免疫組化在腫瘤診斷的應(yīng)用

1、免疫組化在腫瘤診斷中的應(yīng)用,（一）對“未分化”惡性腫瘤的分類 如在HE(蘇木精-伊紅染色法)切片上由于腫瘤的“未分化”而缺少腫瘤細(xì)胞起源的特征，不能分類，但臨床上又必須根據(jù)腫瘤的種類作出治療與預(yù)后判斷，這種情況下可用到免疫組化。在進(jìn)行免疫組化前病理醫(yī)生應(yīng)根據(jù)腫瘤發(fā)生部位、組織學(xué)的蛛絲馬跡及臨床特征正確地選擇抗體。如發(fā)生于直腸的上皮樣包含大細(xì)胞的未分化腫瘤，其鑒別診斷主要考慮為未分化癌、淋巴瘤、惡性黑色素瘤，可以使用表X

2、-1列出的免疫組化抗體：,表X-1未分化癌、淋巴瘤和惡性黑色素瘤的免疫組化抗體  未分化癌 淋巴瘤 惡性黑色素瘤  細(xì)胞角蛋白（CK） + -

3、-上皮細(xì)胞膜抗原（EMA） + - -波形蛋白（Vimentin） - +/- +HMB45 -

4、 - +S-100 - - +白細(xì)胞共同抗原（LCA） - +

5、 -,,,,1．角蛋白（Keratin）：一種中間絲蛋白，分為：（1）表皮角蛋白（Epidermal keratin，EK）——鱗狀上皮或高分化鱗癌標(biāo)記；（2）細(xì)胞角蛋白（cytokeratin，CK）——低分子角蛋白，對腺癌、移行細(xì)胞部及低分化鱗癌標(biāo)記。一般用廣譜型角蛋白抗體為好，常用。,2．上皮膜抗原（Epithelial membrane antigen，EMA）：這亦是常用的上皮細(xì)胞標(biāo)記抗體，細(xì)胞膜陽

6、性，用Zanker’s、Bouin或B5固定液中固定為好。其在低分化和未分化上皮中表達(dá)好，但亦可在間變性大細(xì)胞淋巴瘤、惡性橫紋肌樣瘤中表達(dá)。,3．波形蛋白（Vimentin，Vim）：是一種細(xì)胞中間絲蛋白抗體，在多數(shù)軟組織腫瘤均可表達(dá)，但纖維細(xì)胞較明顯，在一些上皮性腫瘤也有陽性反應(yīng)。常用作間葉源與上皮源腫瘤的第一線鑒別抗體 4. S-100蛋白：是一種周圍神經(jīng)雪旺氏細(xì)胞特異標(biāo)記抗體，后發(fā)現(xiàn)對脂細(xì)胞、朗格罕氏細(xì)胞、肌上皮細(xì)胞、黑色素細(xì)

7、胞及其腫瘤均可陽性。,有時這些抗體用于這種目的診斷中并不完全理想，如分化差的癌可顯示Vimentin或S-100蛋白，有時淋巴瘤可以表達(dá)上皮膜抗原，一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白，除黑色素瘤以外的一些腫瘤有時也可以表達(dá)HMB-45，這就強(qiáng)調(diào)了在腫瘤診斷中應(yīng)使用一組抗體而不是單個抗體。,（二）、對不同器官與組織交界處腫瘤進(jìn)一步分類在一些組織器官交界處，由于重疊的特征，難以僅憑組織學(xué)基礎(chǔ)對腫瘤進(jìn)行分類，其中有些特征（至少目前）在理論界較感興趣（

8、如胃腸道梭形細(xì)胞肉瘤是肌肉起源平滑肌肉瘤，還是神經(jīng)起源神經(jīng)鞘瘤，還是間質(zhì)起源的胃腸道間質(zhì)瘤（gastrointestinal stromal tumor GIST），其鑒別見下表：X-2 平滑肌瘤、神經(jīng)鞘瘤、GIST和Kaposi肉瘤鑒別的免疫組化抗體 Des MSA SMA CD34 CD31 S-100平滑肌瘤

