綜合征時(shí)，血沉可不增快甚至減慢。,5)貧血：貧血患者血紅蛋白低于90g／L時(shí)，血沉可輕度增快，并隨貧血加重而增快。6)高膽固醇血癥：如動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病、腎病綜合征、粘液性水腫、原發(fā)性家族性高膽固醇血癥等，血沉常常增快。,2．血沉減慢 一般臨床意義較小，主要見(jiàn)于真紅、低纖維蛋白原血癥、充血性心力衰竭、紅細(xì)胞形態(tài)異常(如異形紅細(xì)胞、球形紅細(xì)胞、鐮形紅細(xì)胞

15、)。,血液分析儀及其臨床應(yīng)用,hematology analyzer and clinical application,血液分析儀及其臨床應(yīng)用,發(fā)展簡(jiǎn)史檢測(cè)原理(庫(kù)爾特原理)血液細(xì)胞分析儀（三分類法）原理 及臨床應(yīng)用（細(xì)胞直方圖的形成）血液細(xì)胞分析儀的發(fā)展（五分類法）,一、發(fā)展簡(jiǎn)史,1590 年荷蘭人米德?tīng)柋ず驼采O(shè)計(jì)制造了最原始的顯微鏡（圖1） 1610 年伽利略使用望遠(yuǎn)鏡觀察小的物體并將其放大，后來(lái)被列文霍克改進(jìn)成為

16、原始的顯微鏡。 1658 年意大利人馬爾皮基應(yīng)用最原始的顯微鏡首先觀察到了紅細(xì)胞，他是第一個(gè)見(jiàn)到紅細(xì)胞的人，開(kāi)始進(jìn)行紅細(xì)胞計(jì)數(shù)則是200 年后的事情了。 1855年發(fā)明了計(jì)數(shù)血細(xì)胞的計(jì)數(shù)板（Neubauer計(jì)數(shù)板）一直沿用至今。 而設(shè)計(jì)并生產(chǎn)出第一臺(tái)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀則又過(guò)了近100 年。,最初的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是一種單參數(shù)測(cè)定儀器，只能對(duì)血液中的紅細(xì)胞和白細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，并且需人工切換。最早生產(chǎn)的血球計(jì)數(shù)儀為Coulter 型

17、1958 年以Coulter 命名的專門(mén)從事顆粒性測(cè)量計(jì)數(shù)的儀器公司，庫(kù)爾特電子（Coulterlectronics ）公司成立。,血液分析儀發(fā)明者庫(kù)爾特先生,35歲的美國(guó)人庫(kù)爾特發(fā)明了粒子計(jì)數(shù)技術(shù)；50年代初期，血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀開(kāi)始應(yīng)用于臨床。科技為人類健康服務(wù)，熱心社會(huì)公益事業(yè)。,庫(kù)爾特先生1913-1998,此后，歐洲、日本也開(kāi)始了血液細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的開(kāi)發(fā)和研制,我國(guó)在60年代中期也開(kāi)始了這種儀器的開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)。 我國(guó)1965年

18、在上海也生產(chǎn)了簡(jiǎn)單的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，1975 年北京醫(yī)療儀器廠也開(kāi)始模仿設(shè)計(jì)自己的簡(jiǎn)單的紅白細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。 血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀（Blood Cell Counter） 血液細(xì)胞分析儀(Hematology Analyzer),,血液分析儀,二、檢測(cè)原理,庫(kù)爾特原理 庫(kù)爾特原理是利用電阻抗法測(cè)量細(xì)胞的數(shù)量和體積。其內(nèi)容為：血細(xì)胞是電的不良導(dǎo)體，通過(guò)電場(chǎng)（計(jì)數(shù)小孔）時(shí)產(chǎn)生電阻， 將電阻變化轉(zhuǎn)化成脈沖信號(hào)，

