臨床生物化學

1、臨床生物化學Clinical Biochemistry,第一節(jié)緒 論,1、臨床生化的定義應(yīng)用學科研究范圍： 器官、組織和體液的化學組成和進行著的生物化學過程,目的：疾病診斷病情監(jiān)測治療效果預后評估疾病預防提供客觀、科學的實驗室依據(jù)2、主要作用理論方面：Chemical Pathology 技術(shù)方面：Clinical Chemistry,,第二章,蛋白質(zhì)(Proteins) &臨床診斷,第一節(jié)

2、 血漿蛋白質(zhì)的概述 （一)分類,1、按結(jié)構(gòu)組成（1）簡單蛋白(e.g., 白蛋白)...(amino acid)a.a.— a.a. — a.a.… 肽鍵　　　　　 (共價連接）,,,（2）、結(jié)合蛋白,氨基酸,,輔基,,金屬蛋白脂蛋白糖／粘蛋白核蛋白　 etc.,非氨基酸,,2、按功能,（1） 運載蛋白（2） 補體蛋白（3） 免疫球蛋白

3、 （4） 凝血蛋白 （5） 激素蛋白 （6） 酶功能蛋白,3、按電泳(醋纖or瓊脂糖凝膠）,?1抗胰蛋白酶? 1酸性糖蛋白 ?1lipoproteinAFP,HpAMGCER,TRFHx?-lipoproteinC4,FibrinogenC3? 2MG,IgCRP,,,,,營養(yǎng)緩沖與膠體滲透壓運載免疫與防御凝血與纖維蛋白原溶解各種酶的功能代謝調(diào)控,,（二）

4、血漿蛋白質(zhì)的生理功能,第二節(jié) 主要的血漿蛋白質(zhì),合成/分解部位　理化性質(zhì)　生理功能　臨床意義,,從,,一、前白蛋白（Prealbumin, PA),1、合成部位：肝細胞 2、理化性質(zhì) 電泳圖譜位置位于白蛋白前 半衰期短(t1/2<12h）3、生理功能 組織修補 甲狀腺素 運載 維生素A,,,,4、臨床意義,炎癥 惡性腫瘤

5、肝硬化 腎炎,,,血漿PA水平,,二、白蛋白(Albumin, Alb),1、合成部位：肝實質(zhì)細胞2、含量: 最多, 占血漿總蛋白40% – 60%3、理化性質(zhì) MW ?66000 單鏈多肽，不含糖組分 pI = 4.0 – 5.8 t1/2 = 15 – 19d,4、生理功能 運載 膽紅素、游離脂肪酸、激素、藥物 營養(yǎng)： 內(nèi)源性氨基酸營養(yǎng)源 維持滲透壓：占75%血漿膠體滲透壓 緩沖酸與堿的能力,

6、5、臨床意義,（1） 低白蛋白血癥(Hypoalbuminemia)懷孕合成減少： 營養(yǎng)不良or 吸收不良　　　　　急、慢性肝病異常丟失： 腎病綜合征　　　　 嚴重失血　　　　　 燒傷　　　　　　 代謝增加：甲亢　　　燒傷　　　　　　　惡性腫瘤,,（2）高白蛋白血癥： 脫水（3）白蛋白的遺傳變異：20余種 雙白蛋白血癥,AATAAG?!–lipoproteinAFP,,三、?1-

7、抗胰蛋白酶(?1-antitrypsin, AAT),1、 理化性質(zhì)：MW 54,000 糖蛋白(含糖10–12%) pI = 4.8 t1/2 = 1 week2、 分解代謝部位：肝臟,3、生理功能蛋白酶抑制作用　血清中, 抑制胰蛋白酶活力90% ；　pH依賴中性和弱堿性　最大pH4.5活性喪失對抗由多形核白細胞吞噬作用釋放的溶酶體蛋白水解酶,4、臨床意義 急