9、 + + + - - -神經(jīng)鞘瘤 - - - - - +GIST - -

10、 - + - -Kaposi肉瘤 - - - + + -,,,,1. 結(jié)蛋白（Desmin，Des）：平滑肌、橫紋肌均可陽性。2. 肌特異性肌動蛋白(muscle-specific actin,MSA):平滑

11、肌為陽性。3. 平滑肌肌動蛋白 (smooth muscle actin,SMA)：平滑肌為陽性。4. 第8因子Ⅷ，CD34：對血管內(nèi)皮細(xì)胞腫瘤，胃腸道間質(zhì)瘤標(biāo)記較特異。 注：（1）國際上將百余種標(biāo)記抗體統(tǒng)稱為CD（Cluster Designation）系列。 （2）淋巴細(xì)胞標(biāo)記與R-S細(xì)胞多數(shù)為膜陽性，而Ig與組織細(xì)胞標(biāo)記為胞漿陽性。,（三）、對惡性間皮瘤的鑒別 病理醫(yī)生常碰到的問題是發(fā)生于胸

12、、腹膜的腫瘤是轉(zhuǎn)移性腺癌或是其它漿膜腔腫瘤，還是惡性間皮瘤?？梢澡b別腺癌與間皮瘤的一組抗體 可以鑒別間皮腫瘤和血管源性肉瘤的抗體,,X-3 鑒別腺癌與間皮瘤的抗體 腺癌 間皮瘤細(xì)胞角蛋白（cytokeratin CK）

13、 + +波形蛋白（Vimentin） +/- +/-癌胚抗原（CEA M7072） +/-

14、 -LeuM1 +/- - B72.3 +/-

15、 -Ber-Ep4 +/- -鈣網(wǎng)膜蛋白（Calretinin） -

16、 +CK5 - +HBME-1 -

17、 +*血小板調(diào)節(jié)素（TM） - +**上皮膜抗原（EMA） + +分泌成分

18、 + -人胎盤產(chǎn)乳素 + -Lewis blood group antigen

19、 + - *血小板調(diào)節(jié)素（Thrombomodulin TM）在內(nèi)皮細(xì)胞、間皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、室管膜細(xì)胞、緘默細(xì)胞陽性。**EMA間皮瘤以胞膜陽性為主，腺癌以胞漿陽性為主。,,,,,X-4 鑒別間皮腫瘤和血管源性肉瘤的抗體 血管源性肉瘤 惡性（纖維型）間皮瘤

20、良性（局限纖維型）間皮瘤 CK - + - ACTIN +/- +

21、 - CD34 + - + 第八因子 + -

22、 -,,,,,（四）腫瘤細(xì)胞增殖活性與細(xì)胞凋亡標(biāo)記抗體 瘤細(xì)胞增殖指數(shù)反應(yīng)細(xì)胞增殖活性，是瘤細(xì)胞新生（惡性）狀況的客觀指標(biāo)，與凋亡指數(shù)呈反比關(guān)系。常用抗體有：1．增殖細(xì)胞核抗原（proliferative neuclear Antigen，PCNA），核陽性。 2．Ki-67，Brdu抗體：原要求新鮮組織，新近有Ki-67石蠟切片標(biāo)記抗體問世。,3．細(xì)胞凋亡（Apoptosis）標(biāo)記抗體：開始發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡發(fā)

23、生于正常細(xì)胞受基因調(diào)控性自然性死亡。后發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞亦可發(fā)生，而且某些藥物放、化療亦可誘發(fā)細(xì)胞凋亡，故成了研究腫瘤發(fā)生、發(fā)展、治療的熱點(diǎn)。其標(biāo)記抗體有：（1）凋亡抑制基因蛋白抗體：Bcl-2、Bcl-XL、mtp53。（2）促凋亡基因蛋白抗體：Fas/FasL系統(tǒng)，wtp53、Bax、Bcl-xs、Fas等。Tunel標(biāo)記。,（五）癌基因與抗癌基因，促轉(zhuǎn)移與轉(zhuǎn)移抑制基因蛋白抗體標(biāo)記。 目前應(yīng)用很多，因方法比分子生物學(xué)技