19、感應(yīng)器通過(guò)檢測(cè)脈沖的數(shù)量及大小，從而計(jì)算出通過(guò)小孔的細(xì)胞數(shù)量及體積。（血細(xì)胞計(jì)數(shù)和分析中最為經(jīng)典的原理）,三、三分類法原理及臨床應(yīng)用,（一）三分類法(體積分類法）原理 各種單純電阻法血細(xì)胞分析儀的原理即為電阻抗（庫(kù)爾特原理）原理。,血細(xì)胞直方圖概念： 在細(xì)胞通過(guò)小孔計(jì)數(shù)時(shí)，感應(yīng)器收集脈沖的大小及數(shù)量，轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的細(xì)胞體積和數(shù)量，并在坐標(biāo)上表示出來(lái)。坐標(biāo)的橫軸(X)代表體積(FL)，縱軸(Y)代表相對(duì)數(shù)量，將各點(diǎn)用光滑的曲

20、線相連，就是直方圖。即直方圖是可以表示出細(xì)胞群體體積分布情況的圖形。,細(xì)胞直方圖作用,為臨床提供直觀的檢驗(yàn)結(jié)果。為檢驗(yàn)人員監(jiān)控儀器工作狀態(tài)及檢測(cè) 結(jié)果提供了直觀的圖形。注意：不同類型儀器直方圖的圖形也有差異。,（二）各種直方圖的臨床應(yīng)用 1、白細(xì)胞直方圖及其臨床應(yīng)用 白細(xì)胞直方圖原理： 經(jīng)過(guò)特殊溶血?jiǎng)┨幚淼陌准?xì)胞，可將特定的細(xì)胞群進(jìn)行處理，使得絕大多數(shù)淋巴細(xì)胞體積縮小，使得中性粒細(xì)胞體積適當(dāng)增大。因此在白細(xì)胞

21、分布直方圖上出現(xiàn)兩個(gè)明顯的細(xì)胞分布峰。,在三分類血細(xì)胞分析儀上，白細(xì)胞直方圖形態(tài)為“兩峰一谷”： ①小細(xì)胞區(qū)（35~90fl）：主要為淋巴細(xì)胞，包括成熟淋巴細(xì)胞以及異性淋巴細(xì)胞。 ②中間細(xì)胞區(qū)（90~160fl）：包括成熟單核細(xì)胞、嗜酸細(xì)胞、嗜堿細(xì)胞以及原始和幼稚細(xì)胞。 ③大細(xì)胞區(qū)（160~450fl）：代表成熟中性粒細(xì)胞。,白細(xì)胞直方圖的變化，可評(píng)價(jià)血液中白細(xì)胞群體的變化，但這種變化的細(xì)胞圖并無(wú)特異性，某一類白細(xì)胞的

22、增多或減低均可使直方圖產(chǎn)生相似的變化。 因此，異常白細(xì)胞直方圖只能提示白細(xì) 胞分群之間比例變化或可能出現(xiàn)異常細(xì)胞，故要求用顯微鏡復(fù)查血涂片。,典型病例介紹,急性淋巴細(xì)胞白血病,急性淋巴細(xì)胞白血病,慢性淋巴細(xì)胞白血病,急性粒細(xì)胞白血?。瑼ML-M3,嗜堿粒細(xì)胞白血病,嗜酸粒細(xì)胞增多癥,慢性粒細(xì)胞白血病,慢性粒細(xì)胞白血病,慢性粒單細(xì)胞白血病,單核細(xì)胞增多癥,粒細(xì)胞增多,2、紅細(xì)胞直方圖及其臨床應(yīng)用,在36-360fl范圍內(nèi)分析紅