8、性時相反應(yīng)蛋白血漿AAT升高的原因:　炎癥、腫瘤　懷孕　雌激素治療血漿AAT降低的原因:　胎兒呼吸窘迫綜合征　嚴重的蛋白丟失疾病　先天性缺陷＊,,,＊AAT基因系統(tǒng)－單個常染色體基因位點－已知40余個等位基因,四、?１-酸性糖蛋白(?１-acid glycoprotein, AAG),1、合成部位：肝臟／腫瘤組織2、理化性質(zhì)MW40,000含糖45%pI 2.7-3.53、生理功能促

9、進血小板的凝集和粘附,4、臨床意義血漿AAG?急性時相反應(yīng)蛋白 風濕病 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE) 惡性腫瘤血漿AAG?營養(yǎng)不良、嚴重肝損害,,五、甲胎蛋白(?１-fetoprotein, AFP),1、合成部位：卵黃囊和胎兒肝臟2、含量變化,3、理化性質(zhì)MW 70,000糖蛋白基因位點：4q11-224、生理功能： 防止母體對胎兒的免疫排斥（細胞免疫反應(yīng)和體液免疫反應(yīng)）,5、臨床意義（1）胎兒

10、產(chǎn)前診斷／篩選羊水／孕婦血清AFP?: 神經(jīng)管缺陷等羊水／孕婦血清AFP?: Down’s syndrome** Down’s syndrome (Trisomy 21) 發(fā)生率：1:700-1000 孕婦血清篩選: AFP – 25% AFP+hCG – 60% AFP+hCG+uE3 – 70%,,（2）腫瘤標志物　血清AFP?? 80%肝細胞癌

11、 50%生殖細胞癌,,HpAMGCER,,六、結(jié)合珠蛋白(Haptoglobin, Hp),1、合成部位：肝細胞／網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)細胞2、理化性質(zhì)糖蛋白 — 兩對肽鏈(?2 ?2)四聚體表現(xiàn)型：3種 (type1-1, 2-1, 2-2)3、生理功能 與紅細胞中釋出的自由形式存在的血紅蛋白結(jié)合,Hp,Hb,,,Hp,Hb,Hb,+ 2,,4、臨床意義Hp? :　急性時相反應(yīng)蛋白

12、 (燒傷、腎病綜合征)Hp?:　血管內(nèi)溶血(溶貧、輸血反應(yīng)、虐疾),七、?2-巨球蛋白(?2-macroglobulin, AMG),1、合成部位：肝臟／網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)2、理化性質(zhì)MW 625,000-800,000　最大t1/2 = 5 days糖蛋白：含糖?8%4個亞單位,3、生理功能與多種分子和離子結(jié)合　e.g.,　蛋白酶　　抑制酶活性 +AMG　　4、臨床意義　AMG?：低白蛋

13、白血癥 妊娠 雌激素治療,,,八、銅藍蛋白(Ceruloplasmin, CER),1、合成部位：肝臟2、生理功能氧化酶的活性：Fe2+Fe3+,CER,,抗氧化劑作用 防止脂質(zhì)過氧化物&自由基的生成,4、臨床意義診斷Wilson病＊：CER??＋可透析Cu?＊常染色體隱性遺傳病?CER產(chǎn)物缺乏?Cu積聚在某些組織(肝／腦／角膜) ?病變(肝豆狀核變性／神經(jīng)系統(tǒng)病),CER?：急性時

14、相反應(yīng)蛋白 感染、創(chuàng)傷和腫瘤、妊娠、 口服避孕藥CER?： 營養(yǎng)不良、腎病、嚴重肝病,TRFHpx?-lipoproteinC4,FibrinogenC3? 2MG,,九、轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin, TRF),1、合成部位：肝臟／網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)／內(nèi)分泌腺體2、理化性質(zhì) 含鐵糖蛋白 t1/2 = 7 days 血漿TRF水平由鐵供應(yīng)調(diào)節(jié),3、生

