臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)

1、臨床生物化學(xué)檢驗(yàn),北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科生化室程歆琦,生物化學(xué),臨床生物化學(xué)的主要任務(wù),分子生物學(xué),免疫學(xué),化學(xué),生物學(xué),,,,,,,,,,,,,探討疾病的發(fā)病機(jī)制,研究病理過程中出現(xiàn)的特異性化學(xué)標(biāo)志物,研究病理過程中體內(nèi)特定成分的改變,,,,病史,臨床查體,,,診斷學(xué)檢查,,,實(shí)驗(yàn)室檢查,影像學(xué)檢查,,,,生物化學(xué)檢驗(yàn),血液學(xué)檢驗(yàn),,病理學(xué)檢驗(yàn),,免疫學(xué)檢驗(yàn),,微生物檢驗(yàn),,糖代謝紊亂的檢查,氧化供能,血糖 (3.9～6.1

2、mmol/L),,,,,轉(zhuǎn)化成其它物質(zhì)（甘油、脂肪酸、氨基酸等）,合成糖原,超過腎糖閾時(shí)經(jīng)尿排出,胰島素,糖異生,,食物中的糖類,糖原分解,,,胰高血糖素、腎上腺素、生長激素、皮質(zhì)醇,血糖測定,葡萄糖氧化酶法： 葡萄糖 + O2 + H2O 葡萄糖酸 + H2O2H2O2 + 苯酚 + 4-氨基安替比林 醌亞

3、胺(520nm) + H2O 顏色深淺在一范圍內(nèi)與葡萄糖濃度成正比?？崭寡牵‵PG):至少8小時(shí)不攝入含熱量食物后的血漿葡萄糖含量。參考范圍：3.9～6.1mmol/L,GOD,,,POD,臨床意義,升高：出現(xiàn)糖尿病癥狀加上隨機(jī)血糖≥11.1mmol/L或空腹血糖(FPG)≥7.0mmol/L可診斷糖尿病。,血糖測定的影響因素,全血標(biāo)本放置1h,室溫血糖降低0.44mmol/L，4℃降低0.06～0.17mmol/L，因

4、此全血標(biāo)本應(yīng)在2h內(nèi)（最好30分鐘）分離血清或血漿待測。不同抗凝劑對血糖穩(wěn)定性的影響：NaF抗凝，采全血3h后，血糖僅降低0.56mmol/L，其后一直穩(wěn)定。全血比血漿約低10%；空腹血糖，末梢血比靜脈血低0.22mmol/L。,糖耐量試驗(yàn)口服或注射一定量葡萄糖后，每間隔一定時(shí)間測定血糖水平，稱為糖耐量試驗(yàn)。（GTT）口服葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT）靜脈葡萄糖耐量試驗(yàn)（IGTT）,OGTT試驗(yàn)的方法,將75g無水葡萄糖溶解在30

5、0ml水中，坐位取血后5分鐘內(nèi)口服，服糖后每隔30分鐘取血1次，共4次。于采血同時(shí)，每隔1小時(shí)留取尿液作尿糖試驗(yàn)。,葡萄糖耐量曲線,胰島素測定,測定方法：放射免疫法（RIA）、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA)和化學(xué)發(fā)光法等。臨床意義：用于糖尿病的分型診斷及低血糖的鑒別診斷。胰島素正常：健康人、某些2型DM等。胰島素升高：胰島素瘤、肥胖及2型DM等。胰島素降低：1型DM。,C肽測定,,優(yōu)點(diǎn)：不被肝臟破壞，只在腎臟降解和代謝；外源性

6、胰島素不含C肽，不與胰島素抗體反應(yīng)；因此C肽測定能夠更好的反映胰島B細(xì)胞的胰島素合成和釋放功能。臨床意義：胰島B細(xì)胞瘤：胰島素和C肽均升高；外源性胰島素過量引起低血糖：胰島素升高，C肽降低；評估胰島素分泌,糖化蛋白,糖化蛋白： 糖類物質(zhì)通過糖基和蛋白質(zhì)的氨基酸基團(tuán)結(jié)合形成的糖基化產(chǎn)物。影響因素： 糖化蛋白濃度主要受相關(guān)蛋白質(zhì)半壽期及某一時(shí)期內(nèi)平均血糖水平影響，不受飲食、運(yùn)動及每天的血糖波動的影響。臨床意

7、義： 主要用于評估血糖控制效果，不用于診斷。,糖化血紅蛋白,由葡萄糖和血紅蛋白的氨基酸殘基縮合而成。糖化Hb有多種結(jié)構(gòu)，主要成份為HbA1c，約占80％。HbA1c濃度與紅細(xì)胞壽命和6～8周內(nèi)血糖的平均濃度有關(guān)，反應(yīng)檢測前1 ～2個(gè)月內(nèi)的平均血糖水平。國際公認(rèn)的監(jiān)測血糖控制水平的最佳指標(biāo)。,脂類代謝紊亂的檢查,血漿脂蛋白,載脂蛋白的功能　構(gòu)成并穩(wěn)定脂蛋白的結(jié)構(gòu)　修飾并影響與脂蛋白代謝有關(guān)的酶的活性　作為脂蛋白受體的配體