23、細(xì)胞，正常紅細(xì)胞主要分布在50-200fl。 正常直方圖上可見(jiàn)兩個(gè)細(xì)胞群體：50-125fl區(qū)域有一個(gè)幾乎兩側(cè)對(duì)稱、較狹窄的正態(tài)分布曲線；主峰右側(cè)約在125-200fl區(qū)域的細(xì)胞，為大紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞。其中曲線峰頂對(duì)應(yīng)的是MCV,而曲線基底的寬度大致反應(yīng)RDW。,直方圖的臨床應(yīng)用,紅細(xì)胞直方圖在貧血中的應(yīng)用 不同貧血紅細(xì)胞體積的變化，使紅細(xì)胞 體積分布圖形發(fā)生變化，結(jié)合其它參數(shù)對(duì) 鑒別診斷頗有價(jià)值

24、（根據(jù)MCV和RDW可對(duì)貧血進(jìn)行分類）： 1. 小細(xì)胞性貧血 2. 大細(xì)胞性貧血 3. 正細(xì)胞性貧血,紅細(xì)胞直方圖有關(guān)的兩個(gè)參數(shù),紅細(xì)胞直方圖有關(guān)兩個(gè)參數(shù)是MCV，RDW 1、MCV表示紅細(xì)胞平均體積， MCV變大，紅細(xì)胞峰右移； MCV變小，紅細(xì)胞峰左移。,2、RDW,RDW由血細(xì)胞分析儀測(cè)量獲得，是反映周?chē)t細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù)，它的

25、統(tǒng)計(jì)學(xué)實(shí)質(zhì)是紅細(xì)胞大小的變異系數(shù)(CV)。當(dāng)紅細(xì)胞通過(guò)小孔的一瞬間，計(jì)數(shù)電路得到一個(gè)相應(yīng)大小的脈沖，不同大小的脈沖信號(hào)分別貯存在儀器內(nèi)裝計(jì)算機(jī)的不同通道，計(jì)算出相應(yīng)的體積及細(xì)胞數(shù)，統(tǒng)計(jì)處理而得RDW。在MCV相似的情況下，RDW越大，紅細(xì)胞峰就 越寬。,,小細(xì)胞性貧血,,（1）RDW輕度↑（2）RDW正常,小細(xì)胞性貧血,,RDW明顯↑也見(jiàn)于IDA治療有效時(shí),大細(xì)胞性貧血（RDW正常）,見(jiàn)于溶貧白血病前期再障巨幼貧,大細(xì)

26、胞性貧血（RDW輕度↑）,,見(jiàn)于葉酸，維生素B12缺乏引起的巨幼貧,大細(xì)胞性貧血（RDW明顯↑）,見(jiàn)于巨幼貧葉酸，維生素B12治療初期,正細(xì)胞性貧血（RDW正常）,見(jiàn)于慢性病急性失血骨髓纖維化骨髓發(fā)育不良,血小板體積范圍在2fl－30fl之間，平均體積為6－7fl，所以血小板直方圖是一個(gè)偏態(tài)曲線。,3、血小板直方圖及其臨床應(yīng)用,（一）血小板直方圖的臨床應(yīng)用 由于紅細(xì)胞與血小板的檢測(cè)在同一通道， 小紅細(xì)胞和細(xì)胞碎片，

27、血小板自身的聚集對(duì)血小板計(jì)數(shù)及平均血小板體積的影響很大，血小板直方圖能反映這些變化，可根據(jù)圖形的變化，了解血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。,所以認(rèn)真分析血小板直方圖的變化，找出干擾直方圖的原因，不僅有利于疾病的診斷，而且可以甄別血小板計(jì)數(shù)的正確性。 有些儀器專門(mén)設(shè)置了增加血小板準(zhǔn)確性的技術(shù)，如鞘流技術(shù)、浮動(dòng)界標(biāo)、擬合曲線等。,異常血小板直方圖,峰右移,左右側(cè)起點(diǎn)較高,異常血小板直方圖,右側(cè)呈脫尾狀,峰左移,其他計(jì)數(shù)原理的血細(xì)胞分析儀,1. 激