15、理功能運載鐵：TRF + 2Fe3+?TRF-Fe3+貯鐵,,4、臨床意義貧血的診斷和治療監(jiān)測 缺鐵性低色素性貧血：TRF? 鐵利用障礙的貧血(再障)：TRF? 鐵負荷過量：TRF正常,TRF?：反向的APR（炎癥、惡性腫瘤等)營養(yǎng)指標（慢性肝病、營養(yǎng)不良）TRF?：妊娠和雌激素治療,十、?2-微球蛋白(?2-microglobulin, BMG),1、存在部位：所有有核細胞表面(淋巴細 胞和腫瘤細胞)2

16、、理化性質(zhì)MW = 11,800小分子t1/2 = 107 mins細胞表面HLA的?鏈(輕鏈),3、臨床意義BMG?:腎功能衰竭(監(jiān)測腎小管功能)炎癥腫瘤(與B淋巴細胞有關(guān)),,十、血紅素結(jié)合蛋白(Hemopexin, Hpx)1、合成部位：肝臟2、理化性質(zhì)：糖蛋白(含糖22%)3、生理功能：與游離血紅素特異結(jié)合 配合Hp 對Hb的處理

17、 保存鐵,,IgCRP,,十二、C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein, CRP),1、合成部位；肝臟 2、生理功能結(jié)合： 卵磷脂/核酸,CRP,,,Ca2+,復合體,+,補體系統(tǒng),,,+,,,多糖物質(zhì),免疫調(diào)理和吞噬作用,4、臨床意義CRP??:APR–心梗、創(chuàng)傷、外科感染、腫瘤增殖評估炎性類疾病的程度檢測并發(fā)感染,第三節(jié)

18、血漿蛋白質(zhì)的正常參考值,(1) 年齡(2) 性別(3) 個體不同時期及個體差異,第四節(jié) 疾病與血漿蛋白質(zhì)變化的關(guān)系,一、急性時相反應(yīng)（acute phase reactants, APR)定義： 包括AAT、AAG、Hp、CER、C4、C3、纖維蛋白原、CRP等等。其血漿濃度在炎癥、創(chuàng)傷、心肌梗死、感染、腫瘤等情況下顯著上升。而PA、Alb、TRF則出現(xiàn)相應(yīng)的低下，以上這類蛋白質(zhì)稱為急性時相蛋白。

19、這一現(xiàn)象稱為急性時相反應(yīng)。,肝硬化蛋白質(zhì)：?—AAT, CER, CRP, IgG/A ?—PA, Alb, AAG, Hp, AMG, TRF,二、肝疾病急性肝炎 蛋白質(zhì)：?—AAT, IgM ?—PA, Alb, Hp,三、選擇性蛋白質(zhì)的丟失疾病：腎病 or 腸道病蛋白質(zhì)： ?—PA, Alb, AAT, AAG, TRF,IgG

20、?—AMG, Hp, IgM,四、妊娠及高雌激素血癥蛋白質(zhì)： ?—PA, Alb, AAG, IgG ?—AAT, CER, TRF五、遺傳性缺陷 編碼蛋白質(zhì)基因的突變 or 缺失 相應(yīng)蛋白質(zhì)變異 or 量的缺乏,,第五節(jié) 血漿蛋白質(zhì)的檢測,(1)化學法：定量血漿總蛋白和白蛋白(2)電泳法：半定量主要蛋白質(zhì)組分；利用 表面電荷和分子大小；醋纖和

21、 瓊脂糖凝膠(3)免疫化學法： 定量個別蛋白質(zhì)； 特異的抗血清(抗體)來測定抗原-抗體 復合物,比濁法散射比濁法Pro. + 抗體?免疫沉淀復合物(光散射性質(zhì)) ? 光散射量?Pro.濃度透射比濁法免疫擴散： -放射免疫擴散(RID)Pro. 在含有抗體(anti-pro.)凝膠中擴散?環(huán)型免疫沉淀?環(huán)直徑?Pro.濃度電泳免疫擴散(EID, Laurell ro