8、，參與脂蛋白與細(xì)胞　　　　　　　　　　　　　表面脂蛋白受體的結(jié)合及其代謝。,膽固醇測定-膽固醇氧化酶法 膽固醇酯+H2O CHE 膽固醇＋游離脂肪酸 膽固醇＋Ｏ2 COD △4－膽甾烯酮＋H2O2 2H2O2＋4－氨基安替比林＋酚 POD 醌亞胺 醌亞胺的最大吸收峰在500nm，吸光度與標(biāo)本中的膽固醇含量成正比．參考范圍：《血脂異常防治建議》規(guī)定，TC＜5.20mmol

9、/L為合適范圍，5.23～5.69mmol/L為邊緣性增高，5.72mmol/L以上為升高。,,,,酶法測定TG,血漿脂蛋白測定,超速離心分離純化法電泳分離法血漿脂蛋白膽固醇測定,HDL-C和LDL-C的參考范圍,HDL-C:我國《血脂異常防治建議》中提出，HDL-C的合適范圍為>1.00mmol/L。LDL-C:合適范圍3.64mmol/L。NCEP ATPⅢ明確要求，高脂血癥患者血LDL-C的治療目標(biāo)定為2.6mm

10、ol/L以下。,載脂蛋白測定,測定方法：免疫透射比濁法。測定項(xiàng)目：apoAⅠ、apoAⅡ、apoB100、apoCⅡ、apoCⅢ、apoE等。臨床意義： apoAⅠ隨HDL-C水平變動；apoB隨TC和LDL-C水平變動。AS和CHD時(shí)apoAⅠ下降、apoB升高。CHD時(shí)apoB升高比TC、LDL-C升高更有意義；腦血管病時(shí)，以apoAⅠ和HDL-C下降更為明顯。,水、電解質(zhì)平衡與酸堿平衡紊亂的檢測,緩沖體系,肺,腎臟,水、電解

11、質(zhì)、pH平衡,,,,,內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,一、水平衡,60%,70%,體液容量及分布,60%,細(xì)胞內(nèi)液40%,細(xì)胞外液20%,血漿5%,組織間液15%,,,水平衡紊亂,飲水　　　1200食物 　　 1000 代謝水 300,,,,尿 1000～2000肺 200～400皮膚 300～600 腸道 100～200,,,2500,2500,二、水鈉平衡紊亂,,低血鈉 正

12、常 多,低體液 多,,,低容量性低鈉血癥（低滲性脫水）,高容量性低鈉血癥 （低滲性水腫）,低容量性高鈉血癥（高滲性脫水）,高容量性高鈉血癥 （高滲性水腫）,高容量正常鈉血（等滲性水腫）,,,,,,,,低容量正常鈉血（等滲性脫水）,體液的電解質(zhì),,Cl,Na,Na,Cl,K,HPO4,,,,,,,,,,,,,,,,,,,血漿,細(xì)胞間液,細(xì)胞內(nèi)液,K,Ca Mg,K,Ca Mg,HCO3

13、HPO4,HCO3HPO4,HCO3,SO4,SO4,SO4,Pr,Pr,有機(jī)酸,有機(jī)酸,Na,Ca,Mg,,鉀攝入與排出平衡,尿液80～ 90%,糞便10%,汗液,,攝入 50～200 mmol/L/天,少吃少排，30～50 mmol/d 不吃也排，5 ～ 10 mmol/d,細(xì)胞內(nèi)外的轉(zhuǎn)移,跨細(xì)胞轉(zhuǎn)移,,Na-K-ATPase,胰島素 Na-K-ATPase 進(jìn)K＋e 高

14、 進(jìn) 低 出酸堿平衡 酸 出 堿 進(jìn),鉀細(xì)胞內(nèi)外平衡,參與細(xì)胞內(nèi)的正常代謝維持細(xì)胞內(nèi)容量、離子、滲透壓及酸堿平衡維持神經(jīng)肌肉的應(yīng)激性維持心肌的正常功能,鉀的生理功能,鉀濃度的調(diào)節(jié)

15、 進(jìn)入K+過多： 血K +暫時(shí)升高 刺激胰島素分泌 刺激醛固酮分泌 K +轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi) 遠(yuǎn)由小管分泌K 尿K +升高 血K +恢復(fù)正

16、常,,,,,,,,,,,,,,,離子選擇電極法　 檢測電極表面電位的改變，依鉀電極、鈉電極或氯電極與參比電極表面電位變化的大小計(jì)算樣本中鉀離子、鈉離子或氯離子的含量。參考范圍：血清鉀：3.5～5.5mmol/L 血清鈉：135～145mmol/L 血清氯：96～106mmol/L 腦脊液氯：

