淋巴瘤免疫組化和基因診斷標準化的初步研究.pdf

1、目的:惡性淋巴瘤(malignant lymphoma,ML)是中國十大惡性腫瘤之一,該腫瘤分類復(fù)雜、預(yù)后差、臨床診斷極為困難,誤診率高達30﹪.目前,ML的診斷主要依靠HE組織形態(tài)學(xué)和免疫組化,國內(nèi)部分大醫(yī)院已建立了以HE組織形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ),免疫組化、基因診斷為輔的三結(jié)合的惡性淋巴瘤診斷方案,確診率達到95﹪以上.方法:(1)觀察63例淋巴組織增生性疾病的組織病理學(xué)形態(tài),按WHO新分類方案進行淋巴瘤分型,結(jié)合常規(guī)的D45RO,采用免疫組

2、織化學(xué)SABC法同步檢測比較BSAP和CD20的表達;(2)收集30例親鮮扁桃體組織,應(yīng)用95﹪酒精、10﹪福爾馬林液、中性甲醛緩沖液和4﹪多聚甲醛液等固定劑分別同時固定,石蠟包埋切片,HE染色,明確組織類型及比較其染色效果;15例應(yīng)用上述不同固定劃分別固定組織常溫下(20℃)不同時間段(1h、2h、4h、8h、24h、48h、72h),另外15例在不同應(yīng)用溫度(-20℃、-4℃、20℃)下應(yīng)用上述不同固定劑分別固定8h,組織消化提取其

3、DNA,量取其OD值并進行PCR凝膠電泳比較.結(jié)論:(1)BSAP表達定位于B淋巴細胞的核內(nèi),清晰易見,在B細胞性淋巴瘤顯著表達多呈強陽性,可作為標記B細胞的標準化抗體用于淋巴瘤顯著表達多呈強陽性,可作為標記B細胞的標準化抗體用于淋巴瘤的分型與鑒別診斷;(2)中性甲醛液和10﹪福爾馬林液對于組織結(jié)構(gòu)的保存最好,95﹪酒精較差;95﹪酒精和中性甲醛緩沖液對于淋巴組織DNA的保存效果最好,10﹪福爾馬林液因為其對DNA的降解作用,對PCR擴