28、光法：應(yīng)用單束激光照射到經(jīng)過(guò)鞘流技術(shù)處理的排列成一列的單個(gè)細(xì)胞上，根據(jù)細(xì)胞阻斷激光束的頻率以及PMT收集到的激光折射信號(hào)，對(duì)細(xì)胞的數(shù)量、體積進(jìn)行分析的儀器。,其他計(jì)數(shù)原理的血細(xì)胞分析儀,2. 離心式血液分析儀：將血液充入到含義特殊試劑的毛細(xì)管內(nèi)，在專用離心機(jī)上離心，根據(jù)血細(xì)胞中各種成份的比重不同而分布在不同的細(xì)胞層內(nèi)的原理，血細(xì)胞被吖啶橙染色，各細(xì)胞層會(huì)有明顯的顏色差異，然后將毛細(xì)管放在特殊的判讀機(jī)上對(duì)不同的細(xì)胞層進(jìn)行定量分析.3.

29、移動(dòng)光學(xué)法：早期的光學(xué)法血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器， 采用普通光源，血細(xì)胞在移動(dòng)過(guò)程中被檢測(cè)到，不能分析細(xì)胞的大小和內(nèi)部結(jié)結(jié)構(gòu)，因此僅可進(jìn)行紅細(xì)胞和白細(xì)胞的計(jì)數(shù),四、白細(xì)胞五分類法,進(jìn)入90年代中期以來(lái)，國(guó)外許多廠家已經(jīng)不滿足于三分類型的血細(xì)胞分析儀，逐步開(kāi)始研制和推出具有五分類或更多項(xiàng)白細(xì)胞分析技術(shù)的全自動(dòng)型血液分析儀器，比較著名的廠家有：Coulter、Sysmex、ABBOTT、Bayer、ABX等。各廠家使用的白細(xì)胞分類技術(shù)多樣化，復(fù)雜化，

30、使得白細(xì)胞分類技術(shù)更加成熟和可靠。而技術(shù)的提高也帶來(lái)了儀器和消耗品（試劑）價(jià)格的增加。,具有白細(xì)胞五分類功能的血細(xì)胞分析儀器是指：通過(guò)各種物理和化學(xué)技術(shù)對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分析，以獲得外周血液中白細(xì)胞的五種常見(jiàn)類型的百分率和絕對(duì)值的測(cè)定結(jié)果，此外還應(yīng)該具有對(duì)出現(xiàn)異常白細(xì)胞的提示和初步分類功能。,五分類法原理,（一）五分類VCS技術(shù),運(yùn)用V、C、S三種探針,在流式通道的某一位點(diǎn),對(duì)通過(guò)的單列白細(xì)胞，進(jìn)行逐個(gè)的、同時(shí)的、三重的檢測(cè)，以及三維分析,以

31、確定其亞群性質(zhì)。V-低頻波，分析細(xì)胞體積；C-高頻波，分析細(xì)胞核型；S-激光，分析細(xì)胞的顆粒特性。,接近原態(tài)的WBC分析,接近原態(tài)的白細(xì)胞,,,進(jìn)入流式通道,VCS檢測(cè),八千多個(gè)白細(xì)胞逐個(gè)、直接、同時(shí)地在流式通道內(nèi)接受VCS三重檢測(cè)，得到各自的三維座標(biāo)值,VCS,,,,十余種異常細(xì)胞的報(bào)警提示,VCS法白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖,（二）細(xì)胞化學(xué)技術(shù)：核酸熒光染色,區(qū)別于酸堿染色、酶染色、糖原染色核酸染色物質(zhì)（熒光物質(zhì)）

32、Polymethine （聚次甲基）Oxazine (口惡嗪）不同的細(xì)胞亞群、不同的成熟階段，其核酸的含量，核酸的結(jié)構(gòu)，DNA/RNA的比例不同，表現(xiàn)不同的著色性。與半導(dǎo)體激光有很好的適配性，633nm激發(fā)熒光,流式通道和光路系統(tǒng),,半導(dǎo)體激光器 (?=633nm),雙色分光鏡,光電倍增管（熒光信號(hào)）,流動(dòng)室,光電倍增管（側(cè)向散射光信號(hào)）,光電二極管（前向散射光信號(hào)）,核酸染色和信號(hào)分析,血細(xì)胞分析儀的發(fā)展近況和展望