17、 120～130mmol/L,鉀、鈉、氯測定,低鉀血癥K+<3.5mmol/L,原因和機(jī)制,,,攝入不足血漿稀釋,排出增多,跨細(xì)胞轉(zhuǎn)移,,腎臟丟失,胃腸道丟失,,,利尿劑,腎上腺皮質(zhì)激素,,堿中毒,堿性藥物,,高鉀血癥K+>5.5mmol/L,原因和機(jī)制,,輸入過多,從細(xì)胞內(nèi)移出,排泄障礙,,,腎臟,,,酸中毒,細(xì)胞損傷,輸液過多、　　　　　　　過快,血液氣體分析,所謂的血?dú)馐侵秆褐兴难鯕夂投趸細(xì)怏w。是評價(jià)病

18、人呼吸、氧化及酸堿平衡狀態(tài)的必要指標(biāo)血?dú)夥治鲋饕?xiàng)目；血液氧分壓、二氧化碳分壓、和PH值,氧的運(yùn)輸,ctO2=O2Hb+cdO2氧在血液中大部分是通過與血液中的Hb結(jié)合成氧合血紅蛋白而參與運(yùn)輸?shù)?。物理溶解的?cdO2)量極少，僅占血液總量的2~3％,Hb與O2可逆結(jié)合的程度，取決于血液的氧分壓。當(dāng)PO2升高時(shí)，促進(jìn)O2與Hb結(jié)合，PO2降低時(shí)O2與Hb解離。血液HbO2的量與Hb 總量之比稱之為血紅蛋白氧飽和度。以PO2值

19、為橫座標(biāo)，血氧飽和度為縱座標(biāo)，求得血液中HbO2的O2解離曲線，稱為HbO2解離曲線。,,,,H-H公式,,血液pH主要是由[HCO3-]/[H2CO3]緩沖對所決定，據(jù)H-H公式運(yùn)算 pH=6.103+log HCO3-　　　　　代謝因素 H2CO3= α × PaCO2　　　　　呼吸因素（ α 為CO2在血液中的溶解系數(shù)）,,,,血?dú)夥治鰞x測定原理及儀器結(jié)構(gòu),目前的血?dú)夥治鰞x主要由專門的氣敏電極分別測出

20、O2、CO2和pH三個(gè)數(shù)據(jù)，再參考Hb及體溫的數(shù)據(jù)計(jì)算出其他診斷參數(shù)。其結(jié)構(gòu)組成基本一般包括電極（pH、PO2、PCO2）、進(jìn)樣室、CO2空氣混合器、放大器元件、數(shù)字運(yùn)算顯示屏和打印機(jī)等部件，進(jìn)行自動化分析，其所需樣品少，檢測速度快而準(zhǔn)確。,pH,正常值:動脈血pH 7.35～7.45,意義: pH↓:失代償性酸中毒 pH↑:失代償性堿中毒,pH(-),無酸堿平衡紊亂 代償性酸堿平衡紊亂 酸堿中毒并存相

21、互抵消,動脈血二氧化碳分壓,意義:① 判斷肺泡通氣狀態(tài) ②判斷呼吸性酸堿失衡的性質(zhì)：原發(fā)性↑—呼酸 原發(fā)性↓—呼堿 ③判斷呼吸衰竭類型,正常值:男性：35～46mmHg,標(biāo)準(zhǔn)碳酸氫鹽(SB),意義: 排除了呼吸因素的影響 反映代謝性酸堿紊亂,正常值: 21～25 mmol/L,實(shí)際碳酸氫鹽(AB),正常值: 21～26 mmol/L,受呼吸和代謝兩方面的影響當(dāng)AB＝SB ＝

22、21～26 mmol/L時(shí)，正常AB ，SB 同時(shí)升高或降低，反映代謝因素 AB＞ SB，表示CO2有潴留，合并呼吸因素 AB＜ SB，表示CO2排出過多，合并呼吸因素,堿剩余(BE),意義: BE正值增大－代堿 BE負(fù)值增大－代酸,正常值: 0±3 mmol/L,概念: 標(biāo)準(zhǔn)條件下，將1升全血 或血漿滴定到 pH 7.4所 需的酸或堿的量。,動脈血氧分

23、壓（PaO2）參考值：75-105mmHgPaO2 越高，HbO2%越高反映肺通氣或( 和 )換氣功能： PaO2<55mmHg提示有呼吸衰竭；PaO2<30mmHg既有生命危險(xiǎn)。,氧分壓,陰離子間隙(AG),概念：是指血漿中未測定陰離子量與未測定陽離子量的差值。,AG = UA - UC,Na++K+ +UC = Cl- + HCO3- + UA,UA-UC=AG = Na+ +K+ - Cl- - HCO3-,血N

24、a++K+濃度減去血Cl－和HCO3－的濃度，等于血漿中未測定陰離子(UA)與未測定陽離子(UC)的差值。,陰離子間隙(AG),意義: ①AG升高：［H+］增加引起的代謝性酸中毒； ②AG正常： HCO3-原發(fā)性降低而血氯升高的代謝性酸中毒。,正常范圍 Na+ - Cl- - HCO3- : 7～14mmol/LNa+ +K+ - Cl- - HCO3- : 10～18mmol/L,酸堿平衡及調(diào)節(jié),酸堿平衡