33、,1、血常規(guī)檢驗(yàn)多參數(shù)化 2、多功能合成擴(kuò)展 3、檢測(cè)速度的提高 4、方法的改進(jìn)和進(jìn)展 5、應(yīng)用的方便性,注意：病理因素對(duì)血液分析儀使用的影響,1. 嚴(yán)重黃疸或脂血使血紅蛋白結(jié)果假性增高。2. 血液中白細(xì)胞顯著增高而影響紅細(xì)胞數(shù)。3. 有核紅細(xì)胞出現(xiàn)而影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)。4. 某些新生兒或某些肝病病人紅細(xì)胞膜質(zhì)類 異常，抗溶血?jiǎng)┳饔茫t細(xì)胞溶解不完全 而使白細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)偏高。,5. 多發(fā)性骨髓瘤的M蛋白增多時(shí)，M

34、蛋白可與溶血?jiǎng)┌l(fā)生反應(yīng)，紅細(xì)胞溶解不完全而使白細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)偏高。6. 各種疾病引起的血栓前狀態(tài)使血小板易于聚集，使血小板計(jì)數(shù)結(jié)果假性減低。7. 紅細(xì)胞冷凝集可使紅細(xì)胞結(jié)果假性減低， 白細(xì)胞假性增高(電阻抗法)和MCV假性增高。,結(jié)束語(yǔ),目前血細(xì)胞分析儀越來(lái)越普遍的應(yīng)用于各級(jí)醫(yī)院的常規(guī)作中，但是并不是說(shuō)所有的結(jié)果都是準(zhǔn)確無(wú)誤的，目前在血細(xì)胞形態(tài)學(xué)方面，無(wú)論是五分類還是更多的分類，甚至是具有專門(mén)幼稚細(xì)胞分析通道的儀器，仍然不能

35、根本解決血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)的問(wèn)題，仍然不能完全以儀器分類結(jié)果徹底取代人工分類。此外儀器一些固有的產(chǎn)生誤差的因素還沒(méi)有徹底解決，某些影響儀器計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性的個(gè)別因素還存在，或某些儀器具有設(shè)計(jì)上的缺陷和應(yīng)用上的局限性，因此無(wú)論是細(xì)胞計(jì)數(shù)還是多種參數(shù)的分析結(jié)果仍然會(huì)有問(wèn)題發(fā)生。不要總是相信儀器，要認(rèn)真對(duì)待每個(gè)實(shí)驗(yàn)樣品和結(jié)果，分析判斷這個(gè)結(jié)果，檢驗(yàn)工作者要對(duì)儀器的性能，質(zhì)量控制，局限性，常出現(xiàn)的故障，特別對(duì)直方圖和五分類的散點(diǎn)圖有深刻的了解，善于發(fā)現(xiàn)問(wèn)

36、題和解決問(wèn)題。這一切都有待于通過(guò)人們?cè)谑炀氄莆諆x器的性能和不斷提高的自己的知識(shí)水平上，通過(guò)扎實(shí)的的顯微鏡下對(duì)血細(xì)胞形態(tài)學(xué)認(rèn)知的基本功來(lái)解決問(wèn)題。,面對(duì)問(wèn)題時(shí)，如何解釋？,一個(gè)實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)工作者沒(méi)有與臨床溝通和對(duì)話的能力是不能生存的,思考題,1.手工顯微鏡計(jì)數(shù)紅細(xì)胞已不常用，但為什么 仍不能被淘汰？2.簡(jiǎn)述細(xì)胞直方圖的定義與作用。 3.簡(jiǎn)述Ret的定義及其臨床意義。4.怎樣理解Ret用于臨床鑒別三種常見(jiàn)貧血類型的思路？5.簡(jiǎn)述